本文關(guān)鍵詞：肺炎鏈球菌肽鏈內(nèi)切酶O（PepO）在宿主固有免疫激活中的作用及機(jī)制

  更多相關(guān)文章： 肺炎鏈球菌肽鏈內(nèi)切酶O(Pep O) 固有免疫 TLR2 TLR4

【摘要】：背景:肺炎鏈球菌肽鏈內(nèi)切酶O(PepO)是一種新近發(fā)現(xiàn)的且保守表達(dá)的肺炎鏈球菌毒力蛋白,可幫助細(xì)菌黏附侵襲入宿主細(xì)胞。有研究顯示一些毒力因子可與宿主固有免疫受體相互作用,激活特異的信號(hào)通路,從而誘導(dǎo)宿主的免疫防御反應(yīng)。那么PepO作為一種毒力因子是否參與了宿主固有免疫反應(yīng)的激活?其作用機(jī)制又是怎樣的呢?探索毒力因子與宿主的相互作用機(jī)制可能推動(dòng)抗菌藥物以及蛋白疫苗的研發(fā),因此本研究旨在探索PepO在宿主固有免疫激活中的作用及機(jī)制。方法:利用原核表達(dá)重組蛋白技術(shù)制備重組PepO(rPepO)蛋白溶液。構(gòu)建氣管內(nèi)滴注rPepO的小鼠模型,在體內(nèi)評(píng)價(jià)rPepO的固有免疫激活效應(yīng)。采用小鼠腹腔分離的巨噬細(xì)胞(PEMs)、小鼠肺上皮細(xì)胞株(MLE-12)、人支氣管上皮細(xì)胞株(Beas-2B)在體外明確rPepO發(fā)揮免疫激活作用的效應(yīng)細(xì)胞并進(jìn)一步研究相關(guān)的信號(hào)通路。利用定量PCR(Q-PCR)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)分析rPep O誘導(dǎo)的細(xì)胞因子表達(dá)。通過組織切片及蘇木精-伊紅(HE)染色分析肺組織內(nèi)的炎性改變。利用流式細(xì)胞術(shù)及瑞士-吉姆薩染色分析支氣管肺泡灌洗液(BALF)中有核細(xì)胞的種類。利用小分子抑制劑、蛋白印跡、免疫熒光試驗(yàn)分析rPepO激活的相關(guān)信號(hào)通路。結(jié)果:本研究中我們證實(shí)了PepO在體內(nèi)外均能誘導(dǎo)小鼠較強(qiáng)的固有免疫反應(yīng)。氣管內(nèi)滴注rPepO后,小鼠肺組織內(nèi)細(xì)胞因子、趨化因子分泌顯著增加且肺內(nèi)出現(xiàn)廣泛的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。與野生小鼠相比,Toll樣受體2(TLR2)、Toll樣受體4(TLR4)缺陷小鼠分泌的細(xì)胞因子、趨化因子顯著減少(p㩳0.001),中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)也顯著減少,但組織損傷更為嚴(yán)重。在體外實(shí)驗(yàn)中,rPepO可刺激PEMs分泌白介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、CXCL1和CXCL10,該效應(yīng)依賴于TLR2、TLR4以及p38、Akt和p65的激活。而rPepO通過MAPKs-NF-κB-PI3K/Akt信號(hào)通路促進(jìn)MLE-12細(xì)胞分泌IL-6和CXCL1,通過PI3K/Akt-MAPKs信號(hào)通路促進(jìn)Beas-2B細(xì)胞分泌IL-8和CXCL-10。結(jié)論:Pep O具有極強(qiáng)的宿主固有免疫激活效應(yīng),且這種效應(yīng)部分依賴于宿主TLR2、TLR4受體。
【關(guān)鍵詞】：肺炎鏈球菌肽鏈內(nèi)切酶O(Pep O) 固有免疫 TLR2 TLR4
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R378.1
【目錄】：

• 符號(hào)說明4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-10
• 1 材料方法10-14
• 2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果14-34
• 3 討論34-38
• 參考文獻(xiàn)38-44
• 全文總結(jié)44-45
• 文獻(xiàn)綜述45-57
• 參考文獻(xiàn)51-57
• 致謝57-58
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文58

