本文關(guān)鍵詞：環(huán)氧化酶2基因沉默不影響人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化的能力

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【摘要】：背景:目前環(huán)氧化酶2基因沉默在干細(xì)胞中的研究還處在初級(jí)階段。目的:構(gòu)建攜帶環(huán)氧化酶2基因沉默的慢病毒載體,觀察其在人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的表達(dá),以及其定向分化潛能變化情況。方法:應(yīng)用重組慢病毒技術(shù)構(gòu)建攜帶沉默環(huán)氧化酶2基因和綠色熒光蛋白的慢病毒載體,并用其轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)第3代的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,以無(wú)目的基因的慢病毒轉(zhuǎn)染人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)組和未做處理的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分別作為陰性對(duì)照組和空白組進(jìn)行對(duì)比。轉(zhuǎn)染后7 d分別提取各組細(xì)胞的總RNA和蛋白檢測(cè)環(huán)氧化酶2表達(dá)量。對(duì)環(huán)氧化酶2基因沉默的人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和正常人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向誘導(dǎo),觀察環(huán)氧化酶2基因沉默對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂、成骨、成軟骨能力的影響。結(jié)果與結(jié)論:慢病毒轉(zhuǎn)染3 d后,熒光顯微鏡下可見(jiàn)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞發(fā)出綠色熒光,陰性對(duì)照組轉(zhuǎn)染效率可達(dá)90%以上,實(shí)驗(yàn)組轉(zhuǎn)染效率達(dá)85%以上。RT-PCR和Western blot檢測(cè)結(jié)果顯示,環(huán)氧化酶2基因在人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞中的基因水平和蛋白水平均得到了明顯抑制。環(huán)氧化酶2基因轉(zhuǎn)染對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成脂、成骨、成軟骨能力無(wú)明顯影響。
【作者單位】： 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院;山東省創(chuàng)傷骨科研究所 關(guān)節(jié)外科;青島大學(xué)附屬煙臺(tái)毓璜頂醫(yī)院腫瘤科;青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 中心實(shí)驗(yàn)室;雙鴨山市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【關(guān)鍵詞】： 干細(xì)胞 骨髓干細(xì)胞 人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 重組慢病毒 環(huán)氧化酶基因 基因沉默 成脂分化 成骨分化 成軟骨分化 國(guó)家自然科學(xué)基金
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81171774,81272056)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction基因治療是隨著DNA重組技術(shù)的成熟而發(fā)展起來(lái)的,它是當(dāng)代醫(yī)學(xué)和生物學(xué)的一個(gè)新的研究領(lǐng)域[1-2],可通過(guò)一定方式將正�；蚧蛴兄委熥饔玫腄NA序列導(dǎo)入靶細(xì)胞以糾正基因的缺陷或發(fā)揮治療作用,從而達(dá)到治療疾病的目的。近年來(lái),基因治療已成為生物醫(yī)學(xué)和組織工程

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【相似文獻(xiàn)】

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4 李瀚e，

本文編號(hào)：1017796