本文關(guān)鍵詞：果蠅Hsp83多克隆抗體的制備及鑒定

  更多相關(guān)文章： Hsp蛋白 原核表達 多克隆抗體

【摘要】：目的制備和鑒定抗Hsp83蛋白的多克隆抗體。方法利用PCR技術(shù)從果蠅cDNA中獲得hsp83基因片段,構(gòu)建重組質(zhì)粒;將其轉(zhuǎn)化到BL21(DE3)菌株中誘導(dǎo)蛋白表達,利用Ni-NTA親和法純化重組蛋白;再將純化的蛋白免疫BALB/C小鼠制備多克隆抗體;利用免疫印跡法(Western blot)和免疫熒光染色法檢測多克隆抗體的特異性。結(jié)果構(gòu)建的pET28ahsp83質(zhì)粒在大腸桿菌中成功表達了Hsp83融合蛋白,蛋白純化后作為抗原免疫小鼠,獲得了抗Hsp83的多克隆抗體。免疫印跡法和免疫熒光染色法檢測顯示,抗果蠅Hsp83多克隆抗體具有較高的特異性,并能檢測出內(nèi)源性Hsp83蛋白。果蠅卵巢免疫熒光染色顯示,Hsp83蛋白定位在卵巢細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。結(jié)論成功制備了小鼠抗Hsp83蛋白的特異性抗體,此工作為深入研究Hsp83蛋白的功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 安徽師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： Hsp蛋白 原核表達 多克隆抗體
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(31071266) 安徽省高校自然科學(xué)基金重點項目(KJ2015A082) 安師大研究生科研創(chuàng)新與實踐項目(2015cxsj172) 安徽高�？蒲衅脚_創(chuàng)新團隊項目
【分類號】：R392
【正文快照】： 熱休克蛋白90(HsP90)是一類在進化上高度保守的、原核和真核生物中普遍存在的分子伴侶蛋白,具有ATPase活性,主要參與蛋白的激活、蛋白質(zhì)的自穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)、細(xì)胞周期運轉(zhuǎn)的調(diào)控及多種信號傳遞過程[w],在致癌信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、應(yīng)激損傷等過程中也發(fā)揮重要作用[4’5]。果繩Hsp83蛋白由/wP83

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 代海麗;欒穎;高鐵磊;朱琳;靳占峰;;柯薩奇病毒B3的多克隆抗體制備[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2011年05期

2 張煜;于湘輝;查曉;王安榮;孔維;;單純皰疹病毒胸苷激酶多克隆抗體的制備[J];吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2008年06期

3 張文;劉紅軍;胡志軍;高琰;高志濤;王輝;;兔抗凋亡蛋白酶活化因子-1多克隆抗體的制備、純化與鑒定[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2009年01期

4 馬小淵;滕祥云;姚仲元;龍志高;潘乾;戴和平;鄔伶仟;梁德生;;綠色熒光蛋白兔多克隆抗體的制備[J];中國生物制品學(xué)雜志;2008年10期

5 王海灝;仰霈雯;雷家慧;;兩種多克隆刺激條件下人誘導(dǎo)性Treg表型的多樣性變化[J];中國免疫學(xué)雜志;2012年09期

6 柯碧霞,王健,沈衛(wèi)英,高建民,申慶祥;鈣結(jié)合蛋白D-9K基因原核表達載體的構(gòu)建、表達產(chǎn)物純化及其多克隆抗體的制備[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2000年03期

7 竇勇;寧喜斌;;副溶血弧菌多克隆抗體的制備及其特性分析[J];食品與生物技術(shù)學(xué)報;2007年03期

8 姜飛;劉小林;李喜蓮;Jim W Xuan;;小鼠SKA1蛋白的多克隆抗體制備、鑒定與初步應(yīng)用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2009年03期

9 唐潔;孫平;章曉聯(lián);;人CD59基因克隆、原核表達及其多克隆抗體的制備[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2009年10期

10 吳玉;蔡媛媛;徐霞;林云恩;;人Ⅱ型高爾基體膜蛋白73多克隆抗體的制備及免疫學(xué)鑒定[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 高t熻，

本文編號：654830