DMSO聯(lián)合高糖體外誘導(dǎo)兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為胰島樣細(xì)胞的研究
發(fā)布時(shí)間:2017-08-17 03:08
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【摘要】:該研究旨在探索二甲基亞砜(dimethyl sulphoxide,DMSO)聯(lián)合高糖體外誘導(dǎo)日本大耳白兔(Lepus brachyurus)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化為胰島樣細(xì)胞的可行性及其調(diào)控機(jī)制。采用不含血清的DMSO聯(lián)合高糖誘導(dǎo)P3代兔BMSCs分化為胰島樣細(xì)胞。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)變化;雙硫腙染色和免疫熒光染色檢測(cè)細(xì)胞分化;RTq PCR檢測(cè)胰島細(xì)胞相關(guān)基因[Foxa2(forkhead box A2)、Nestin(neuroepithelial stem cell protein)、Pax6(paired box gene 6)、Pdx-1(pancreatic duodenal homeobox-1)、胰島素]的表達(dá),并以誘導(dǎo)培養(yǎng)前(0 d)細(xì)胞、兔骨髓細(xì)胞、P3代BMSCs和胰腺組織中胰島細(xì)胞相關(guān)基因表達(dá)情況作為參照。結(jié)果表明,Foxa2、Nestin和Pax6基因不能作為兔BMSCs向胰島樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化成功的標(biāo)志基因。DMSO能夠激活Pdx-1基因的表達(dá),促進(jìn)兔BMSCs分化為可分泌胰島素的胰島前體細(xì)胞。高糖能夠促進(jìn)兔BMSCs分化為胰島樣細(xì)胞,并可顯著促進(jìn)Pdx-1和Foxa2基因的表達(dá)。
【作者單位】: 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)牧醫(yī)工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 兔 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 二甲基亞砜 高糖 分化 胰島樣細(xì)胞
【基金】:國家高新技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(863計(jì)劃)(批準(zhǔn)號(hào):2008AA101010) 河南省基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃基金(批準(zhǔn)號(hào):092300410081)資助的課題~~
【分類號(hào)】:R329.2
【正文快照】: 1材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物1月齡雄性日本大耳白兔5只(購自河南省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)。1.2主要試劑胎牛血清購自浙江天杭生物科技有限公司。DMEM/F12干粉培養(yǎng)基、H-DMEM培養(yǎng)液購自Gibco公司。DMSO、4%多聚甲醛、Triton X-100、正常山羊血清、DAPI染核劑、抗熒光衰減淬滅劑購自Solarbio
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1 柴三葆;楊金奎;;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為胰島樣細(xì)胞的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué).內(nèi)分泌學(xué)分冊(cè);2005年S1期
2 孫吉平;楊于嘉;王曉莉;宋建輝;賈延R,
本文編號(hào):686806
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