本文關(guān)鍵詞：11型HPV E7蛋白的表達(dá)及其多克隆抗體的制備

  更多相關(guān)文章： 人乳頭瘤病毒 E蛋白 原核表達(dá) 多克隆抗體

【摘要】：目的構(gòu)建人11型乳頭瘤病毒(HPV 11)E7蛋白的原核表達(dá)載體,表達(dá)純化后制備抗HPV11E7蛋白的多克隆抗體。方法構(gòu)建pGEX-4T2-HPV11E7原核表達(dá)載體,異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)大腸桿菌表達(dá)可溶性融合蛋白GST-HPV11E7,純化獲取11型HPVE7蛋白。將HPV11E7蛋白免疫新西蘭大白兔獲得抗HPV11E7的多克隆抗體,用蛋白G瓊脂糖純化獲得IgG型多克隆抗體。Western blot法及免疫熒光染色檢測該抗體的效價(jià)及特異性。結(jié)果 SDS-PAGE結(jié)果顯示,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)6 h后可表達(dá)出高水平可溶性GST-HPV11E7融合蛋白。純化后免疫新西蘭大白兔獲得抗HPV11E7的血清,純化獲得了IgG型多克隆抗體。Western blot及免疫熒光染色結(jié)果顯示,兔抗HPV11E7 IgG具有效價(jià)高和特異性強(qiáng)的特點(diǎn)。結(jié)論成功表達(dá)了HPV11E7蛋白并制備了效價(jià)較高、特異性較好的IgG型兔抗HPV11E7蛋白多克隆抗體。
【作者單位】： 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院皮膚科;浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院生物醫(yī)學(xué)研究中心;浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 人乳頭瘤病毒 E蛋白 原核表達(dá) 多克隆抗體
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81071302);國家自然科學(xué)基金青年基金(81000698) 浙江省衛(wèi)生高層次創(chuàng)新人才培養(yǎng)計(jì)劃(2007年)
【分類號】：R392
【正文快照】： 人乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)是一種雙鏈DNA病毒,約有200余種亞型。根據(jù)病毒的基因組結(jié)構(gòu)、生物學(xué)特性和致病性,可分為五大類,即α、β、γ、μ和ν,6型和11型HPV是低危型,屬于α乳頭瘤病毒,超過90%的生殖器疣是由此類HPV引發(fā)的[1]。11型HPV主要感染鱗狀上皮,導(dǎo)致

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孟憲芳;施靜;劉曉春;陳金中;;人類組氨酰TRNA合成酶類似物的原核表達(dá)及其多克隆抗體的制備[J];中國病理生理雜志;2005年12期

2 李成文;核酸的免疫分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J];生物技術(shù)通訊;1996年04期

3 袁祥鵬,鞠躬;多克隆免疫激發(fā)劑LPS免疫激發(fā)大鼠引起下丘腦和腦干核團(tuán)c-fos表達(dá)[J];解剖學(xué)報(bào);1997年02期

4 王運(yùn)平;自身免疫病發(fā)病機(jī)制的新認(rèn)識─B細(xì)胞超抗原引起的多克隆活化[J];國外醫(yī)學(xué).免疫學(xué)分冊;1998年04期

5 太田善介 ,矢野啟介 ,王春榮;SLE患者多克隆B細(xì)胞活化的意義[J];國際免疫學(xué)雜志;1985年01期

6 林鳳茹;持久性多克隆B淋巴細(xì)胞增多癥[J];國外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊;1998年06期

7 郭品娥;一例罕見的多克隆B淋巴細(xì)胞增多癥[J];國外醫(yī)學(xué).兒科學(xué)分冊;2001年03期

8 杜琳;細(xì)胞因子用作疫苗佐劑:抗原特異性應(yīng)答與多克隆應(yīng)答的區(qū)別[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;1996年01期

9 董作仁;持久性多克隆B淋巴細(xì)胞增多癥[J];中國實(shí)用內(nèi)科雜志;2001年06期

10 李吾爾;使用DAF技術(shù)評價(jià)多克隆和單克隆RhD擾體的功能特征[J];國外醫(yī)學(xué).輸血及血液學(xué)分冊;1997年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 周建華;姜成剛;馬建;林躍智;沈榮顯;;馬傳染性貧血病毒弱毒疫苗多克隆構(gòu)成與保護(hù)性免疫關(guān)系研究[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年

2 崔惠娟;洪素梅;陳志虎;畢丁仁;李自力;;豬FcRn胞漿尾區(qū)的克隆表達(dá)及多克隆抗體制備[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會生物制品學(xué)分會中國微生物學(xué)會獸醫(yī)微生物學(xué)專業(yè)委員會2010年學(xué)術(shù)年會（第三屆中國獸藥大會學(xué)術(shù)論壇）論文集[C];2010年

3 周毅;;介紹一種快速、準(zhǔn)確確證人血的方法[A];第五次全國法醫(yī)學(xué)術(shù)交流會論文集[C];1996年

4 陸才生;Kwan-Ki Hwang;Arash A.Horizon;Bevra H.Hahn;古潔若;Pojen P.Chen;;抗磷脂抗體綜合征患者單克隆與多克隆抗t-PA抗體的研究[A];首屆全國中青年風(fēng)濕病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2004年