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1 高強(qiáng),李慶,賀靖冬;32株肺炎鏈球菌的分離和藥敏分析[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2001年S1期

2 ;美國(guó)科學(xué)家繪制出肺炎鏈球菌基因全圖[J];現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)生物工程學(xué)雜志;2001年05期

3 熊桃菊;肺炎鏈球菌I型致成人腦膜炎1例[J];臨床檢驗(yàn)雜志;2002年03期

4 胡曉彥;桂炳東;;肺炎鏈球菌分子流行病學(xué)研究進(jìn)展[J];江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn);2007年05期

5 吳金珊;李佳;王曉鵬;;肺炎鏈球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥的研究進(jìn)展[J];中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥;2010年12期

6 ;肺炎鏈球菌對(duì)臨床干預(yù)演變快[J];透析與人工器官;2010年03期

7 王東霞;惠小夏;;肺炎鏈球菌的檢驗(yàn)技術(shù)及其進(jìn)展探討[J];內(nèi)蒙古中醫(yī)藥;2011年12期

8 楊錦紅;劉洋;王新林;李方去;陶洪群;李向陽(yáng);;肺炎鏈球菌的擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性快速檢測(cè)方法的建立和應(yīng)用[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2012年06期

9 李潔,俞桑潔,楊永弘;肺炎鏈球菌疾病及其預(yù)防[J];中國(guó)計(jì)劃免疫;1999年03期

10 陸德源;;肺炎鏈球菌表面蛋白A是肺炎鏈球菌的一種乳鐵蛋白結(jié)合蛋白[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(微生物學(xué)分冊(cè));2000年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 周忠華;劉華;喻華;;69株肺炎鏈球菌的體外抗菌藥物活性研究[A];中華醫(yī)院管理學(xué)會(huì)第十一屆全國(guó)醫(yī)院感染管理學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2004年

2 唐恒;陳勃江;李為民;;219株呼吸道肺炎鏈球菌的分離及耐藥性分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第12次全國(guó)內(nèi)科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

3 張媛媛;王一雯;孫勝利;賀建平;;耐青霉素性肺炎鏈球菌致急性化膿性腦膜炎1例[A];第九屆西北五�。▍^(qū)）檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2005年

4 吳佳學(xué);季海生;朱德全;;兒科痰培養(yǎng)肺炎鏈球菌耐藥分析對(duì)臨床的指導(dǎo)作用[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

5 黃小翠;崔亞利;;兒童使用的肺炎鏈球菌疫苗研究進(jìn)展[A];第一次全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會(huì)成立大會(huì)論文匯編[C];2014年

6 胡惠麗;胡翼云;何樂健;沈敘莊;高薇;楊永弘;;肺炎鏈球菌在兒童社區(qū)獲得性肺炎死亡病例中致病地位的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十四次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

7 胡慶豐;呂火祥;沃銘毅;;53例呼吸道分離的肺炎鏈球菌耐藥性分析[A];2007年浙江省醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

8 高薇;姚開虎;俞桑潔;楊永弘;;2000～2005年分離自北京兒童鼻咽部的19群肺炎鏈球菌的耐藥性變化[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第五次全國(guó)兒科中青年學(xué)術(shù)交流大會(huì)論文匯編（上冊(cè)）[C];2008年

9 余素飛;厲世笑;傅鷹;陳慧紅;朱海燕;陳文嫻;張慧娜;;肺炎鏈球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類的耐藥機(jī)制研究[A];2011年浙江省檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

10 黃勇;萬根平;顧曉瓊;鄧秋連;梁柳;鐘華敏;;廣州地區(qū)兒童感染肺炎鏈球菌耐藥相關(guān)基因的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 北京兒童醫(yī)院微生物免疫室 姚開虎;接種哪種肺炎鏈球菌疫苗好[N];健康報(bào);2007年

