本文關(guān)鍵詞：人源類溶菌酶蛋白6在男性生殖系統(tǒng)中的表達(dá)

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【摘要】：目的:檢測人源類溶菌酶蛋白6(LYZL6)在男性生殖系統(tǒng)中的表達(dá)情況,以揭示其可能的生理功能。方法:將整合LYZL6編碼基因的畢赤酵母菌株進(jìn)行高密度培養(yǎng),甲醇誘導(dǎo)表達(dá)后甲殼素親和色譜純化。采用雙層瓊脂平板擴(kuò)散法觀察重組LYZL6的殺菌活性。以純化的重組蛋白為免疫原制備兔抗LYZL6多克隆抗體,ELISA檢測抗體效價(jià)。通過Western印跡檢測LYZL6蛋白在人各組織及精液中的分布,并采用免疫組化法確認(rèn)LYZL6在人睪丸中的表達(dá)情況。結(jié)果:在低p H條件下重組LYZL6對溶壁微球菌殺菌活性較高。以重組LYZL6為免疫原制備的抗體具有高效價(jià),Western印跡檢測表明LYZL6僅在睪丸和附睪中表達(dá),且睪丸表達(dá)水平較高。在人精子蛋白提取物中檢測到了LYZL6,精漿中并未檢測到明顯蛋白條帶。免疫組化檢測顯示在睪丸組織中,LYZL6定位于晚期精母細(xì)胞及圓形精子細(xì)胞。結(jié)論:在低p H條件下,重組LYZL6具有較強(qiáng)的溶解細(xì)菌細(xì)胞壁的能力;LYZL6被睪丸上皮分泌后結(jié)合于精子上,提示LYZL6有可能在精卵融合過程的某個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)揮作用。
【作者單位】： 上海健康醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;上海紐約大學(xué)文理學(xué)部;上海健康醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院;復(fù)旦大學(xué)遺傳工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 人源類溶菌酶蛋白 畢赤酵母 真核表達(dá) 殺菌活性 多克隆抗體 睪丸 精子
【基金】：上海市自然科學(xué)基金(15ZR1421800)~~
【分類號】：R339.21
【正文快照】： ，

本文編號：829278