發(fā)布時(shí)間：2017-09-19 03:47

  本文關(guān)鍵詞：白念珠菌HSP90與人源HSP90的克隆表達(dá)及其C端的比較分析

  更多相關(guān)文章： 白念珠菌 HSP 蛋白結(jié)構(gòu) 蛋白表達(dá)與純化

【摘要】：目的分別體外表達(dá)純化白念珠菌HSP90(CaHSP90)和人源HSP90(hHSP90)并分析C-端序列差異對其體外狀態(tài)下分子聚合度的影響。方法我們將CaHSP90、hHSP90野生型及其C-端酶切堿基序列通過PCR進(jìn)行擴(kuò)增并通過NdeI/XhoI酶切位點(diǎn)連接到到pET22b+質(zhì)粒中。將構(gòu)建好的上述質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌E.coli BL21(DE3)中進(jìn)行表達(dá)并通過Ni 2+-NTA柱以及Superdex-200快速柱層析系統(tǒng)(FPLC)純化。所得蛋白通過SDS-PAGE以及分子排阻色譜(SEC)測定分子量和聚合狀態(tài)。結(jié)果通過測序鑒定所有質(zhì)粒構(gòu)建成功,并最終純化得到足夠純度的蛋白進(jìn)行SEC分析實(shí)驗(yàn)。分析結(jié)果表明野生型CaHSP90和hHSP90在體外具有相似的聚合度,而C-端突變后則存在明顯差異。結(jié)論 CaHSP90和hHSP90的C-端結(jié)構(gòu)域?qū)ζ潴w外聚合狀態(tài)有著不同的影響,CaHSP90的C-端結(jié)構(gòu)域有可能成為CaHSP90抑制劑一個(gè)潛在靶點(diǎn)。
【作者單位】： 上海長海醫(yī)院;中國科學(xué)院大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 白念珠菌 HSP 蛋白結(jié)構(gòu) 蛋白表達(dá)與純化
【基金】：973子課題(2013CB531602)
【分類號】：R379.4
【正文快照】： [Chin J Mycol,2016,11(6):321-326]白念珠菌是一種條件致病菌,近年來隨著抗菌藥物的濫用,白念珠菌的致病率逐年上升。由于白念珠菌對藥物的耐受性越來越強(qiáng),我們對于白念珠菌的抗藥性研究也不斷深入。研究發(fā)現(xiàn)白念珠菌的HSP90在白念珠菌的致病以及耐藥機(jī)制中有重要作用[1]。HS

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉為國;黃敏;;白念珠菌粘附上皮細(xì)胞的機(jī)制[J];國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊);2002年02期

2 龐傳超,黃冰玉,崔紹山,李守柔;兼并復(fù)合聚合酶鏈反應(yīng)檢測白念珠菌和其它念珠菌[J];深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志;2002年05期

3 馮文莉;王艷青;奚志琴;楊靜;張潤梅;冀英;吳媛;賈曉強(qiáng);;非白念珠菌和白念珠菌感染危險(xiǎn)因素的對比研究[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2011年17期

4 譚宏月;陳麗華;皇幼明;鐘彬;顧軍;溫海;;白念珠菌基因敲除技術(shù)的研究進(jìn)展[J];中國真菌學(xué)雜志;2012年06期

5 侯幼紅,王正文,王立新;白念珠菌致病方式的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚病學(xué)分冊;1990年05期

6 張育華;;白念珠菌與臨床[J];瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1993年01期

7 趙敬軍;;白念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶的研究近況[J];國外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊);2000年02期

8 牛云彤,李少平;白念珠菌毒力因子研究進(jìn)展[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2000年01期

9 王魯,刁慶春,蔣戈,劉榮卿,鐘白玉;白念珠菌保護(hù)性單抗的研究[J];中華皮膚科雜志;2001年05期

10 王英;白念珠菌粘附機(jī)制研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊;2001年02期

中國重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王冬云;譚升順;馬慧群;馬韻琴;陳慶秀;;白念珠菌的毒力研究——分泌性酸性蛋白酶活力的測定[A];2001年中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

2 滿旭;王惠平;;白念珠菌轉(zhuǎn)錄因子編碼基因表達(dá)與氟康唑耐藥的關(guān)系[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十八次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2012年

3 黃廣華;;白念珠菌有性生殖、形態(tài)發(fā)生及毒性的進(jìn)化[A];中國菌物學(xué)會(huì)第五屆會(huì)員代表大會(huì)暨2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2011年

