本文關(guān)鍵詞：人乳頭瘤病毒L2蛋白的病毒樣顆粒疫苗研究

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【摘要】：目的:構(gòu)建乙肝病毒核心抗原(HBcAg)與人乳頭瘤病毒(HPV)L2抗原的融合蛋白,在大腸桿菌中重組表達(dá)形成病毒樣顆粒結(jié)構(gòu);通過小鼠模型檢測HBc-L2融合蛋白的免疫原性,并研究免疫后獲得的小鼠血清對HPV假病毒的中和效力。方法:通過DNA合成構(gòu)建16型人乳頭瘤病毒L2基因片段與HBcAg基因的融合基因,將其克隆至表達(dá)載體p ET9a并在大腸桿菌中進(jìn)行HBc-L2融合蛋白表達(dá);將經(jīng)純化、鑒定后的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,用間接ELISA方法檢測小鼠血清中針對L2抗原的抗體效價,并分別研究小鼠血清對16型和18型HPV假病毒的中和效力。結(jié)果:HBc-L2融合基因經(jīng)大腸桿菌系統(tǒng)表達(dá)形成可溶性蛋白,經(jīng)硫酸銨沉淀和CL-4B凝膠分離純化后獲得純度80%的HBc-L2蛋白;分子篩高效液相色譜-多角度激光光散射(SEC-MALS)聯(lián)用技術(shù)和透射電子顯微鏡的分析結(jié)果表明,HBc-L2融合蛋白在表達(dá)過程中自動組裝形成穩(wěn)定的病毒樣顆粒;將純化后的HBc-L2蛋白免疫BALB/c小鼠可獲得針對L2抗原的高滴度抗體,且小鼠血清具有中和16和18型兩種假病毒的中和抗體活性。結(jié)論:HBc-L2病毒樣顆�？梢杂行У卦鰪�(qiáng)L2抗原的免疫原性,并可刺激機(jī)體產(chǎn)生針對多型HPV的免疫保護(hù)力,是一個具有潛力的新型廣譜HPV疫苗。
【作者單位】： 天津康希諾生物技術(shù)有限公司天津市呼吸道細(xì)菌重組及結(jié)合疫苗企業(yè)重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 人乳頭瘤病毒 L抗原 乙肝病毒核心抗原 病毒樣顆粒 免疫原性 中和抗體
【分類號】：R392
【正文快照】： 人乳頭瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)是 一種無包膜雙鏈DNA病毒,能引起子宮頸癌、生殖器疣等腫瘤疾病或癌癥[1]。宮頸癌在婦女中發(fā)生率位列第二,在發(fā)展中國家發(fā)生率明顯高于發(fā)達(dá)國家。統(tǒng)計表明,我國每年新增宮頸癌患者約15萬人左右,且年輕患者比例上升明顯[2]。近年來,運，

本文編號：785492