過(guò)氧化氫誘導(dǎo)BMSCs氧化衰老模型的建立及其對(duì)相關(guān)基因p16、p21、p53表達(dá)的影響
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【摘要】:【目的】探究過(guò)氧化氫(H2O2)對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)氧化應(yīng)激損傷所致衰老的相關(guān)機(jī)制,摸索合適的H2O2衰老造模濃度,為后期的藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)研究奠定基礎(chǔ)。【方法】采用全骨髓貼壁法培養(yǎng)BMSCs,H2O2分別以100、200、300、400、500、600、700、800、1 000μmol/L濃度作用于BMSCs 2、12、24、48 h,采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞代謝活力;β-半乳糖苷酶染色判斷細(xì)胞衰老的建立成功與否;采用反轉(zhuǎn)錄熒光定量技術(shù)(RT-q real-time PCR)觀察衰老相關(guān)基因p16、p21、p53表達(dá)水平的變化!窘Y(jié)果】當(dāng)H2O2濃度700μmol/L時(shí),BMSCs凋亡明顯升高,而H2O2濃度400μmol/L時(shí),變化不明顯,甚至有刺激BMSCs增殖的作用;以500μmol/L H2O2作用BMSCs 24 h后,β-半乳糖苷酶染色陽(yáng)性率顯著增加,p21、p16、p53基因表達(dá)顯著升高,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。【結(jié)論】以500μmol/L H2O2濃度作用于BMSCs 24 h后,可造成BMSCs氧化損傷衰老模型,并可使衰老相關(guān)基因p16、p21、p53表達(dá)上調(diào)。
【作者單位】: 廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院;廣東省中醫(yī)院骨科;廣東省惠州市惠陽(yáng)區(qū)中醫(yī)院;河南省長(zhǎng)葛市人民醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】: 過(guò)氧化氫 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞/病理學(xué) 氧化應(yīng)激 衰老 細(xì)胞培養(yǎng)
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):30772817)
【分類(lèi)號(hào)】:R363
【正文快照】: 隨著社會(huì)迅速步入老齡化,氧化應(yīng)激作為一個(gè)健康威脅的因素越來(lái)越受到人們的重視。當(dāng)機(jī)體內(nèi)抗氧化和促氧化系統(tǒng)平衡失調(diào),會(huì)導(dǎo)致生成有毒的活性氧(reactive oxygen species,ROS)[1]。ROS直接調(diào)控衰老相關(guān)的信號(hào)通路,促進(jìn)機(jī)體衰老的發(fā)生[2]。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal s
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條
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【相似文獻(xiàn)】
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6 周s,
本文編號(hào):1115381
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