本文關(guān)鍵詞：反枝莧花粉泛過敏原profilin基因的克隆表達、純化及免疫學(xué)鑒定

  更多相關(guān)文章： 反枝莧花粉 抑制蛋白 基因表達 純化

【摘要】：目的克隆表達反枝莧花粉中泛變應(yīng)原肌動蛋白抑制蛋白(profilin),并鑒定其免疫學(xué)活性。方法利用RT-PCR結(jié)合RACE技術(shù)克隆反枝莧花粉泛變應(yīng)原profilin的全長基因,并進行序列分析。設(shè)計帶有酶切位點的特異性引物,采用RT-PCR獲得整個反枝莧花粉profilin的開放閱讀框,將其與p ET28a載體連接并轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)進行誘導(dǎo)表達,Ni2+親和層析柱純化重組蛋白,采用Western-blot檢測其Ig E結(jié)合活性。結(jié)果 c DNA核苷酸測序表明反枝莧花粉profilin的全長基因由675個堿基組成,開放閱讀框為399 bp,編碼131個氨基酸。重組反枝莧花粉profilin在大腸桿菌中可溶性表達,進一步經(jīng)Western-blot檢測具有良好的Ig E結(jié)合活性。結(jié)論成功地克隆和表達了反枝莧花粉profilin,并具有良好的Ig E應(yīng)答免疫活性。
【作者單位】： 贛南醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室;南昌大學(xué)科學(xué)技術(shù)學(xué)院;深圳大學(xué)過敏反應(yīng)與免疫學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 反枝莧花粉 抑制蛋白 基因表達 純化
【基金】：國家自然科學(xué)基金(811160129、81302553) 廣東省工程技術(shù)研究開發(fā)中心項目(2013158925) 廣東省高等學(xué)校國際暨港澳臺科技合作創(chuàng)新平臺項目(2012gjhz0009)
【分類號】：R392.8
【正文快照】： 眾多過敏原中,氣傳致敏花粉是導(dǎo)致氣道變態(tài)反應(yīng)疾病的最主要誘因之一。大約有20%的過敏患者吸入大氣花粉會出現(xiàn)Ig E介導(dǎo)的過敏性哮喘、過敏性鼻炎等疾病[2]。野莧菜花粉是我國華南地區(qū)常見的氣傳花粉之一,屬于莧科,全世界有40多種,多分布在溫帶氣候的歐美國家,在我國各地均有

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 吳凱威;余曉;劉志剛;宋娟娟;張紅云;;大豆泛變應(yīng)原profilin基因的克隆、序列分析和表位預(yù)測[J];大豆科學(xué);2007年01期

2 謝水祥;謝瓊s，

本文編號：1017770