本文關(guān)鍵詞：IL-27對(duì)DSS小鼠結(jié)腸炎模型NLRP3炎性小體的影響

  更多相關(guān)文章： 炎癥性腸病 白介素-27 NLRP3炎性小體

【摘要】：研究背景炎癥性腸病(Inflammatory Bowel Disease,IBD),包括潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis,UC)和克羅恩病(Crohn’s disease,CD),是一組以反復(fù)發(fā)生與緩解為特點(diǎn)的慢性腸道炎癥。近年來(lái)IBD發(fā)病率有所升高,但其具體發(fā)病機(jī)制尚不清楚,目前認(rèn)為可能與遺傳、環(huán)境、免疫等多因素密切相關(guān)。固有免疫是免疫系統(tǒng)識(shí)別自我非我的第一道防線,免疫細(xì)胞通過模式識(shí)別受體(PRRs)識(shí)別危險(xiǎn)信號(hào),如病原微生物等。NLRP3是胞內(nèi)模式識(shí)別受體之一,在中性粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、上皮細(xì)胞等均有表達(dá),能夠和凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白(ASC)、Caspase-1組成高分子量的蛋白復(fù)合體,稱為NLRP3炎性小體。多種危險(xiǎn)信號(hào)如微生物及其代謝產(chǎn)物,及內(nèi)外源性刺激物如尿酸、ATP、二氧化硅等均可激活NLRP3炎性小體,引起Caspase-1自剪切成為活化形式,從而控制著下游IL-1β和IL-18的成熟和分泌,參與固有免疫應(yīng)答,他們強(qiáng)大的促炎作用直接影響宿主對(duì)感染和損傷的應(yīng)答。IL-27是是近年來(lái)研究較熱的一種細(xì)胞因子,是IL-12家族的新成員,其具有異二聚體結(jié)構(gòu),由EB病毒誘導(dǎo)基因3(EBi3)和IL-27 p28構(gòu)成。IL-27主要來(lái)源于活化的抗原呈遞細(xì)胞(Antibody presenting cells,APCs),由樹突狀細(xì)胞、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等在微生物或其他免疫刺激物刺激下產(chǎn)生。IL-27可以抑制Th2及Th17應(yīng)答,促進(jìn)Treg及誘導(dǎo)抗炎因子IL-10的產(chǎn)生,具有強(qiáng)大的免疫抑制作用。目的通過不同劑量的IL-27對(duì)IBD模型小鼠進(jìn)行干預(yù),觀察IBD動(dòng)物模型的結(jié)腸組織學(xué)變化,檢測(cè)小鼠腸組織NLRP3炎性小體相關(guān)指標(biāo)及小鼠血清IL-1β、IL-18的表達(dá)水平,探討IL-27對(duì)IBD模型中NLRP3炎性小體的影響。方法將48只雄性C57BL/6小鼠隨機(jī)分為4組,每組12只。(1)對(duì)照組:自由飲水進(jìn)食,無(wú)特殊干預(yù)。(2)DSS模型組:連續(xù)10天每天自由飲用以蒸餾水配制的3%DSS溶液,每?jī)商旄鼡Q新的DSS溶液,自由取食。(3)低劑量IL-27組:在自由飲用DSS的基礎(chǔ)上,將500ng IL-27溶于去離子水300μL,每日每只小鼠腹腔注射IL-27溶液300μL。(4)高劑量IL-27組:在自由飲用DSS的基礎(chǔ)上,將1μg的IL-27溶于去離子水300μL,每日每只小鼠腹腔注射300μL。第12天處死小鼠,取血清ELISA檢測(cè)IL-1β、IL-18濃度,取結(jié)腸組織HE染色、PCR及Western Blot檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件處理,計(jì)量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,所有數(shù)據(jù)用Levene檢驗(yàn)方法進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),各組數(shù)據(jù)采用單因素方差分析(ANOVA),對(duì)方差分析有意義者再采用LSD-t檢驗(yàn)法進(jìn)行兩兩比較,檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05,P0.05時(shí)被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用Pearson積矩相關(guān)系數(shù)來(lái)描述變量之間的關(guān)系。x結(jié)果1.疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評(píng)分與對(duì)照組相比,DSS模型組小鼠出現(xiàn)腹瀉、便血及體重下降,DAI評(píng)分升高,高劑量IL-27組癥狀較模型組輕。四組的DAI評(píng)分有差異(F=54.6,P0.05),模型組高于對(duì)照組(7.86±0.97 vs 1.48±0.30),高劑量IL-27組低于模型組(6.61±0.92 vs 7.86±0.97),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.組織學(xué)(HI)評(píng)分與對(duì)照組比較,模型組的結(jié)腸黏膜固有層有大量以淋巴細(xì)胞為主炎性細(xì)胞浸潤(rùn),血管增生,隱窩破壞。高劑量IL-27組鏡下表現(xiàn)較模型組輕,低劑量IL-27組較模型組改善不明顯。四組的HI評(píng)分有差異(F=89.1,P0.05),模型組高于對(duì)照組(6.52±0.67 vs 0.49±0.31),高劑量IL-27組低于模型組(4.68±0.64 vs 6.52±0.67),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),低劑量IL-27組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.免疫組化檢測(cè)NLRP3在結(jié)腸的表達(dá)四組結(jié)腸的NLRP3的表達(dá)有差異(χ2=11.1,P0.05),模型組高于對(duì)照組(75.0%vs 16.7%),高劑量IL-27組低于模型組(25.0%vs 75.0%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),低劑量IL-27組與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.qPCR檢測(cè)NLRP3和IL-1βmRNA在結(jié)腸的表達(dá)四組結(jié)腸的NLRP3 m RNA的表達(dá)有差異(F=72.93,P0.05),模型組高于對(duì)照組(6.17±0.56 vs 1.35±0.44),高劑量IL-27組低于模型組(3.91±0.83 vs 6.17±0.56),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),低劑量IL-27組與模型組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異。四組結(jié)腸的IL-1βm RNA的表達(dá)有差異(F=27.08,P0.05),模型組高于對(duì)照組(1.43±0.16 vs 0.41±0.15),高劑量IL-27組低于模型組(1.02±0.15 vs 1.43±0.16),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5.免疫印跡法檢測(cè)Caspase-1在結(jié)腸的表達(dá)四組結(jié)腸的Caspase-1 p10的表達(dá)有差異(F=5.4,P0.05),模型組高于對(duì)照組(0.72±0.14 vs 0.39±0.13),高劑量IL-27組低于模型組(0.48±0.16 vs 0.72±0.14),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),低劑量IL-27組與模型組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。6.ELISA檢測(cè)血清中IL-1β和IL-18的表達(dá)四組血清的IL-1β的表達(dá)有差異(F=50.42,P0.05),模型組高于對(duì)照組(118±2.7 vs 102±6.5),高劑量IL-27組低于模型組(86.0±4.36 vs 118±2.7),低劑量IL-27組同樣低于模型組(89.2±4.32 vs 118±2.7),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。四組血清的IL-18的表達(dá)有差異(F=7.01,P0.05),模型組高于對(duì)照組(86.5±7.79 vs70.2±7.04),高劑量IL-27組低于模型組(69.3±5.08 vs 86.5±7.79),低劑量IL-27組低于模型組(73.4±6.47 vs 86.5±7.79),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.IL-27可以改善DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型。2.IL-27可以下調(diào)結(jié)腸組織NLRP3、IL-1β前體的表達(dá)。3.IL-27可以抑制NLRP3炎性小體的激活。
【關(guān)鍵詞】：炎癥性腸病 白介素-27 NLRP3炎性小體
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R574.62;R-332
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-12
• 縮略詞表12-13
• 前言13-16
• 材料和方法16-25
• 結(jié)果25-31
• 討論31-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-38
• 綜述 NLRP3炎性小體與IBD關(guān)系研究進(jìn)展38-55
• 參考文獻(xiàn)51-55
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷及在校期間發(fā)表論文55-56
• 致謝56

