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骨髓間充質干細胞細胞周期同步化的方法及對向神經細胞分化的影響

發(fā)布時間:2017-08-11 01:22

  本文關鍵詞:骨髓間充質干細胞細胞周期同步化的方法及對向神經細胞分化的影響


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【摘要】:目的分析不同處理條件下細胞同步化于G0/G1時期的效果以得到最佳的同步化條件,并研究同步化對骨髓間充質干細胞(BMSCs)在堿性成纖維細胞因子(b FGF)的作用下分化為神經細胞的影響。方法分離培養(yǎng)成年大鼠BMSCs,5%、1%、0.5%、0.1%、0胎牛血清(FBS)分別處理24 h、48 h。PI染色后經流式細胞儀檢測細胞周期各時相細胞所占比例,與正常培養(yǎng)條件(10%FBS)處理下對比。得到最佳處理條件后,b FGF處理3 d、7 d,免疫熒光細胞化學方法檢測Nestin和Tuj-1的表達。結果成年大鼠BMSCs原代提取,經傳代后,細胞形態(tài)為長梭形。不同處理條件下G1/G0期細胞比例均高于正常培養(yǎng)條件,1%FBS處理48 h時G1/G0期細胞比例為(94.274±0.468)%,達最高峰(F=39.91,P0.001)。b FGF誘導3 d后,細胞周期同步化后的Nestin+細胞數顯著高于未同步化的細胞數[(80.3±2.4)%vs.(12.1±1.5)%](F=28.25,P0.001);b FGF誘導7 d后,同步化后的Tuj-1+細胞數顯著高于未同步化的細胞數[(74.8±3.2)%vs.(19.3±2.5)%](F=17.95,P0.001)。結論 1%FBS處理48 h是將BMSCs同步化于G0/G1期的最佳條件。細胞周期同步化于G0/G1期能夠提高BMSCs向神經細胞分化的比例。
【作者單位】: 北京航空航天大學生物與醫(yī)學工程學院;首都醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院;
【關鍵詞】骨髓間充質干細胞 細胞周期 同步化 血清饑餓法 神經分化 大鼠
【基金】:國家“863”計劃項目(No.2012AA020206) 國家自然科學基金面上項目(No.31271037);國家自然科學基金國際合作與交流項目(No.31320103903);國家自然科學基金委員會資助項目(No.31130022) “十二五”國家科技支撐計劃項目(No.2012BAI17B04) 高等學校全國優(yōu)秀博士學位論文作者專項資金資助項目(No.201356) 國家國際科技合作專項項目(No.2014DFA30640)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: [本文著錄格式]李曼麗,趙文,高鈺丹,等.骨髓間充質干細胞細胞周期同步化的方法及對向神經細胞分化的影響[J].中國康復理論與實踐,2016,22(12):1399-1403.CITED AS:Li ML,Zhao W,Gao YD,et al.Cell cycle synchronization methods of bone marrow mesenchymal stem cells and i

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本文編號:653606

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