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用小鼠模型分析可溶性表達結核分枝桿菌Ag85A的免疫原性

發(fā)布時間:2017-08-30 05:13

  本文關鍵詞:用小鼠模型分析可溶性表達結核分枝桿菌Ag85A的免疫原性


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【摘要】:【目的】可溶性表達結核分枝桿菌Ag85A蛋白,并評價其免疫原性!痉椒ā坷美湫菘吮磉_質(zhì)粒和含有伴侶質(zhì)粒的大腸桿菌對Ag85A蛋白進行可溶性原核表達,并進行純化與鑒定,通過C57BL/6小鼠模型對Ag85A蛋白的免疫原性,包括誘導機體特異性體液免疫應答和細胞免疫應答水平進行分析!窘Y果】重組菌誘導后裂解上清中檢測到可溶性Ag85A蛋白的表達,經(jīng)過親和層析純化收獲了純度在90%以上的Ag85A蛋白,Western blot鑒定顯示其具有較好的免疫反應性。Ag85A蛋白免疫小鼠后,血清中可以檢測到高水平的Ig G抗體效價,其中Ig G2b水平要高于Ig G1。通過特異性多肽、蛋白刺激脾臟和腹股溝淋巴結細胞可分泌高水平的IFN-γ、TNF-α等Th1型細胞因子!窘Y論】實現(xiàn)了Ag85A蛋白的可溶性表達,免疫特性評價顯示Ag85A蛋白可誘導機體產(chǎn)生強烈的特異性體液免疫應答及Th1型的細胞免疫應答,從而為其進一步免疫學功能的研究奠定了重要基礎。
【作者單位】: 揚州大學江蘇省人獸共患病學重點實驗室/江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關鍵詞】結核分枝桿菌 AgA 可溶性表達 免疫原性
【基金】:國家“973計劃”(2012CB518805) 江蘇省重點研發(fā)計劃(BE2015343) 揚州市自然科學基金(YZ2014027) 國家自然科學基金(31201882) 江蘇高校優(yōu)勢學科建設工程資助項目~~
【分類號】:R-332;R392
【正文快照】: Ag85復合物是結核分枝桿菌、牛分枝桿菌卡介苗主要的分泌型蛋白,在結核分枝桿菌H37Rv株中占分泌蛋白總量的30%左右,可從早期培養(yǎng)物中分離,是一種極不穩(wěn)定的蛋白,經(jīng)SDS-PAGE和等電聚焦分析可以將其分為3個組分Ag85A、Ag85B和Ag85C,大小分別為31 k Da、30k Da和31.5 k Da,結核分

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本文編號:757430

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