幽門螺桿菌hspA-ureB融合基因在乳酸菌中的表達(dá)
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【摘要】:目的構(gòu)建融合表達(dá)幽門螺桿菌(H.pylori)抗原Ure B與Hsp A的乳酸乳球菌(L.lactis)菌株,為H.pylori感染的疫苗和免疫診斷研究奠定基礎(chǔ)。方法從前期構(gòu)建的hsp A-ure B融合基因克隆菌株E.coli TB1/p MAL-c2x-hsp Aure B中提取質(zhì)粒,用PCR方法從質(zhì)粒中擴(kuò)增hsp A-ure B基因,將擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)限制性酶切后與表達(dá)載體p NZ8110連接,用于轉(zhuǎn)化E.coli MC1061菌株,從轉(zhuǎn)化子中提取重組質(zhì)粒p NZ8110-hsp A-ure B,用電穿孔法將其轉(zhuǎn)入L.lactis NZ3900菌株中,用乳鏈菌素誘導(dǎo)hsp A-ure B表達(dá),應(yīng)用PAGE分析表達(dá)產(chǎn)物。結(jié)果 hsp A-ure B基因的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物長度為2 085 bp,酶切、PCR和測序鑒定結(jié)果均顯示L.lactis表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建正確,PAGE分析未能確定融合基因表達(dá)條帶。結(jié)論首次以L.lactis為宿主菌成功構(gòu)建H.pylori 2種抗原的融合表達(dá)系統(tǒng),研究發(fā)現(xiàn)對H.pylori口服疫苗和診斷技術(shù)發(fā)展具有重要意義。
【作者單位】: 鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院流行病與統(tǒng)計學(xué)教研室;河南省分子診斷與醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)協(xié)同創(chuàng)新中心(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院);河南省分子醫(yī)學(xué)重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】: 乳酸乳球菌 熱休克蛋白 尿素酶 幽門螺桿菌 融合表達(dá)
【基金】:中國博士后科學(xué)基金特別資助項目(200801273) 河南省分子診斷與醫(yī)學(xué)檢驗技術(shù)協(xié)同創(chuàng)新中心(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院)資助項目(XTCX-2015-ZD2)
【分類號】:R3416;R392
【正文快照】: 幽門螺桿菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染可以引起胃炎、消化性潰瘍和胃癌等多種疾病[1]。由于基于抗生素的三聯(lián)療法不能預(yù)防重復(fù)感染,且因細(xì)菌抗藥性升高致療效下降,因此疫苗研究在H.pylori感染防治中成為研究熱點[2-4]。H.pylori感染的免疫診斷因具有簡便快捷和損傷較
【相似文獻(xiàn)】
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中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條
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,本文編號:657058
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