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交感神經(jīng)對小鼠子宮MCP-1介導(dǎo)的免疫細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)

發(fā)布時(shí)間:2017-08-20 22:08

  本文關(guān)鍵詞:交感神經(jīng)對小鼠子宮MCP-1介導(dǎo)的免疫細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)


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【摘要】:目的:通過研究交感神經(jīng)對MCP-1介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,探討其對子宮局部免疫水平的調(diào)節(jié)及其作用機(jī)制。方法:(1)交感神經(jīng)阻斷實(shí)驗(yàn):將60只正常的雌性小白鼠隨機(jī)的分為對照組(A組)和實(shí)驗(yàn)組(B組),每組每時(shí)間點(diǎn)各5只小鼠。A組每天早上9:00腹腔注射0.2 ml 6-羥多巴胺(100 mg/kg),連續(xù)注射5天,B組注射相同劑量的生理鹽水(含0.01%抗壞血酸)。分別于注射后第1、3、5、7、9、14天下午3:00取子宮。(2)去甲腎上腺素(norepinephrine,NE)處理實(shí)驗(yàn):將20只正常雌性實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為4組。所有的實(shí)驗(yàn)小鼠均注射6-OHDA以阻斷其交感神經(jīng),然后三個(gè)實(shí)驗(yàn)組小鼠每天兩次早晚分別注射0.02μg、0.2μg、2μg的NE,對照組小鼠則注射相同劑量的生理鹽水,各組均在注射NE的第五天下午3:00取子宮。免疫組化檢測小鼠子宮組織內(nèi)CCR2蛋白的表達(dá)情況;原位雜交方法檢測MCP-1和CCR2的m RNA表達(dá);ELISA方法檢測MCP-1和IP3的表達(dá)量。結(jié)果:(1)與相應(yīng)的對照組小鼠相比,在注射6-OHDA后的第1天,各項(xiàng)指標(biāo)均沒有明顯的變化,從第3天開始,各項(xiàng)指標(biāo)表達(dá)均有所上調(diào),并隨著時(shí)間的推移呈現(xiàn)出先升高后降低的變化趨勢。在子宮各部位中,內(nèi)膜表達(dá)MCP-1與CCR2較多,且注射6-OHDA與NE后內(nèi)膜變化最為明顯,外膜表達(dá)最少。(2)與對照組相比,低濃度NE處理組的小鼠子宮內(nèi)MCP-1與CCR2表達(dá)均極顯著增強(qiáng)(P0.01),中濃度NE處理組的表達(dá)量亦極顯著升高(P0.01),但比低濃度NE的作用有所下降。高濃度的NE對趨化因子MCP-1蛋白表達(dá)的影響不顯著,但對MCP-1m RNA的表達(dá)有增強(qiáng)作用;對趨化因子受體CCR2表達(dá)的增強(qiáng)作用也不明顯,而且,在內(nèi)膜,高濃度NE處理組的CCR2表達(dá)量與對照組相比顯著降低。(3)與相應(yīng)的對照組小鼠相比,在注射6-OHDA后,小鼠子宮組織IP3含量有所上升,在第5天達(dá)極顯著水平(P0.01)。注射NE后,小鼠子宮組織內(nèi)IP3含量有所升高,以低濃度組升高最為明顯,達(dá)極顯著水平(P0.01),中濃度組達(dá)顯著水平(P0.05)。結(jié)論:(1)子宮組織內(nèi)免疫細(xì)胞(巨噬細(xì)胞)的活化與遷移受交感神經(jīng)的調(diào)節(jié),且這種作用可能是通過MCP-1介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路來實(shí)現(xiàn)的。(2)交感神經(jīng)對子宮組織內(nèi)免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用與其分泌的遞質(zhì)NE有關(guān),且NE的作用與其濃度有關(guān),可能存在雙向調(diào)節(jié)機(jī)制。(3)MCP-1及其受體CCR2可以通過IP3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮對免疫細(xì)胞的趨化作用。
【關(guān)鍵詞】:子宮 交感神經(jīng) 去甲腎上腺素 CCR2 MCP-1
【學(xué)位授予單位】:河南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R392
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • ABSTRACT6-11
  • 縮略語表11-13
  • 1 文獻(xiàn)綜述13-28
  • 1.1 交感神經(jīng)13-17
  • 1.1.1 交感神經(jīng)及其在子宮的分布13-14
