本文關鍵詞：重疊延伸PCR法構建華支睪吸蟲磷酸甘油酸變位酶突變體CsPGM-H190Q

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【摘要】：為了研究華支睪吸蟲磷酸甘油酸變位酶的活性位點,試驗通過生物信息學分析和重疊延伸PCR的方法,對該酶的底物結合位點進行突變,得到突變體基因CsP GM-H190Q,將其克隆至表達載體pET-24b(+)上,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細胞,利用IPTG進行誘導表達。結果表明:華支睪吸蟲磷酸甘油酸變位酶突變體蛋白(CsP GM-H190Q)的分子質(zhì)量為29.0 ku,Ni-NTA HisTrap柱純化后得到純度較高的蛋白。
【作者單位】： 山東理工大學生命科學學院;
【關鍵詞】： 重疊延伸PCR 華支睪吸蟲 磷酸甘油酸變位酶 突變體 HQ 純化
【基金】：山東省自然科學基金項目(ZR2011HM065)
【分類號】：R383.2
【正文快照】： 華支睪吸蟲是一種重要的吸蟲類寄生蟲,寄生在 人或其他宿主的肝膽管內(nèi),可破壞膽管和肝臟組織,引起肝吸蟲病[1]。為更好地研究華支睪吸蟲一些重要蛋白的功能,從中克隆了磷酸甘油酸變位酶(CsP GM)基因并進行了初步分析[2]。該基因編碼的蛋白含有256個氨基酸,為進一步確定該酶的，

本文編號：722586