本文關(guān)鍵詞：人源類溶菌酶蛋白6在男性生殖系統(tǒng)中的表達

  更多相關(guān)文章： 人源類溶菌酶蛋白 畢赤酵母 真核表達 殺菌活性 多克隆抗體 睪丸 精子

【摘要】：目的:檢測人源類溶菌酶蛋白6(LYZL6)在男性生殖系統(tǒng)中的表達情況,以揭示其可能的生理功能。方法:將整合LYZL6編碼基因的畢赤酵母菌株進行高密度培養(yǎng),甲醇誘導(dǎo)表達后甲殼素親和色譜純化。采用雙層瓊脂平板擴散法觀察重組LYZL6的殺菌活性。以純化的重組蛋白為免疫原制備兔抗LYZL6多克隆抗體,ELISA檢測抗體效價。通過Western印跡檢測LYZL6蛋白在人各組織及精液中的分布,并采用免疫組化法確認LYZL6在人睪丸中的表達情況。結(jié)果:在低p H條件下重組LYZL6對溶壁微球菌殺菌活性較高。以重組LYZL6為免疫原制備的抗體具有高效價,Western印跡檢測表明LYZL6僅在睪丸和附睪中表達,且睪丸表達水平較高。在人精子蛋白提取物中檢測到了LYZL6,精漿中并未檢測到明顯蛋白條帶。免疫組化檢測顯示在睪丸組織中,LYZL6定位于晚期精母細胞及圓形精子細胞。結(jié)論:在低p H條件下,重組LYZL6具有較強的溶解細菌細胞壁的能力;LYZL6被睪丸上皮分泌后結(jié)合于精子上,提示LYZL6有可能在精卵融合過程的某個環(huán)節(jié)發(fā)揮作用。
【作者單位】： 上海健康醫(yī)學院基礎(chǔ)醫(yī)學院;上海紐約大學文理學部;上海健康醫(yī)學院藥學院;復(fù)旦大學遺傳工程國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 人源類溶菌酶蛋白 畢赤酵母 真核表達 殺菌活性 多克隆抗體 睪丸 精子
【基金】：上海市自然科學基金(15ZR1421800)~~
【分類號】：R339.21
【正文快照】： ，

本文編號：829278