本文關(guān)鍵詞：反枝莧花粉泛過(guò)敏原profilin基因的克隆表達(dá)、純化及免疫學(xué)鑒定

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【摘要】：目的克隆表達(dá)反枝莧花粉中泛變應(yīng)原肌動(dòng)蛋白抑制蛋白(profilin),并鑒定其免疫學(xué)活性。方法利用RT-PCR結(jié)合RACE技術(shù)克隆反枝莧花粉泛變應(yīng)原profilin的全長(zhǎng)基因,并進(jìn)行序列分析。設(shè)計(jì)帶有酶切位點(diǎn)的特異性引物,采用RT-PCR獲得整個(gè)反枝莧花粉profilin的開(kāi)放閱讀框,將其與p ET28a載體連接并轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),Ni2+親和層析柱純化重組蛋白,采用Western-blot檢測(cè)其Ig E結(jié)合活性。結(jié)果 c DNA核苷酸測(cè)序表明反枝莧花粉profilin的全長(zhǎng)基因由675個(gè)堿基組成,開(kāi)放閱讀框?yàn)?99 bp,編碼131個(gè)氨基酸。重組反枝莧花粉profilin在大腸桿菌中可溶性表達(dá),進(jìn)一步經(jīng)Western-blot檢測(cè)具有良好的Ig E結(jié)合活性。結(jié)論成功地克隆和表達(dá)了反枝莧花粉profilin,并具有良好的Ig E應(yīng)答免疫活性。
【作者單位】： 贛南醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室;南昌大學(xué)科學(xué)技術(shù)學(xué)院;深圳大學(xué)過(guò)敏反應(yīng)與免疫學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 反枝莧花粉 抑制蛋白 基因表達(dá) 純化
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(811160129、81302553) 廣東省工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心項(xiàng)目(2013158925) 廣東省高等學(xué)校國(guó)際暨港澳臺(tái)科技合作創(chuàng)新平臺(tái)項(xiàng)目(2012gjhz0009)
【分類號(hào)】：R392.8
【正文快照】： 眾多過(guò)敏原中,氣傳致敏花粉是導(dǎo)致氣道變態(tài)反應(yīng)疾病的最主要誘因之一。大約有20%的過(guò)敏患者吸入大氣花粉會(huì)出現(xiàn)Ig E介導(dǎo)的過(guò)敏性哮喘、過(guò)敏性鼻炎等疾病[2]。野莧菜花粉是我國(guó)華南地區(qū)常見(jiàn)的氣傳花粉之一,屬于莧科,全世界有40多種,多分布在溫帶氣候的歐美國(guó)家,在我國(guó)各地均有

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 吳凱威;余曉;劉志剛;宋娟娟;張紅云;;大豆泛變應(yīng)原profilin基因的克隆、序列分析和表位預(yù)測(cè)[J];大豆科學(xué);2007年01期

2 謝水祥;謝瓊s，

本文編號(hào)：1017770