本文關鍵詞：環(huán)氧化酶2基因沉默不影響人骨髓間充質干細胞定向分化的能力

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【摘要】：背景:目前環(huán)氧化酶2基因沉默在干細胞中的研究還處在初級階段。目的:構建攜帶環(huán)氧化酶2基因沉默的慢病毒載體,觀察其在人骨髓間充質干細胞中的表達,以及其定向分化潛能變化情況。方法:應用重組慢病毒技術構建攜帶沉默環(huán)氧化酶2基因和綠色熒光蛋白的慢病毒載體,并用其轉染體外培養(yǎng)第3代的人骨髓間充質干細胞,以無目的基因的慢病毒轉染人骨髓間充質干細胞的實驗組和未做處理的人骨髓間充質干細胞分別作為陰性對照組和空白組進行對比。轉染后7 d分別提取各組細胞的總RNA和蛋白檢測環(huán)氧化酶2表達量。對環(huán)氧化酶2基因沉默的人骨髓間充質干細胞和正常人骨髓間充質干細胞定向誘導,觀察環(huán)氧化酶2基因沉默對人骨髓間充質干細胞成脂、成骨、成軟骨能力的影響。結果與結論:慢病毒轉染3 d后,熒光顯微鏡下可見人骨髓間充質干細胞發(fā)出綠色熒光,陰性對照組轉染效率可達90%以上,實驗組轉染效率達85%以上。RT-PCR和Western blot檢測結果顯示,環(huán)氧化酶2基因在人骨髓間充質干細胞中的基因水平和蛋白水平均得到了明顯抑制。環(huán)氧化酶2基因轉染對人骨髓間充質干細胞成脂、成骨、成軟骨能力無明顯影響。
【作者單位】： 青島大學醫(yī)學院附屬醫(yī)院;山東省創(chuàng)傷骨科研究所 關節(jié)外科;青島大學附屬煙臺毓璜頂醫(yī)院腫瘤科;青島大學醫(yī)學院附屬醫(yī)院 中心實驗室;雙鴨山市人民醫(yī)院檢驗科;
【關鍵詞】： 干細胞 骨髓干細胞 人骨髓間充質干細胞 重組慢病毒 環(huán)氧化酶基因 基因沉默 成脂分化 成骨分化 成軟骨分化 國家自然科學基金
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81171774,81272056)~~
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 0引言Introduction基因治療是隨著DNA重組技術的成熟而發(fā)展起來的,它是當代醫(yī)學和生物學的一個新的研究領域[1-2],可通過一定方式將正�；蚧蛴兄委熥饔玫腄NA序列導入靶細胞以糾正基因的缺陷或發(fā)揮治療作用,從而達到治療疾病的目的。近年來,基因治療已成為生物醫(yī)學和組織工程

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4 李瀚e，

本文編號：1017796