發(fā)布時(shí)間：2017-09-21 19:41

  本文關(guān)鍵詞：一種發(fā)育期皮質(zhì)脊髓投射神經(jīng)細(xì)胞基因表達(dá)譜的研究方法

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【摘要】：皮質(zhì)脊髓投射神經(jīng)細(xì)胞(cortico-spinal projection neurons,CSPN)對(duì)于大腦的功能非常重要,但目前還缺乏研究小鼠發(fā)育期CSPN基因表達(dá)譜的有效方法。將出生后2 d(P2)的小鼠在脊髓交叉處注射逆行標(biāo)記的神經(jīng)示蹤劑,并在P8時(shí)進(jìn)行激光顯微切割。提取捕獲細(xì)胞的RNA并線性放大,而后利用定量PCR進(jìn)行皮層標(biāo)記基因的驗(yàn)證,線性放大后的RNA與大腦皮層組織的RNA相比,第五皮層標(biāo)記基因Fezf2(Fez family zinc fi nger 2)表達(dá)明顯升高,第四、第六皮層標(biāo)記基因Rorβ(RAR related orphan receptorβ)、Foxp2(forkhead box P2)的表達(dá)相對(duì)較低。之后,進(jìn)行小鼠基因芯片表達(dá)譜檢測(cè),通過(guò)基因功能富集度分析發(fā)現(xiàn),在CSPN中大多數(shù)富表達(dá)的基因都與G蛋白偶聯(lián)受體信號(hào)通路以及運(yùn)動(dòng)行為有關(guān)。而且,染色質(zhì)的修飾和編排相關(guān)基因在CSPN里也有富集表達(dá)。通過(guò)定量PCR進(jìn)一步驗(yàn)證了芯片中CSPN的富集基因,結(jié)果發(fā)現(xiàn),Meg3(maternally expressed gene 3)等7個(gè)基因在大腦第五皮層表達(dá)豐富。該研究將在體神經(jīng)細(xì)胞熒光標(biāo)記、激光捕獲顯微切割、RNA線性放大、基因芯片及定量PCR等多種技術(shù)結(jié)合起來(lái),提供了一種研究發(fā)育期小鼠CSPN基因表達(dá)譜的方法。
【作者單位】： 衛(wèi)生部視覺(jué)科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室溫州醫(yī)科大學(xué)眼視光學(xué)院;麗水市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第六醫(yī)院;麗水市中心醫(yī)院眼科溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第五醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 皮質(zhì)脊髓投射神經(jīng)元 激光捕獲顯微切割技術(shù) 發(fā)育 基因表達(dá)譜
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):31500850) 浙江省自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):LY15H090020;LQ16H120001) 麗水市公益性技術(shù)應(yīng)用項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):2014JYZB03)資助的課題~~
【分類號(hào)】：R338
【正文快照】： linearly and verified through the marker genes of each layer by q PCR.While layer V marker gene Fezf2(Fezfamily zinc fi nger 2)was increased,layer IV maker gene Rorβ(RAR related orphan receptorβ)and layer VI makergene Foxp2(forkhead box P2)were decreas

【相似文獻(xiàn)】

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