本文關(guān)鍵詞：用小鼠模型分析可溶性表達(dá)結(jié)核分枝桿菌Ag85A的免疫原性

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【摘要】：【目的】可溶性表達(dá)結(jié)核分枝桿菌Ag85A蛋白,并評價其免疫原性�！痉椒ā坷美湫菘吮磉_(dá)質(zhì)粒和含有伴侶質(zhì)粒的大腸桿菌對Ag85A蛋白進(jìn)行可溶性原核表達(dá),并進(jìn)行純化與鑒定,通過C57BL/6小鼠模型對Ag85A蛋白的免疫原性,包括誘導(dǎo)機(jī)體特異性體液免疫應(yīng)答和細(xì)胞免疫應(yīng)答水平進(jìn)行分析�！窘Y(jié)果】重組菌誘導(dǎo)后裂解上清中檢測到可溶性Ag85A蛋白的表達(dá),經(jīng)過親和層析純化收獲了純度在90%以上的Ag85A蛋白,Western blot鑒定顯示其具有較好的免疫反應(yīng)性。Ag85A蛋白免疫小鼠后,血清中可以檢測到高水平的Ig G抗體效價,其中Ig G2b水平要高于Ig G1。通過特異性多肽、蛋白刺激脾臟和腹股溝淋巴結(jié)細(xì)胞可分泌高水平的IFN-γ、TNF-α等Th1型細(xì)胞因子�！窘Y(jié)論】實現(xiàn)了Ag85A蛋白的可溶性表達(dá),免疫特性評價顯示Ag85A蛋白可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)烈的特異性體液免疫應(yīng)答及Th1型的細(xì)胞免疫應(yīng)答,從而為其進(jìn)一步免疫學(xué)功能的研究奠定了重要基礎(chǔ)。
【作者單位】： 揚(yáng)州大學(xué)江蘇省人獸共患病學(xué)重點(diǎn)實驗室/江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 結(jié)核分枝桿菌 AgA 可溶性表達(dá) 免疫原性
【基金】：國家“973計劃”(2012CB518805) 江蘇省重點(diǎn)研發(fā)計劃(BE2015343) 揚(yáng)州市自然科學(xué)基金(YZ2014027) 國家自然科學(xué)基金(31201882) 江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項目~~
【分類號】：R-332;R392
【正文快照】： Ag85復(fù)合物是結(jié)核分枝桿菌、牛分枝桿菌卡介苗主要的分泌型蛋白,在結(jié)核分枝桿菌H37Rv株中占分泌蛋白總量的30%左右,可從早期培養(yǎng)物中分離,是一種極不穩(wěn)定的蛋白,經(jīng)SDS-PAGE和等電聚焦分析可以將其分為3個組分Ag85A、Ag85B和Ag85C,大小分別為31 k Da、30k Da和31.5 k Da,結(jié)核分

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