蛋白A親和層析法純化單克隆抗體工藝的優(yōu)化
本文關(guān)鍵詞:蛋白A親和層析法純化單克隆抗體工藝的優(yōu)化
更多相關(guān)文章: 蛋白A 單克隆抗體 純化 細胞回收液 酸性沉淀 宿主雜質(zhì)蛋白 組蛋白 DNA
【摘要】:治療性單克隆抗體藥物已成為生物醫(yī)藥領(lǐng)域市場最主要的產(chǎn)品類別。蛋白A親和層析作為第一步捕獲抗體蛋白最為有效的手段仍然在現(xiàn)有單克隆抗體純化平臺中占據(jù)主導(dǎo)地位。在本研究中,首先開發(fā)了一種基于低p H處理抗體細胞回收液的新型細胞液回收技術(shù),該技術(shù)能有效去除宿主相關(guān)污染物(非組蛋白宿主雜質(zhì)蛋白、組蛋白、DNA、蛋白聚合物等),同時保證較高的抗體回收率。通過該技術(shù)有效預(yù)處理后,蛋白A純化效率可提高10倍左右,并且有效避免了抗體洗脫液中和后濁度的上升,大大減輕了后續(xù)蛋白純化的壓力。同時我們也對酸性處理中各種宿主雜質(zhì)去除機制進行了研究。然后,預(yù)處理的洗脫液再經(jīng)一步Capto adhere色譜純化,非組蛋白宿主雜質(zhì)蛋白降低至5 ppm、DNA小于1 ppb、組蛋白降低至檢測限以下、蛋白聚合物小于0.01%?傔^程抗體蛋白收率87%。該兩步法抗體純化技術(shù)可有效集成至當前主流抗體純化平臺,具有良好的大規(guī)模應(yīng)用價值。
【作者單位】: 中國科學(xué)院青島生物能源與過程研究所中國科學(xué)院生物基材料重點實驗室;新加坡科技研究局生物處理科技研究院;
【關(guān)鍵詞】: 蛋白A 單克隆抗體 純化 細胞回收液 酸性沉淀 宿主雜質(zhì)蛋白 組蛋白 DNA
【基金】:中科院青能所所長創(chuàng)新基金(No.Y571061905) 新加坡生物醫(yī)藥研究計劃(No.ETPL/12-R15GAP-0009)資助~~
【分類號】:R392
【正文快照】: 1986年,世界首個單克隆抗體(Monoclonallantibody,簡稱單抗)獲得美國食品與藥品監(jiān)督管理局的上市批準,拉開了單抗藥物發(fā)展的序幕,成為生物醫(yī)藥領(lǐng)域中最耀眼的明珠。該類藥物具有靶向性強、特異性高和毒副作用低等特點,代表了藥品治療領(lǐng)域最新發(fā)展方向[1-4]。目前全球醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)
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1 段薇,張健,鄭劍玲,蘇丹,王美慧;抗呼吸道合胞病毒單克隆抗體的研制[J];微生物學(xué)雜志;2004年05期
2 張唯敏;;新單克隆抗體已應(yīng)用于臨床[J];國外醫(yī)學(xué)(腫瘤學(xué)分冊);1986年04期
3 遲素敏;;單克隆抗體的制備和鑒定[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;1986年Z1期
4 張明杰;單克隆抗體在農(nóng)業(yè)中有何用途?[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;1991年02期
5 孫國鳳;;單克隆抗體藥品在日本通過調(diào)查會[J];生物技術(shù)通報;1991年09期
6 ;一種制備單克隆抗體的更有效而經(jīng)濟的方法[J];國外醫(yī)學(xué)(臨床生物化學(xué)與檢驗學(xué)分冊);1998年05期
7 任新玲,沈麗英,金伯泉,井曉梅,王睿;表皮生長因子受體單克隆抗體抗肺癌作用的研究[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2000年03期
8 章波,陳惠鵬,范國才,陳吉中,王清明;抗人肝再生增強因子單克隆抗體的研制[J];免疫學(xué)雜志;2000年06期
9 李鳳英,陳名道,顧衛(wèi)瓊,陳春榮,唐金鳳;人瘦素單克隆抗體的鑒定[J];放射免疫學(xué)雜志;2000年02期
10 陳志南,蔣建利;單克隆抗體——從鼠到人[J];國外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊);2000年03期
中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 徐爽;安萬新;胡榮花;葉萍;孟祥昱;;不同方法收集單克隆抗體濃縮后的比較[A];中國輸血1999年年會暨紀念A(yù)BO血型發(fā)現(xiàn)100周年學(xué)術(shù)交流論文專輯[C];1999年
2 劉大維;高斌;;狂犬病毒單克隆抗體的研制[A];2010年中國科學(xué)院微生物研究所博士后學(xué)術(shù)年會暨第二屆博誼論壇論文摘要集[C];2011年
3 陳炅;;治療性單克隆抗體的作用靶點及臨床應(yīng)用[A];2013年中國臨床藥學(xué)學(xué)術(shù)年會暨第九屆臨床藥師論壇論文集[C];2013年
4 徐爽;徐焱;;單克隆抗體在輸血領(lǐng)域的應(yīng)用探討[A];中國輸血1999年年會暨紀念A(yù)BO血型發(fā)現(xiàn)100周年學(xué)術(shù)交流論文專輯[C];1999年
5 彭虹;舒翠麗;劉永全;王華;高杰英;;抗人α4單克隆抗體的制備和鑒定[A];中國免疫學(xué)會第四屆學(xué)術(shù)大會會議議程及論文摘要集[C];2002年
6 祭芳;史建榮;陳正賢;徐劍宏;陸瓊嫻;;抗脫氧雪腐鐮刀菌烯醇單克隆抗體的制備[A];中國植物病理學(xué)會2008年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2008年
7 張光波;董秋明;於葛華;李文香;張學(xué)光;;一株鼠抗人4-1BB單克隆抗體的研制及其生物學(xué)功能的鑒定[A];第六屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會論文集[C];2008年
