絲素蛋白復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)修復(fù)動(dòng)物骨缺損模型的試驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2017-08-24 15:01
本文關(guān)鍵詞:絲素蛋白復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)修復(fù)動(dòng)物骨缺損模型的試驗(yàn)研究
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【摘要】:目的:在大鼠體內(nèi)骨缺損模型中,對(duì)自制不同比例絲素蛋白復(fù)合同種異體脫鈣骨基質(zhì)(demineralized bone matrix, DBM)骨修復(fù)情況進(jìn)行評(píng)價(jià)分析材料與方法:1.材料制備:①絲素蛋白制備:將家蠶絲脫去絲膠蛋白溶解為溶液凍干;②DBM的制備:將SD大鼠尺橈骨及股骨干的皮質(zhì)骨經(jīng)深低溫后制成顆粒狀;③復(fù)合材料的制備:將絲素蛋白與DBM以不同濃度比例共混得到實(shí)驗(yàn)材料(DBM含量:0%、10%、20%、40%、80%)。2.實(shí)驗(yàn)方法:①分組情況:隨機(jī)抽取72只8周齡雄性SD大鼠,分別編入不同濃度比例的絲素蛋白與脫鈣骨基質(zhì)復(fù)合材料中,A組(不含DBM)、B組(含10%DBM)、C組(含20%DBM)、D組(含40%DBM)、E組(含80%DBM),F組(空白對(duì)照),每組12只;②缺損模型制作:在大鼠橈骨中段應(yīng)用線鋸,制作5mm大段骨缺損模型;③材料植入:將各組材料制作成長(zhǎng)約5mm寬約1.5mm的長(zhǎng)方體植入到大鼠缺損模型中;④檢測(cè)方法:在手術(shù)后二、四、八周,行X線片檢測(cè);攝片后,將模型缺損區(qū)取出進(jìn)行大體觀察,HE染色、Masson染色、兩種免疫組化(Osteocalcin,Collagen I)并進(jìn)行粘連程度、影像學(xué)及免疫組化評(píng)分以評(píng)估骨缺損愈合情況,利用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)方法來(lái)分析各組間骨形成的差異性。結(jié)果:1.大體觀察后應(yīng)用Hiteheock粘連程度分級(jí)評(píng)分并做統(tǒng)計(jì)分析:在相同時(shí)間點(diǎn)各組間粘連評(píng)分比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),不同時(shí)間點(diǎn)各組組內(nèi)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.應(yīng)用Lane-sandhu X線評(píng)分并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析:各時(shí)間點(diǎn)D、E組評(píng)分較其余組評(píng)分高(P0.01),且兩組間無(wú)明顯差異(P0.05)。3.對(duì)兩種免疫組化(Osteocalci、Collagen I)進(jìn)行評(píng)分并統(tǒng)計(jì)分析,經(jīng)過(guò)本實(shí)驗(yàn)觀察,骨鈣素在四周時(shí)陽(yáng)性反應(yīng)明顯,且D、E組陽(yáng)性顆粒面積與A、B、C、F組有明顯差異(P0.01)。經(jīng)過(guò)本實(shí)驗(yàn)觀察,Ⅰ型膠原在四周及八周陽(yáng)性反應(yīng)較明顯,D、E組陽(yáng)性面積較其余組有明顯差異,且在四周時(shí),D組優(yōu)于E組(P0.01),而八周時(shí)兩者無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:1.絲素蛋白復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)修復(fù)材料有較好的成骨能力。2.在一定范圍內(nèi),絲素蛋白復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)修復(fù)材料隨脫鈣骨基質(zhì)比例的增加,成骨性能會(huì)逐漸增強(qiáng)。3.絲素蛋白與脫鈣骨基質(zhì)比例為6:4(40%DBM)時(shí)成骨性能較好,再增加脫鈣骨基質(zhì)的比例并不能提高其成骨性能。
【關(guān)鍵詞】:絲素蛋白 脫鈣骨基質(zhì) 骨缺損 復(fù)合材料
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R687;R318.08;R-332
【目錄】:
- 中文摘要6-8
- Abstract8-10
- 中英文縮略詞匯對(duì)照10-11
- 前言11-12
- 1. 材料與方法12-14
- 1.1 主要儀器12
- 1.2 主要試劑12-13
- 1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
- 1.4 材料制備13-14
- 1.4.1 絲素蛋白制備13
- 1.4.2 DBM制備13-14
- 1.4.3 絲素蛋白復(fù)合DBM骨修復(fù)材料的制備14
- 2 骨缺損模型的建立與分組14-15
- 2.1 實(shí)驗(yàn)分組14-15
- 2.2 手術(shù)操作15
- 3. 檢測(cè)指標(biāo)15-20
- 3.1 大體觀察15-16
- 3.2 X線檢測(cè)16
- 3.3 組織學(xué)檢測(cè)16-19
- 3.3.1 HE檢測(cè)17
- 3.3.2 改良Masson三色染色17-18
- 3.3.3 免疫組化檢測(cè)(免疫酶細(xì)胞技術(shù))18-19
- 3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析19-20
- 4 結(jié)果20-32
- 4.1 大體觀察結(jié)果及分析20-21
- 4.2 X線觀察結(jié)果與分析21-23
- 4.3 組織學(xué)觀察23-32
- 4.3.1 HE染色結(jié)果觀察23-25
- 4.3.2 Masson染色結(jié)果觀察25-27
- 4.3.3 Osteocalci免疫組化結(jié)果觀察及統(tǒng)計(jì)分析27-29
- 4.3.4 Collagen Ⅰ免疫組化結(jié)果觀察29-32
- 5. 討論32-35
- 5.1 臨界缺損模型的建立33
- 5.2 絲素蛋白復(fù)合脫鈣骨基質(zhì)骨修復(fù)材料33-34
- 5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析34-35
- 6. 結(jié)論35-36
- 參考文獻(xiàn)36-41
- 文獻(xiàn)綜述41-49
- 參考文獻(xiàn)44-49
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況49-50
- 致謝50
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條
1 鞠剛;徐衛(wèi)袁;張亞;張興祥;嚴(yán)飛;沙衛(wèi)平;;多孔絲素蛋白/羥基磷灰石復(fù)合脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨缺損[J];中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù);2011年29期
2 湯譯博;趙亮;蘇佳燦;;骨折動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J];中國(guó)骨傷;2011年01期
,本文編號(hào):731931
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