本文關(guān)鍵詞：標(biāo)本配穴電針干預(yù)對(duì)慢性心肌缺血模型大鼠心肌線粒體結(jié)構(gòu)功能影響研究

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【摘要】：目的心肌缺血是引發(fā)心血管疾病的主要原因。針灸療法具有無毒副作用、操作方便及價(jià)格低廉等優(yōu)勢(shì),對(duì)心臟生理活動(dòng)有良好的調(diào)整作用,可以有效地預(yù)防、治療心肌缺血。本實(shí)驗(yàn)采用“標(biāo)本配穴”電針方法對(duì)大鼠進(jìn)行干預(yù),以心肌能量改變?yōu)榍腥朦c(diǎn),觀察心肌細(xì)胞三步有氧呼吸的相關(guān)酶GADPH、CS、CCO活性,線粒體的結(jié)構(gòu)與功能,心肌微觀組織結(jié)構(gòu),大鼠心電圖S-T段及形態(tài)與行為學(xué)變化,從局部至整體分析“標(biāo)本配穴”腧穴配伍方法對(duì)大鼠心肌缺血的保護(hù)效應(yīng),探討“標(biāo)本配穴”電針干預(yù)對(duì)慢性心肌缺血的預(yù)防及治療效果。方法本實(shí)驗(yàn)選用3月齡Wistar雄性大鼠45只,體重180~220g,編號(hào)后按隨機(jī)數(shù)字表分入空白組、模型組、標(biāo)本配穴電針干預(yù)組,每組15只。三組大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3日后,于第4日起正常組大鼠連續(xù)7天在頸背部皮膚豐厚處按照5mg/kg行皮下注射0.9%無菌生理鹽水;模型組大鼠連續(xù)7天在頸背部皮膚豐厚處按照5mg/kg行皮下注射鹽酸異丙腎上腺素建造慢性心肌缺血模型;干預(yù)組大鼠連續(xù)7天給予足三里、關(guān)元、內(nèi)關(guān)電針干預(yù),同側(cè)足三里與內(nèi)關(guān)組成一對(duì)接通電極,關(guān)元旁5mm處另直刺一針,與關(guān)元組成一組接通電極,采用韓式-200型號(hào)電針治療儀,選用疏密波,2~100Hz,1m A,每天干預(yù)10分鐘。電針干預(yù)后在頸背部皮膚豐厚處按照5mg/kg行皮下注射鹽酸異丙腎上腺素建造慢性心肌缺血模型,造模后繼續(xù)給予電針干預(yù)14天。分別于第3天、第10天、第17天、第24天記錄三組大鼠心電圖S-T段振幅與一般情況,于第25天取材,觀察心肌組織結(jié)構(gòu)及線粒體超微結(jié)構(gòu),檢測(cè)線粒體呼吸控制率、心肌組織3-磷酸甘油醛脫氫酶、檸檬酸合成酶、細(xì)胞色素C氧化酶活性及組織內(nèi)ATP含量。結(jié)果1.大鼠一般情況觀察比較:在實(shí)驗(yàn)過程中,模型組大鼠眼角附著分泌物,口唇紫紺或淡,鼠尾色淡,鼠毛稀黃,精神萎靡,反應(yīng)能力減弱、飲食量減少;干預(yù)組大鼠僅表現(xiàn)為眼迷、易驚,其余如常。2.心電圖S-T段振幅比較:模型組與干預(yù)組大鼠在造模后心電圖S-T段明顯升高,與正常組相比較存在顯著性差異(P0.01);電針干預(yù)后,干預(yù)組大鼠S-T段趨于正常,與模型組相比較存在顯著性差異(P0.01)。3.大鼠心肌組織病理結(jié)構(gòu)的比較:光學(xué)顯微鏡下模型組大鼠心肌纖維排列紊亂,部分纖維結(jié)構(gòu)破壞,細(xì)胞核固縮,心肌間質(zhì)水腫、出血,炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)間隙增大。干預(yù)組大鼠組織結(jié)構(gòu)大致正常,少量心肌纖水腫、結(jié)構(gòu)模糊,心肌間質(zhì)存在少量紅細(xì)胞,輕度水腫。透射電鏡下模型組大鼠心肌細(xì)胞肌原纖維斷裂、結(jié)構(gòu)模糊,排列紊亂,閏盤融合、形變,心肌細(xì)胞腫脹、空化、破壞,細(xì)胞核破壞,線粒體排列紊亂,部分線粒體固縮、腫脹、空泡樣病變,線粒體嵴斷裂成絮狀或缺失。干預(yù)組大鼠部分肌絲溶解、斷裂,心肌細(xì)胞輕微腫脹,輕度空化,線粒體排列稍紊亂,部分線粒體水腫、存在空泡樣病變。4.大鼠心肌組織ATP含量的比較:模型組的大鼠心肌組織ATP含量明顯低于空白組,存在顯著性差異(P0.01);干預(yù)組的大鼠心肌組織ATP含量明顯高于模型組,存在顯著性差異(P0.01),但干預(yù)組心肌組織ATP含量低于空白組,差異顯著(P0.01)。5.大鼠心肌線粒體RCR的比較:模型組的大鼠線粒體RCR明顯降低處于異常水平,與空白組線粒體RCR存在顯著性差異(P0.01);干預(yù)組的大鼠線粒體RCR處于正常水平,明顯高于模型組,存在顯著性差異(P0.01),但干預(yù)組線粒體RCR低于空白組,差異顯著(P0.01)。6.大鼠心肌組織GAPDH活性比較:模型組的大鼠心肌組織GAPDH活性明顯低于空白組,存在顯著性差異(P0.01);干預(yù)組的大鼠心肌組織GAPDH活性明顯高于模型組,存在顯著性差異(P0.01),但干預(yù)組心肌組織GAPDH活性低于空白組,差異顯著(P0.01)。7.大鼠心肌組織CS活性比較:模型組的大鼠心肌組織CS活性明顯低于空白組,存在顯著性差異(P0.01);干預(yù)組的大鼠心肌組織CS活性明顯高于模型組,存在顯著性差異(P0.01),但干預(yù)組心肌組織CS活性低于空白組,差異顯著(P0.01)。8.大鼠心肌線粒體CCO活性比較:模型組的大鼠心肌線粒體CCO活性明顯低于空白組,存在顯著性差異(P0.01);干預(yù)組的大鼠心肌線粒體CCO活性明顯高于模型組,存在顯著性差異(P0.01),但干預(yù)組心肌線粒體CCO活性低于空白組,差異顯著(P0.01)。9.心肌線粒體RCR、心肌組織GAPDH、CS、CCO活性與心肌組織ATP含量相關(guān)分析:大鼠心肌組織ATP與心肌線粒體RCR、心肌組織GAPDH、CS、CCO活性之間存在線性相關(guān),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,R2分別為0.886、0.942、0.908及0.949。結(jié)論1.使用連續(xù)注射ISO的方法可以成功誘建大鼠慢性心肌缺血模型,且操作簡(jiǎn)便、可控、成功率高。2.“標(biāo)本配穴”電針干預(yù)能夠改善實(shí)驗(yàn)大鼠心臟的心電活動(dòng)及心肌組織形態(tài)學(xué)表達(dá),防止心肌組織結(jié)構(gòu)的破壞,修護(hù)心肌缺血性損傷,更對(duì)線粒體的結(jié)構(gòu)與功能起到了良性的調(diào)節(jié)作用。3.“標(biāo)本配穴”電針干預(yù)增加試驗(yàn)大鼠心肌細(xì)胞有氧呼吸相關(guān)酶的活性,提高心肌產(chǎn)能、提升心肌組織中ATP含量,增加對(duì)心肌組織的能量供應(yīng),從而對(duì)心肌組織起到了良性的調(diào)節(jié)作用。
【關(guān)鍵詞】：電針 標(biāo)本配穴 慢性心肌缺血 線粒體 有氧呼吸
【學(xué)位授予單位】：湖北中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R245;R-332
【目錄】：

• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 縮略詞表12-13
• 前言13-16
• 實(shí)驗(yàn)一 標(biāo)本配穴電針干預(yù)對(duì)慢性心肌缺血大鼠形態(tài)、行為學(xué)及心電圖S-T段振幅的影響16-32
• 1 實(shí)驗(yàn)材料16-17
• 2 實(shí)驗(yàn)方法17-20
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果20-29
• 4 討論29-32
• 實(shí)驗(yàn)二 標(biāo)本配穴電針干預(yù)對(duì)慢性心肌缺血模型大鼠心肌細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響32-39
• 1 實(shí)驗(yàn)材料32-33
• 2 實(shí)驗(yàn)方法33-35
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-36
• 4 討論36-39
• 實(shí)驗(yàn)三 標(biāo)本配穴電針干預(yù)對(duì)慢性心肌缺血模型大鼠心肌線粒體呼吸功能的影響研究39-55
• 1.實(shí)驗(yàn)材料40
• 2 實(shí)驗(yàn)方法40-44
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果44-53
• 4 討論53-55
• 實(shí)驗(yàn)四 標(biāo)本配穴電針干預(yù)對(duì)慢性心肌缺血模型大鼠GAPDH、CS、CCO活性的影響研究55-81
• 1 實(shí)驗(yàn)材料56-57
• 2 實(shí)驗(yàn)方法57-59
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果59-78
• 4 討論78-81
• 討論81-92
• 結(jié)語92-93
• 參考文獻(xiàn)93-99
• 附錄一 文獻(xiàn)綜述99-120
• 參考文獻(xiàn)106-120
• 附錄二 附圖120-124
• 附錄三 研究生期間已發(fā)表論文及參與課題124-125
• 致謝125-126

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