4 王慧;徐寧;喻其林;程欣欣;邢來君;李明春;;鈣細(xì)胞存活途徑與白念珠菌的致病性[A];中國菌物學(xué)會(huì)第五屆會(huì)員代表大會(huì)暨2011年學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2011年

5 閻瀾;李妙海;曹永兵;高平揮;王彥;姜遠(yuǎn)英;;白念珠菌耐藥新蛋白——交替氧化酶[A];藥學(xué)發(fā)展前沿論壇及藥理學(xué)博士論壇論文集[C];2008年

6 郭仁勇;;白念珠菌聚苯乙烯黏附增強(qiáng)基因1的研究進(jìn)展[A];2008年浙江省檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

7 ;線粒體功能在不同環(huán)境對白念珠菌生存及代謝的影響[A];2012年中國菌物學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)會(huì)議摘要[C];2012年

8 曾躍斌;;白念珠菌全基因組表達(dá)譜芯片在抗真菌藥物研究中的應(yīng)用[A];中國藥理學(xué)會(huì)第十一屆全國化療藥理學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

9 周萬青;沈瀚;張之烽;張葵;;白念珠菌臨床分離調(diào)查及基因分型研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

10 景偉芳;王惠平;;白念珠菌對唑類藥物耐藥機(jī)制的研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

中國重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 國虹 雨凈;微生物的是是非非[N];中國教育報(bào);2001年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 潘搏;白念珠菌甘露多糖疫苗評價(jià)及白念珠菌侵入人內(nèi)皮和上皮細(xì)胞動(dòng)態(tài)觀察[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 賈淑琳;香蓮方對耐藥白念珠菌外排泵基因表達(dá)影響的研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2016年

3 高盈;口腔和陰道黏膜上皮細(xì)胞與白念珠菌相互作用的免疫學(xué)機(jī)制比較研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

4 徐大勇;白念珠菌質(zhì)膜蛋白CaRch1對細(xì)胞質(zhì)內(nèi)鈣離子穩(wěn)態(tài)和耐藥調(diào)控功能的機(jī)理研究[D];江南大學(xué);2016年

5 胡志德;miR-146a在白念珠菌引發(fā)的固有免疫應(yīng)答中的調(diào)節(jié)作用[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2016年

6 劉澤虎;白念珠菌形態(tài)、胞壁多糖的結(jié)構(gòu)及其免疫學(xué)活性的相關(guān)研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

7 唐寧楓;白念珠菌烯醇化酶的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2000年

8 王平;陰道念珠菌菌種及香蓮方逆轉(zhuǎn)白念珠菌耐藥基因組學(xué)研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2013年

9 許懿;小檗堿與氟康唑協(xié)同抗耐藥白念珠菌的作用機(jī)制研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

10 李彩霞;陰道細(xì)菌群落多樣性及外陰陰道念珠菌病相關(guān)白念珠菌基因多態(tài)性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 毛艷紅;HSP90抑制劑對白念珠菌刺激巨噬細(xì)胞分泌IL-23的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 段志敏;白念珠菌誘導(dǎo)人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞（THP-1細(xì)胞）固有免疫應(yīng)答機(jī)制的初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

3 徐輝;5-氨基酮戊酸光動(dòng)力療法對白念珠菌抗菌效應(yīng)研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2015年

4 嚴(yán)園園;黃連解毒湯乙酸乙酯提取物對白念珠菌毒力因子的作用研究[D];安徽中醫(yī)藥大學(xué);2015年

5 潘彥衛(wèi);白念珠菌Sap與伊曲康唑耐藥性關(guān)系的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

6 呂亞萍;白念珠菌ERG4基因突變/高表達(dá)與唑類藥物耐藥的關(guān)系[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

7 李晴;VVC患者臨床分離白念珠菌鋅簇轉(zhuǎn)錄因子Cap1、Mrr1對外排泵基因MDR1的作用[D];山西醫(yī)科大學(xué);2015年

8 牛理達(dá);線粒體呼吸鏈相關(guān)基因在不同碳源條件下對白念珠菌菌絲形成的影響[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

9 曹雪姣;法尼醇對白念珠菌cAMP-PKA信號通路作用的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

10 楊宇;基于代謝組學(xué)的白念珠菌對唑類藥物交叉耐藥機(jī)制的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2015年

，

本文編號：879326