2 鄧力;肺炎鏈球菌易攻擊小孩和老人[N];健康報(bào);2007年

3 記者 王丹;兒童肺炎鏈球菌性疾病防治指南發(fā)布[N];健康報(bào);2010年

4 周密;山羊可能感染了肺炎鏈球菌病[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報(bào);2010年

5 記者 吳偉農(nóng);美科學(xué)家繪制出肺炎鏈球菌基因圖譜[N];新華每日電訊;2001年

6 本報(bào)記者 李穎;肺炎鏈球菌遇流感病毒危害更大[N];科技日?qǐng)?bào);2010年

7 衛(wèi)生部北京醫(yī)院 張秀珍;肺炎鏈球菌對(duì)青霉素耐藥率上升快[N];健康報(bào);2008年

8 中華醫(yī)學(xué)會(huì)公共衛(wèi)生學(xué)分會(huì)主任委員 曾光;秋冬季請(qǐng)呵護(hù)好“呼吸大道”[N];健康報(bào);2010年

9 記者 毛黎;遨游天宇的特殊客[N];科技日?qǐng)?bào);2007年

10 記者 鄭靈巧;流感繼發(fā)肺炎鏈球菌疾病危害大[N];健康報(bào);2010年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李瓊;肺炎鏈球菌自溶素LytA的結(jié)構(gòu)和功能研究[D];中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué);2015年

2 曾憲飛;DprA蛋白在肺炎鏈球菌毒力中的作用研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2014年

3 金萍;以cpsB基因測(cè)序?yàn)橹鞯男蜇灧肿由飳W(xué)方法檢測(cè)肺炎鏈球菌血清型及臨床應(yīng)用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2016年

4 陳蓉;兒童呼吸道感染病原學(xué)及肺炎鏈球菌耐藥的分子流行病學(xué)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

5 張巧;肺炎鏈球菌毒力蛋白基因工程疫苗的實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2010年

6 孟江萍;應(yīng)用啟動(dòng)子誘捕策略篩選并初步鑒定肺炎鏈球菌宿主體內(nèi)誘導(dǎo)基因[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

7 張雪梅;肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化對(duì)細(xì)菌毒力和耐藥性影響的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2003年

8 馬千里;肺炎鏈球菌毒力蛋白基因工程疫苗優(yōu)勢(shì)抗原篩選[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

9 賁亞t ;肺炎鏈球菌HMG-CoA合成酶和還原酶基因克隆表達(dá)及功能研究[D];華中師范大學(xué);2008年

10 牛司強(qiáng);一種肺炎鏈球菌溶菌酶樣假想蛋白質(zhì)SP0987的結(jié)構(gòu)和功能研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 耿倩;蘇州地區(qū)呼吸道感染兒童肺炎鏈球菌攜帶率、耐藥現(xiàn)狀和分子流行病學(xué)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

2 許佳毅;大環(huán)內(nèi)酯類（阿奇霉素）對(duì)肺炎鏈球菌小鼠模型的療效研究[D];復(fù)旦大學(xué);2014年

3 劉學(xué)欣;肺炎鏈球菌臨床分離株耐藥機(jī)制和常見血清型及毒力基因研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2015年

4 崔建邦;重慶地區(qū)兒童急性呼吸道感染肺炎鏈球菌耐藥性及耐藥基因的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

5 王建敏;肺炎鏈球菌烯醇化酶與熱休克蛋白DnaJ相互作用研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

6 徐紅梅;GntR型轉(zhuǎn)錄因子SPD_0064對(duì)肺炎鏈球菌莢膜多糖的調(diào)控作用及機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

7 張宏鵬;肺炎鏈球菌熱休克蛋白GrpE的初步晶體學(xué)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

8 王麗濱;肺炎鏈球菌糖代謝蛋白CcpA對(duì)莢膜多糖的調(diào)控研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

9 吳盈盈;肺炎鏈球菌DnaJ調(diào)節(jié)樹突狀細(xì)胞誘導(dǎo)T細(xì)胞免疫應(yīng)答的分子機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

10 趙博;肺炎鏈球菌融合蛋白PsaA-PcpA疫苗的應(yīng)用研究[D];吉林大學(xué);2016年

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