  • 1.1.2 交感神經(jīng)遞質(zhì)及其作用機(jī)制14-16
  • 1.1.3 交感神經(jīng)與免疫16-17
  • 1.1.4 交感神經(jīng)與趨化因子17
  • 1.1.5 交感神經(jīng)阻斷方法17
  • 1.2 母胎界面的免疫細(xì)胞及其功能17-23
  • 1.2.1 自然殺傷細(xì)胞17-18
  • 1.2.2 T淋巴細(xì)胞18-19
  • 1.2.3 巨噬細(xì)胞19-23
  • 1.3 趨化因子及其受體23-28
  • 1.3.1 趨化因子23-24
  • 1.3.2 單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)24-25
  • 1.3.3 趨化因子受體25-26
  • 1.3.4 趨化因子受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制26-28
  • 引言28-31
  • 2.材料與方法31-39
  • 2.1 材料31-32
  • 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物31
  • 2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑31
  • 2.1.3 相關(guān)實(shí)驗(yàn)試劑的配制31-32
  • 2.1.4 實(shí)驗(yàn)儀器32
  • 2.2 方法32-39
  • 2.2.1 樣品制備方法32-34
  • 2.2.2 實(shí)驗(yàn)方法34-38
  • 2.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法38-39
  • 3 結(jié)果與分析39-69
  • 3.1 交感神經(jīng)阻斷對小鼠子宮組織內(nèi)MCP-1 表達(dá)的影響39-45
  • 3.1.1 交感神經(jīng)阻斷對小鼠子宮組織內(nèi)MCP-1 蛋白表達(dá)的影響39-40
  • 3.1.2 交感神經(jīng)阻斷對小鼠子宮組織內(nèi)MCP-1 基因表達(dá)的影響40-45
  • 3.2 阻斷交感神經(jīng)對小鼠子宮組織內(nèi)CCR2表達(dá)的影響45-55
  • 3.2.1 阻斷交感神經(jīng)對小鼠子宮組織內(nèi)CCR2蛋白表達(dá)的影響45-50
  • 3.2.2 阻斷交感神經(jīng)對小鼠子宮組織內(nèi)CCR2基因表達(dá)的影響50-55
  • 3.3 阻斷交感神經(jīng)對小鼠子宮組織內(nèi)IP3表達(dá)的影響55-56
  • 3.4 NE對交感神經(jīng)阻斷小鼠子宮組織內(nèi)MCP-1 表達(dá)的影響56-60
  • 3.4.1 NE對交感神經(jīng)阻斷小鼠子宮組織內(nèi)MCP-1 蛋白表達(dá)的影響56
  • 3.4.2 NE對交感神經(jīng)阻斷小鼠子宮組織內(nèi)MCP-1 基因表達(dá)的影響56-60
  • 3.5 NE對交感神經(jīng)阻斷小鼠子宮組織內(nèi)CCR2表達(dá)的影響60-68
  • 3.5.1 NE對交感神經(jīng)阻斷小鼠子宮組織內(nèi)CCR2蛋白表達(dá)的影響60-64
  • 3.5.2 NE對交感神經(jīng)阻斷小鼠子宮組織內(nèi)CCR2基因表達(dá)的影響64-68
  • 3.6 NE對交感神經(jīng)阻斷小鼠子宮組織內(nèi)IP3表達(dá)的影響68-69
  • 4 討論69-75
  • 4.1 本研究的出發(fā)點(diǎn)69-70
  • 4.2 交感神經(jīng)可以通過調(diào)節(jié)子宮組織MCP-1 及CCR2的表達(dá)調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的活化及遷移70-73
  • 4.3 MCP-1 及CCR2對子宮免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)可能是通過IP3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路實(shí)現(xiàn)的73
  • 4.4 交感神經(jīng)通過調(diào)節(jié)MCP-1 介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路實(shí)現(xiàn)對子宮局部免疫調(diào)控73-75
  • 5 結(jié)論75-77
  • 參考文獻(xiàn)77-85
  • 圖版85-91
  • 致謝91-93
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄93-94

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本文編號(hào):709132

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