8 張錦超;楊金菊;吳瓊;李戩;陳勇;李輝;宋穎博;羅曉彤;任飛;高媛;杜雪梅;鞠艷芳;王兆卿;王京蘭;徐菡;柳曉蘭;崔玉芳;錢小紅;賀福初;高建恩;孫啟鴻;;高效鑒定單克隆抗體所識別未知抗原技術(shù)平臺的建立及應(yīng)用[A];中國蛋白質(zhì)組學(xué)第二屆學(xué)術(shù)大會論文摘要論文集[C];2004年
9 楊永昌;王北寧;賴春寧;黎燕;;抗血小板單克隆抗體重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其在大腸桿菌中的表達[A];第五次全國中青年檢驗醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年
10 孫效;高新;尚明美;宋海峰;湯仲明;;抗胰高血糖素樣肽單克隆抗體的制備[A];第八次全國藥物與化學(xué)異物代謝學(xué)術(shù)會議論文摘要[C];2006年
中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條
1 記者 尹暉;單克隆抗體研發(fā)進入新階段[N];無錫日報;2010年
2 編譯 李勇;單克隆抗體:生物類似藥開發(fā)的秘鑰[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2014年
3 廣凱;單克隆抗體藥物將有大發(fā)展[N];中國醫(yī)藥報;2000年
4 ;單克隆抗體應(yīng)用前景看好[N];中國醫(yī)藥報;2002年
5 黃東臨;羅氏叱咤單克隆抗體市場[N];醫(yī)藥經(jīng)濟報;2005年
6 ;單克隆抗體異軍突起[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導(dǎo)報;2003年
7 尹暉;全球最大單克隆抗體研制基地落戶無錫[N];中國醫(yī)藥報;2010年
8 尹暉;最大單克隆抗體研制項目在馬山奠基[N];無錫日報;2010年
9 數(shù)文;羅氏買進抗癌單克隆抗體[N];中國醫(yī)藥報;2008年
10 毛文波;單克隆抗體:征服癌癥的新方法[N];科技日報;2004年
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1 魏德強;以植物病毒為載體建立新型的載體—半抗原免疫體系[D];東北林業(yè)大學(xué);2014年
2 王璞;以CD146為靶點的胃癌早期診斷多功能納米探針的相關(guān)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2015年
3 張瀟;抗EV71病毒單克隆抗體及柯薩奇病毒病毒樣顆粒的制備研究[D];北京工業(yè)大學(xué);2015年
4 鄒年莉;雞傳染性支氣管炎病毒Sczy3 S1蛋白中和性單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年
5 白宇;馬γ-干擾素單克隆抗體的制備及細胞免疫評價方法的研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2008年
6 余自強;抗血小板膠原受體糖蛋白VI單克隆抗體的制備和功能研究[D];蘇州大學(xué);2005年
7 秦克鋒;單純皰疹病毒糖蛋白的特性研究及其單克隆抗體的臨床應(yīng)用[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1989年
8 游曉華;腦鈉肽單克隆抗體的制備及初步臨床應(yīng)用研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2006年
9 孟星宇;芘和萘單克隆抗體的制備及免疫檢測技術(shù)的研究[D];吉林大學(xué);2015年
10 胡敏;載脂蛋白M重組蛋白和單克隆抗體的制備及其初步臨床應(yīng)用[D];中南大學(xué);2008年
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1 王曉磊;流行性乙型腦炎病毒單克隆抗體的制備與prM-E蛋白抗原捕獲ELISA檢測方法的建立[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年
2 葛新杰;NT-proBNP單克隆抗體的研制及ELISA定量檢測方法的建立[D];鄭州大學(xué);2015年
3 張標;鼠抗人B7-H4受體單克隆抗體的研制及其生物學(xué)功能的初步研究[D];蘇州大學(xué);2015年
4 鄭瑩;CD123在兒童B系急性淋巴細胞性白血病中的表達與抗人CD123單克隆抗體的制備[D];蘇州大學(xué);2015年
5 董倩;JEV NS2B蛋白單克隆抗體的制備及其應(yīng)用[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年
6 薛翼鵬;豬CR1-like單克隆抗體的制備及CR1-like在豬紅細胞膜表面分布狀態(tài)的研究[D];山西農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年
7 繆歡;JEV PrM/M蛋白單克隆抗體的制備及JEV P3感染U251細胞蛋白質(zhì)組學(xué)分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年
8 仲曉麗;犬副流感病毒單克隆抗體的制備及單鏈抗體蛋白的表達和活性鑒定[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年
9 劉靜靜;綿羊早孕因子單克隆抗體的制備及鑒定[D];河北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年
10 安蓮;B型流感嗜血桿菌寡糖綴合物疫苗的免疫活性研究相關(guān)單克隆抗體的制備[D];山東大學(xué);2015年
,本文編號:821366
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