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生長分化因子5轉(zhuǎn)染對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞增殖分化的影響

發(fā)布時間:2017-08-08 12:31

  本文關(guān)鍵詞:生長分化因子5轉(zhuǎn)染對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞增殖分化的影響


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【摘要】:目的:探討生長分化因子5(GDF5)基因轉(zhuǎn)染對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)增殖分化的影響。方法:采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)大鼠BMSCs,pc DNA3.1(+)/h GDF5重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs后,利用免疫熒光法、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)法檢測GDF5蛋白及mRNA的表達,利用3H-TdR檢測細胞DNA合成,采用流式細胞儀檢測細胞生長周期比例;利用甲苯胺藍染色、阿辛藍染色及PCR法檢測Ⅱ型膠原的表達。結(jié)果:pc DNA3.1(+)/h GDF5重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大鼠BMSCs后可以穩(wěn)定表達,轉(zhuǎn)染pc DNA3.1(+)/h GDF5重組質(zhì)粒的BMSCs cpm值明顯高于未轉(zhuǎn)染BMSCs組(P0.05);轉(zhuǎn)染pc DNA3.1(+)/h GDF5重組質(zhì)粒的BMSCs的G1期和G2期細胞的比例下降,S期細胞的比例上升;轉(zhuǎn)染pc DNA3.1(+)/h GDF5重組質(zhì)粒的BMSCs的Ⅱ型膠原的表達水平增高。結(jié)論:pc DNA3.1(+)/h GDF5重組質(zhì)?梢猿晒D(zhuǎn)染大鼠BMSCs,促進BMSCs增殖并誘導(dǎo)其向軟骨細胞分化。
【作者單位】: 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬紅會醫(yī)院關(guān)節(jié)外科;
【關(guān)鍵詞】生長分化因子 骨髓間充質(zhì)干細胞 軟骨細胞 基因轉(zhuǎn)染
【基金】:陜西省科技計劃項目(2013K12-17-03)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 生長分化因子5(growth/differentiation factor5,GDF5)又稱軟骨形態(tài)發(fā)生蛋白1(cartilage-de-rived morphogenetic protein-1,CDMP-1),屬于轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)超家族成員,在軟骨形成、骨骼發(fā)育過程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用[1-4]。有實驗表明外

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本文編號:640013

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