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 黃麗潔,解立新,賈琳,趙曉巍,劉又寧,茍鵬;雜種犬急性呼吸窘迫綜合征模型的建立[J];中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志;2004年04期

2 張臣顥;張曼芳;謝青蓮;成志恒;鄒洪;金玫蕾;;慢性不可預(yù)知溫和應(yīng)激抑郁小鼠模型的建立[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2011年03期

3 譚瀟;肖建華;;1型糖尿病小鼠模型的構(gòu)建[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2011年14期

4 任文英,陳香美,邱全瑛,陳揚(yáng)榮,王新高,師鎖柱,王兆霞;慢性移植物抗宿主病狼瘡樣小鼠模型的誘導(dǎo)[J];中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志;2004年04期

5 王艷春,呂莉;彌散性血管內(nèi)凝血模型的改進(jìn)[J];第四軍醫(yī)大學(xué)吉林軍醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2005年02期

6 陳小囡;;蜂膠對(duì)慢性酒精性肝損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[J];健康研究;2009年02期

7 武君;孫長(zhǎng)崗;鄭華;;愈寧散對(duì)CITP模型小鼠外周血共刺激分子CD86影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志;2010年09期

8 王紫;陳瑜;羅軍;周建華;;槐杞黃干預(yù)小鼠IgA腎病模型的療效觀察以及機(jī)制探討[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志;2011年11期

9 孫旖;夏振娜;袁伯俊;張曉芳;陸國(guó)才;;LT-Y008的骨髓保護(hù)作用及機(jī)制[J];中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2013年03期

10 周厚廣,鮑遠(yuǎn)程,陸建明;提高帕金森病動(dòng)物模型制作成功率的方法學(xué)探討及模型綜合評(píng)價(jià)[J];國(guó)際神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)雜志;2005年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 閻明;張喜紅;劉莉;孟繁立;張莉;朱萍;;美能對(duì)酒精性肝纖維化大鼠的干預(yù)及治療研究[A];第五屆全國(guó)肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

