本文關(guān)鍵詞：三種不同抗原對(duì)小鼠γδT細(xì)胞體外擴(kuò)增的比較

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【摘要】：目的比較異戊烯焦磷酸(IPP)、熱休克蛋白70(HSP70)和表位肽(EP6)對(duì)小鼠脾臟γδT細(xì)胞體外擴(kuò)增的差異。方法 2011年1月—2015年5月于北京協(xié)和醫(yī)院及北京世紀(jì)壇醫(yī)院選取健康雄性SPF級(jí)C57 BL/6小鼠32只,分為16組,每組2只。提取并分離小鼠脾臟γδT細(xì)胞,分為對(duì)照組、IPP組、HSP70組和EP6組,每組再按濃度及干預(yù)方式(連續(xù)性刺激及單次刺激)的不同進(jìn)行分組,IPP濃度分為1.25 ng/ml、2.5 ng/ml、5 ng/ml,HSP70濃度分為6.25μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml,EP6濃度分為0.05μg/μl、0.1μg/μl、0.2μg/μl,連續(xù)性刺激即每隔2~3日換液50%并補(bǔ)充所換液體中相應(yīng)的抗原,單次刺激組即不需補(bǔ)充所換液體中的抗原,共培養(yǎng)10 d。檢測(cè)對(duì)照組與不同濃度抗原、不同干預(yù)方式在培養(yǎng)的第0天(D0)、第3天(D3)、第7天(D7)和第10天(D10)的γδT細(xì)胞比例。結(jié)果不同濃度的抗原作用γδT細(xì)胞后第3天出現(xiàn)擴(kuò)增峰值,達(dá)峰時(shí)抗原由小到大各濃度的增殖百分比分別為:IPP組(5.46%±0.01%、5.23%±0.01%、5.08%±0.08%),HSP70組(7.43%±0.11%、4.48%±0.07%、7.78%±0.07%),EP6組(3.80%±0.10%、6.22%±0.13%、8.42%±0.11%)。達(dá)峰時(shí)IPP組1.25 ng/ml的擴(kuò)增效果較2.5ng/ml和5.0 ng/ml明顯升高(5.46%±0.01%vs.5.23%±0.01%、5.08%±0.08%,P0.05)。3組γδT細(xì)胞的擴(kuò)增效果不隨抗原濃度增加而升高,隨堵養(yǎng)時(shí)間的延長而降低。濃度不變干預(yù)方式不同時(shí),連續(xù)性刺激組和單次刺激組均在第3天出現(xiàn)擴(kuò)增峰值,連續(xù)性刺激組第3天的增殖百分比分別為:IPP組6.38%±0.58%、HSP70組4.27%±0.26%、EP6組5.41%±0.11%;單次刺激組第3天的增殖百分比分別為:IPP組3.60%±0.27%、HSP70組4.54%±0.16%、EP6組3.20%±0.11%;達(dá)峰時(shí)IPP組和EP6組均出現(xiàn)連續(xù)性刺激組擴(kuò)增百分比大于一次性單次刺激組(P0.05)。結(jié)論小鼠模型中抗原體外擴(kuò)增脾臟γδT細(xì)胞時(shí),培養(yǎng)后第3天為擴(kuò)增的達(dá)峰時(shí)間,且抗原連續(xù)性刺激擴(kuò)增效果優(yōu)于單次刺激。
【作者單位】： 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)科;首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京佑安醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 脾臟 γδT細(xì)胞 抗原 增殖 異戊烯焦磷酸 熱休克蛋白 表位肽 小鼠
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81201294)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 細(xì)胞和細(xì)胞是目前已知的2種主要T淋巴細(xì)胞,78T細(xì)胞占人類淋巴細(xì)胞總數(shù)的比例小于10%,7ST細(xì)胞識(shí)別的抗原分為MHC分子和非MHC分子,其中磷酸類抗原、熱休克蛋白、肽類物質(zhì)屬于非MHC限制分子,T細(xì)胞作用廣泛,主要調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫和監(jiān)視腫瘤的免疫反應(yīng)等[1]。本研究旨在比較在動(dòng)物模

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1 李加美;陳云新;朱華;代小偉;魏強(qiáng);叢U，

本文編號(hào)：661905