5 丁涵露;何婭妮;吳麗娟;李開龍;楊聚榮;李小琳;;狼瘡性腎炎患者外周血B細(xì)胞PD-L2的表達(dá)變化[A];中華醫(yī)學(xué)會腎臟病學(xué)分會2006年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2006年

6 馬煥艷;韓鳳麗;盛潔;薛仁宇;曹廣力;貢成良;;家蠶STAT基因的克隆、表達(dá)及多克隆抗體制備與組織表達(dá)差異分析[A];中國蠶學(xué)會第六屆青年學(xué)術(shù)研討會論文集（1）[C];2009年

7 施若非;趙肖慶;鄭捷;;多中心性Castleman病[A];華東六省一市第八次皮膚性病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2007年

8 周健;宋永平;魏旭東;郭坤元;;異基因造血干細(xì)胞移植前后外周血TCRαβT細(xì)胞克隆的變化[A];第12屆全國實(shí)驗(yàn)血液學(xué)會議論文摘要[C];2009年

9 叢文銘;吳孟超;;肝細(xì)胞癌的克隆起源方式及其臨床病理學(xué)意義[A];第十二屆全國肝癌學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

10 李慶章;張莉;關(guān)宏斌;;重組山羊FSH雙基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建[A];動(dòng)物生理生化學(xué)分會第八次學(xué)術(shù)會議暨全國反芻動(dòng)物營養(yǎng)生理生化第三次學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C];2004年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院教授 李祥瑞;疫苗預(yù)防——畜禽寄生蟲病防制目標(biāo)[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報(bào);2005年

2 朱麗華;克隆形式更要克隆內(nèi)容[N];中國醫(yī)藥報(bào);2005年

3 江 南;服裝“傍名牌”剪不斷理還亂[N];山西日報(bào);2005年

4 ;慢性HBV感染使樹突狀細(xì)胞功能受損[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

5 錢錚 曲國斌;重新審視克隆技術(shù)[N];西藏日報(bào);2003年

6 記者 曲國斌、林小春、錢錚;多利之死與克隆技術(shù)[N];新華每日電訊;2003年

7 譚初兵;肌原細(xì)胞介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移在治療性血管新生中的應(yīng)用 Myoblast-mediated Gene Transfer for Therapeutic Angiogenesis[N];中國醫(yī)藥報(bào);2006年

8 顧瑞金;胃腸癌來源于干細(xì)胞[N];中國中醫(yī)藥報(bào);2003年

9 曲欣;克隆技術(shù)能否治療人類疾病[N];健康報(bào);2002年

10 錢海紅 宋小寧;前列腺癌基因機(jī)制被闡明[N];健康報(bào);2004年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前9條

1 范華驊;體外擴(kuò)增的人調(diào)節(jié)性T細(xì)胞抑制小鼠骨髓移植急性移植物抗宿主病[D];華東師范大學(xué);2012年

2 孟慶軍;模擬失重下血管分化性改變的局部調(diào)節(jié)機(jī)制—L-RAS與收縮蛋白[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2002年

3 時(shí)嵐;PIP5KL1在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的功能研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

4 時(shí)紀(jì)元;人工合成SHH蛋白N末端基因的Pichia酵母表達(dá)及其多克隆抗體制備[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

5 谷燕;IL-12，，IL-23和IL-17在再生障礙性貧血中的作用[D];山東大學(xué);2008年

6 夏玉坤;人源H5N1禽流感病毒株HA1蛋白抗原表位分析及在人靶細(xì)胞上復(fù)制能力差異的分子機(jī)制研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2009年

7 劉海偉;CREG表達(dá)調(diào)控人血管平滑肌細(xì)胞HITASY表型轉(zhuǎn)換機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

8 任曉峰;豬傳染性胃腸炎病毒TH-98株S基因多表達(dá)系統(tǒng)與DNA疫苗的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

9 張新海;小鼠PTA1/CD226分子的基因克隆及其表達(dá)、分布和功能研究[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 吳耀麗;豬XCL1基因原核表達(dá)、多克隆抗體制備及產(chǎn)物活性鑒定[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2011年

2 李袁飛;凋亡相關(guān)新基因apr-2的克隆、表達(dá)及多克隆抗血清的制備[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

3 王飛;牡蠣包納米蟲體外培養(yǎng)及多克隆抗體制備研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

4 李志茹;擬除蟲菊酯類農(nóng)藥通用抗體制備及高效氯氟氰菊酯免疫檢測技術(shù)研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

5 潘蔚綺;雞白細(xì)胞介素18成熟蛋白基因克隆、表達(dá)及多克隆抗體制備[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

6 李昕;280例系統(tǒng)性紅斑狼瘡住院患者臨床病例分析[D];天津醫(yī)科大學(xué);2004年

7 譚雯雯;豬β-防御素2多克隆和單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

8 王頌;南方水稻黑條矮縮病原核表達(dá)及多克隆抗體制備[D];福建農(nóng)林大學(xué);2012年

9 李國勝;家蠶絲氨酸蛋白酶抑制劑Serpin5多克隆抗體制備及組織表達(dá)分析[D];蘇州大學(xué);2013年

10 郭函子;冬棗(Ziziphus jujuba Mill.)果實(shí)多聚半乳糖醛酸酶多克隆抗體制備及抑制劑篩選[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2001年

本文編號：1047337