本文關(guān)鍵詞：多房棘球絳蟲apomucin基因qPCR引物的篩選及潛在應(yīng)用

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【摘要】：目的篩選多房棘球絳蟲(Echinococcus multilocularis)apomucin基因(Em-apo)的qPCR最佳引物,探索該基因的表達(dá)水平。方法根據(jù)Gene DB中4種Em-apo序列,設(shè)計引物并通過熒光定量PCR(q PCR)對引物進(jìn)行分析,確定每對引物的特異性、PCR擴增效率。利用篩選得到的最佳引物,分別檢測經(jīng)阿苯達(dá)唑(5μg/ml)和胰島素(100 ng/ml)培養(yǎng)處理的多房棘球絳蟲原頭節(jié)(1 000個)Em-apo表達(dá)水平的變化,用稀釋阿苯達(dá)唑的DMSO和胰島素的PBS作為各自的對照。結(jié)果篩選分別得到了Em-apo-1、Em-apo-2/3、Em-apo-4和內(nèi)參基因actin的特異引物各1對,qPCR熔解曲線分析結(jié)果顯示,每對引物的擴增產(chǎn)物只出現(xiàn)單峰,且擴增效率均為95%~101%。qPCR分析結(jié)果顯示,與DMSO對照組(1.00)相比,多房棘球絳蟲原頭節(jié)經(jīng)阿苯達(dá)唑處理后,Emapo-1、Em-apo-2/3和Em-apo-4的表達(dá)水平均有所上升,分別為1.51±0.27、1.39±0.30和1.14±0.18,三者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與PBS對照組(1.00)相比,原頭節(jié)經(jīng)胰島素處理后,Em-apo表達(dá)水平的變化不一,其中Em-apo-1的表達(dá)水平基本不變,Em-apo-4的表達(dá)水平有所下降,而Em-apo-2/3明顯下調(diào)(0.73±0.09),但三者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論本實驗篩選確定的Em-apo基因的qPCR引物特異,可用于Em-apo基因表達(dá)水平的檢測。多房棘球絳蟲原頭節(jié)經(jīng)阿苯達(dá)唑和胰島素處理后,對Em-apo-1、Em-apo-2/3和Em-apo-4的表達(dá)水平有一定的影響。
【作者單位】： 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所 家畜疫病病原生物學(xué)國家重點實驗室 甘肅動物寄生蟲病重點實驗室;新疆大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 多房棘球絳蟲 apomucin基因 qPCR 阿苯達(dá)唑 胰島素
【基金】：國家自然科學(xué)基金(No.31460659)~~
【分類號】：R383.33
【正文快照】： (1 College of Veterinary Medicine,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China;2 State KeyLaboratory of Veterinary Etiological Biology,Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy ofAgricultural Science,Lanzhou 730046,China;3 College of Li

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1 徐霞;影響多房棘球絳蟲城區(qū)傳播的空間和時間因素[J];國外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊);2003年05期

2 胡姝穎;小鼠品系差異及可的松處理對原發(fā)性多房棘球絳蟲囊泡形成和發(fā)展的影響[J];國外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊);2004年05期

3 溫浩;張亞樓;Jean-Mathieu BART;Giraudoux P;Vuitton DA;馬旭東;鄒林樾;苗玉清;Craig PS;;犬體內(nèi)細(xì)粒棘球絳蟲和多房棘球絳蟲的混合感染[J];中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;2006年01期

4 唐崇惕;崔貴文;錢玉春;康育民;彭文峰;王彥海;呂洪昌;陳東;;我國內(nèi)蒙古大興安嶺北麓泡狀肝包蟲種類的研究I.多房棘球絳蟲[J];中國人獸共患病學(xué)報;2006年12期

5 王謙;克莉絲汀·布德克;黃亮;帕崔克·熱合度;弗蘭西斯·豪爾;多米尼克·維通;菲利普·克瑞格;邱東川;;四川省藏族牧區(qū)感染多房棘球絳蟲犬只空間聚集性研究(英文)[J];預(yù)防醫(yī)學(xué)情報雜志;2012年05期

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7 洪凌仙,蔣弘平,林宇光;細(xì)粒棘球絳蟲和多房棘球絳蟲皮層的掃描電鏡和透射電鏡觀察[J];地方病通報;1988年03期

8 楊旭;;實驗嚙齒動物氣管接種多房棘球絳蟲原頭節(jié)后未成熟絳蟲鏈體在腸道的發(fā)育[J];地方病譯叢;1991年01期

9 H Sato;岑衍華;;氣管內(nèi)接種原頭節(jié)后未成熟的多房棘球絳蟲在實驗嚙齒類動物中腸外的鏈體發(fā)育[J];地方病譯叢;1992年02期

10 佟小鶯;環(huán)境因素對多房棘球絳蟲卵感染力的影響[J];國外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊);1996年03期

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1 米曉云;古努爾.吐爾遜;張壯志;石保新;吐爾洪·依米提;張旭;趙莉;金映紅;張文寶;;四種寵物鼠作為多房棘球絳蟲中間宿主的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會——第三屆中國獸醫(yī)臨床大會論文集[C];2012年

2 楊俊萍;龔艷清;陳信忠;;多房棘球蚴線粒體ND1基因分析及PCR檢測方法[A];動物檢疫學(xué)分會2010年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2010年

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2 魯曉風(fēng);多房棘球絳蟲原頭節(jié)蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D];廈門大學(xué);2007年

3 楊梅;多房棘球絳蟲重組Bb-EmⅡ/3-Em14-3-3疫苗構(gòu)建及其免疫機制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

4 王鴻;多房棘球絳蟲重組BCG-EmⅡ/3和BCG-Em14-3-3疫苗構(gòu)建及其免疫機制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2006年

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