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蛋白A親和層析法純化單克隆抗體工藝的優(yōu)化

發(fā)布時(shí)間:2017-09-09 15:53

  本文關(guān)鍵詞:蛋白A親和層析法純化單克隆抗體工藝的優(yōu)化


  更多相關(guān)文章: 蛋白A 單克隆抗體 純化 細(xì)胞回收液 酸性沉淀 宿主雜質(zhì)蛋白 組蛋白 DNA


【摘要】:治療性單克隆抗體藥物已成為生物醫(yī)藥領(lǐng)域市場最主要的產(chǎn)品類別。蛋白A親和層析作為第一步捕獲抗體蛋白最為有效的手段仍然在現(xiàn)有單克隆抗體純化平臺(tái)中占據(jù)主導(dǎo)地位。在本研究中,首先開發(fā)了一種基于低p H處理抗體細(xì)胞回收液的新型細(xì)胞液回收技術(shù),該技術(shù)能有效去除宿主相關(guān)污染物(非組蛋白宿主雜質(zhì)蛋白、組蛋白、DNA、蛋白聚合物等),同時(shí)保證較高的抗體回收率。通過該技術(shù)有效預(yù)處理后,蛋白A純化效率可提高10倍左右,并且有效避免了抗體洗脫液中和后濁度的上升,大大減輕了后續(xù)蛋白純化的壓力。同時(shí)我們也對(duì)酸性處理中各種宿主雜質(zhì)去除機(jī)制進(jìn)行了研究。然后,預(yù)處理的洗脫液再經(jīng)一步Capto adhere色譜純化,非組蛋白宿主雜質(zhì)蛋白降低至5 ppm、DNA小于1 ppb、組蛋白降低至檢測限以下、蛋白聚合物小于0.01%?傔^程抗體蛋白收率87%。該兩步法抗體純化技術(shù)可有效集成至當(dāng)前主流抗體純化平臺(tái),具有良好的大規(guī)模應(yīng)用價(jià)值。
【作者單位】: 中國科學(xué)院青島生物能源與過程研究所中國科學(xué)院生物基材料重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;新加坡科技研究局生物處理科技研究院;
【關(guān)鍵詞】蛋白A 單克隆抗體 純化 細(xì)胞回收液 酸性沉淀 宿主雜質(zhì)蛋白 組蛋白 DNA
【基金】:中科院青能所所長創(chuàng)新基金(No.Y571061905) 新加坡生物醫(yī)藥研究計(jì)劃(No.ETPL/12-R15GAP-0009)資助~~
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: 1986年,世界首個(gè)單克隆抗體(Monoclonallantibody,簡稱單抗)獲得美國食品與藥品監(jiān)督管理局的上市批準(zhǔn),拉開了單抗藥物發(fā)展的序幕,成為生物醫(yī)藥領(lǐng)域中最耀眼的明珠。該類藥物具有靶向性強(qiáng)、特異性高和毒副作用低等特點(diǎn),代表了藥品治療領(lǐng)域最新發(fā)展方向[1-4]。目前全球醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):821366

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