本文關鍵詞：不同方法對苦瓜核糖體失活蛋白的PEG化學修飾后蛋白濃度測定的差異

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【摘要】：目的探究PEG化學修飾對4種常用蛋白濃度測定方法的影響。方法采用福林-酚試劑法(Lowry法)、二喹啉甲酸法(BCA法)、考馬斯亮藍法(Bradford法)和紫外分光光度法(UV法)分別測定樣品中α-苦瓜素和抗人類免疫缺陷病毒植物蛋白MAP30經PEG修飾前、后的蛋白含量;并用Lowry法和BCA法對低濃度游離PEG修飾前、后的樣品蛋白含量進行測定。結果發(fā)現(xiàn)考馬斯亮藍不與樣品發(fā)生顏色反應,PEG修飾后會使UV法測定值變大,Lowry法測定值略有變大,BCA法基本不受影響;低濃度的游離PEG對測定方法無影響,但高濃度的PEG會吸附Folin-酚,形成黃色絮狀物。結論 PEG化學修飾對蛋白濃度測定方法影響最小的為BCA法,Lowry法最靈敏,Bradford法不適用;而PEG化學修飾會使UV法測定值增大20%~30%,可作為快速測定時的校準參考。
【作者單位】： 成都醫(yī)學院檢驗醫(yī)學院;
【關鍵詞】： PEG化學修飾 苦瓜籽 核糖體失活蛋白 蛋白濃度測定
【基金】：國家大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目(No:201413705019) 四川省大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目(No:201613705026)
【分類號】：R392-33
【正文快照】： α-苦瓜素(Alpha-momorcharin,α-MMC)和抗人類免疫缺陷病毒植物蛋白MAP30(momordicaanti-HIV protein,MAP30)都是從苦瓜中提取分離得到的核糖體失活蛋白(ribosome inactive protein,RIP),目前已有多篇研究[1-3]報道,上述兩種蛋白均有較強的抗病毒和抗腫瘤效果,特別是抗HIV作

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本文編號：670097