本文關(guān)鍵詞：人NEDD8原核表達(dá)及兔高免血清制備

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【摘要】：本研究根據(jù)基因比對,將合成的nedd8基因(HN8)酶切克隆入p Cold-TF原核表達(dá)載體中,命名為p Cold-HN8,轉(zhuǎn)化到感受態(tài)宿主菌BL21(DE3)中,加入不同濃度異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)于16℃中誘導(dǎo)表達(dá)24 h,超聲波裂解,通過His-bind純化試劑盒純化,分別進(jìn)行SDS-PAGE檢測,結(jié)果 HN8蛋白獲得可溶性表達(dá),融合蛋白大小為64 k Da。用純化的蛋白免疫新西蘭兔,制備多克隆抗體,經(jīng)Western Blot和間接免疫熒光試驗(yàn)證實(shí),兔抗HN8蛋白的血清能夠特異性識別HN8蛋白。這為進(jìn)一步研究HN8蛋白在Neddylation通路中的修飾作用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院吳涇分院內(nèi)分泌科;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 人 NEDD 原核表達(dá) 多抗
【基金】：國家自然基金面上項(xiàng)目(No.31572502)
【分類號】：R392
【正文快照】： 泛素化(Ubiquitination)是一種重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾方式。其修飾分子為小分子蛋白——泛素(Ubiquitin)。除泛素化修飾外,類泛素修飾也在真核細(xì)胞中發(fā)揮重要作用[1]。這兩種修飾系統(tǒng)已被證實(shí)參與幾乎所有細(xì)胞內(nèi)的調(diào)控過程,如免疫識別、信號傳導(dǎo)、細(xì)胞增殖與分化、炎癥、抗原

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：818402