2 王勇炫;吳偉康;吳以嶺;張選紅;;蜈蚣有效部位抗心肌缺血的NO機(jī)制研究[A];2009年全國(guó)中藥學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

3 周友龍;李建生;高劍峰;;老齡大鼠腦缺血再灌注微血管再生的變化意義[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)第五屆基礎(chǔ)理論研究專業(yè)委員會(huì)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

4 趙萬(wàn)軍;周輝;韓勇;何永江;;丹參對(duì)激素性股骨頭壞死血管內(nèi)凝血的影響[A];2007年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)骨科學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省抗癌協(xié)會(huì)骨軟腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

5 孫元瑩;史曉峰;;益肺康顆粒對(duì)油酸致兔急性肺損傷實(shí)驗(yàn)研究[A];2003年全國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2003年

6 孫元瑩;史曉峰;;益肺康顆粒對(duì)油酸致兔急性肺損傷實(shí)驗(yàn)研究[A];2004年全國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2004年

7 李玉中;;復(fù)方甘正對(duì)非酒精性脂肪性肝炎的治療作用[A];第五次全國(guó)中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

8 孫旖;夏振娜;袁伯俊;張曉芳;陸國(guó)才;;LT-Y008的骨髓保護(hù)作用及機(jī)制[A];2013年（第三屆）中國(guó)藥物毒理學(xué)年會(huì)暨藥物非臨床安全性評(píng)價(jià)研究論壇論文摘要[C];2013年

9 孫旖;夏振娜;袁伯俊;張曉芳;陸國(guó)才;;LT-Y008的骨髓保護(hù)作用及機(jī)制[A];中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

10 羅道樞;王瑋;;細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶在三叉神經(jīng)痛動(dòng)物模型中的活化[A];2007年中國(guó)解剖學(xué)會(huì)第十屆全國(guó)組織學(xué)與胚胎學(xué)青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文摘要匯編[C];2007年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 武漢市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院 單萍;黃角顆粒抗腦梗死作用機(jī)理[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 沈斌;肝豆靈對(duì)銅負(fù)荷大鼠肝組織的miRNA-122和代謝組學(xué)的影響[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 趙賓賓;地五養(yǎng)肝膠囊抑制2-AAF/PH大鼠肝癌前病變的作用及機(jī)制[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2015年

3 張海嬰;外敷清肺通絡(luò)膏干預(yù)RSV大鼠肺炎TLR4信號(hào)通路機(jī)制研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2015年

4 侯燕;冠狀動(dòng)脈粥樣硬化模型豬膽固醇代謝異常對(duì)Aβ的影響及復(fù)方干預(yù)研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2015年

5 王榮田;股骨頭壞死的證素組合規(guī)律與中藥干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2009年

6 李思耐;基于L型鈣電流研究益氣藥干預(yù)心衰電生理重構(gòu)機(jī)制[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

7 高允海;愈膽湯防治膽囊切除術(shù)后綜合征的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2016年

8 烏日?qǐng)D那順;蒙藥“伊赫湯”對(duì)酒精性脂肪肝作用機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2015年

9 胡文軍;復(fù)方腦康膠囊治療Alzheimer's病的藥效學(xué)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

10 王濤;普利醇抗帕金森病的藥效學(xué)及其機(jī)制研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 張子洋;醒腦液對(duì)APPswe/PS1ΔE9雙轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)Aβ及其降解酶NEP表達(dá)的影響[D];河北聯(lián)合大學(xué);2014年

2 韓金麗;急性胰腺炎大鼠神經(jīng)降壓素水平與腸黏膜損傷關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

3 潘彩彬;膝關(guān)節(jié)炎治療儀對(duì)膝骨性關(guān)節(jié)炎軟骨形態(tài)及關(guān)節(jié)液細(xì)胞因子影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2015年

4 浦飛飛;敬釗纓毛蜘蛛毒素-V對(duì)LTP和認(rèn)知行為改善作用的分子機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2015年

5 崔慶飛;酒精聯(lián)合高脂飲食誘導(dǎo)小鼠脂肪肝模型的建立及發(fā)病機(jī)制探討[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

6 劉翠華;谷氨酰胺對(duì)膿毒癥小鼠氧化應(yīng)激作用效果的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

7 岳萌;Bufalin通過ERK/RSK2通路對(duì)ECA109細(xì)胞和裸鼠移植瘤作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

8 左玲;Xyloketal B對(duì)NAFLD的療效觀察和機(jī)制研究[D];暨南大學(xué);2015年

9 郎艷松;通心絡(luò)聯(lián)合阿托伐他汀、阿司匹林對(duì)新西蘭兔動(dòng)脈粥樣硬化早期頸動(dòng)脈外膜滋養(yǎng)血管新生相關(guān)炎癥機(jī)制的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

10 劉娜;神經(jīng)激肽-1受體在GERD豚鼠咳嗽反射敏感性增高中的作用[D];東南大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：779268