本文關鍵詞：細粒棘球蚴轉化生長因子βⅡ型受體胞外域基因的克隆、表達及抗血清制備

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【摘要】：目的構建細粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)轉化生長因子βⅡ型受體胞外域(Extracellular Domain of Transforming Growth Factor beta type Ⅱ receptor of Eg,EgTβRⅡ-E)原核表達載體,誘導表達融合蛋白并制備其特異性抗體。方法采集羊源Eg原頭蚴,Trizol法提取總RNA,RT-PCR擴增EgTβRⅡ-E基因,構建pET28a-EgTβRⅡ-E原核表達載體,PCR、限制性內切酶雙酶切和測序鑒定正確的陽性質粒轉入BL21E.coli感受態(tài)細胞,IPTG誘導EgTβRⅡ-E融合蛋白表達并免疫小鼠,制備抗血清。結果成功構建pET28a-EgTβRⅡ-E原核表達載體,經0.6mmol/L IPTG誘導表達18ku的EgTβRⅡ-E融合蛋白。用融合蛋白免疫小鼠,獲得高效價(1∶256 000抗血清)。結論制備的EgTβRⅡ-E融合蛋白具有抗原性,免疫小鼠獲得高效價的抗血清,為研究EgTβRⅡ的生物學功能奠定了基礎。
【作者單位】： 新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院/臨床醫(yī)學研究院新疆包蟲病基礎醫(yī)學重點實驗室;新疆醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院生理學教研室;新疆醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院生物化學教研室;
【關鍵詞】： 細粒棘球蚴 轉化生長因子βⅡ型受體 基因克隆 抗血清
【基金】：新疆維吾爾自治區(qū)自然科學基金項目(No.2015211C029)
【分類號】：R383.33
【正文快照】： *?**?囊型包蟲病(cystis echinococcosis,CE)是由細粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)感染所致的人畜共患寄生蟲病,我國西部七省區(qū)(新疆、青海、寧夏、甘肅、西藏、四川、內蒙古)為高流行區(qū),受威脅人口達6 600萬,每年造成經濟損失逾30億元[1-2]。人畜經口誤食Eg蟲卵,在胃

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