本文關(guān)鍵詞：重疊延伸PCR法構(gòu)建華支睪吸蟲磷酸甘油酸變位酶突變體CsPGM-H190Q

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【摘要】：為了研究華支睪吸蟲磷酸甘油酸變位酶的活性位點(diǎn),試驗(yàn)通過生物信息學(xué)分析和重疊延伸PCR的方法,對該酶的底物結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行突變,得到突變體基因CsP GM-H190Q,將其克隆至表達(dá)載體pET-24b(+)上,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞,利用IPTG進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。結(jié)果表明:華支睪吸蟲磷酸甘油酸變位酶突變體蛋白(CsP GM-H190Q)的分子質(zhì)量為29.0 ku,Ni-NTA HisTrap柱純化后得到純度較高的蛋白。
【作者單位】： 山東理工大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 重疊延伸PCR 華支睪吸蟲 磷酸甘油酸變位酶 突變體 HQ 純化
【基金】：山東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(ZR2011HM065)
【分類號】：R383.2
【正文快照】： 華支睪吸蟲是一種重要的吸蟲類寄生蟲,寄生在 人或其他宿主的肝膽管內(nèi),可破壞膽管和肝臟組織,引起肝吸蟲病[1]。為更好地研究華支睪吸蟲一些重要蛋白的功能,從中克隆了磷酸甘油酸變位酶(CsP GM)基因并進(jìn)行了初步分析[2]。該基因編碼的蛋白含有256個(gè)氨基酸,為進(jìn)一步確定該酶的，

本文編號：722586