本文關(guān)鍵詞：弓形蟲棒狀體蛋白R(shí)OP38的原核表達(dá)與鑒定

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【摘要】：目的原核表達(dá)弓形蟲棒狀體蛋白R(shí)OP38,并對(duì)重組蛋白rROP38的反應(yīng)原性進(jìn)行鑒定。方法根據(jù)已發(fā)表的ROP38基因序列設(shè)計(jì)引物,通過RT-PCR方法擴(kuò)增弓形蟲RH株的ROP38基因。將ROP38部分基因克隆到原核表達(dá)載體p ET-28a(+)后,重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞,IPTG誘導(dǎo)表達(dá)并優(yōu)化表達(dá)條件,SDS-PAGE分析表達(dá)情況,并通過Western blot鑒定其反應(yīng)原性。結(jié)果 SDS-PAGE顯示在上清和包涵體均有rROP38表達(dá),分子量約為43k D。Western blot結(jié)果顯示,rROP38蛋白能被His標(biāo)簽抗體和感染弓形蟲的人陽(yáng)性血清識(shí)別,說(shuō)明ROP38具有良好的反應(yīng)原性,可以作為潛在的血清學(xué)診斷抗原。結(jié)論本研究成功獲得了具有良好反應(yīng)原性的弓形蟲重組蛋白rROP38。
【作者單位】： 山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院 山東省寄生蟲病防治研究所;山東省臨沂市平邑縣畜牧局;山東省臨沂市畜牧局;
【關(guān)鍵詞】： 弓形蟲 棒狀體蛋白 原核表達(dá) 納蟲空泡
【基金】：國(guó)家自然基金青年項(xiàng)目(31502057、81501770)
【分類號(hào)】：R382.5
【正文快照】： 剛地弓形蟲(Toxoplasma gondii)是一種重要的人畜共患胞內(nèi)寄生原蟲,能感染哺乳動(dòng)物、鳥類等所有溫血?jiǎng)游颷1]。弓形蟲病呈世界性分布,全球平均人群感染率為20%~30%,我國(guó)人群感染率為5%~20%[2-4]。近年來(lái)飼養(yǎng)寵物的增多,使得弓形蟲感染率呈逐年上升趨勢(shì),但目前仍缺少治療弓形蟲

【相似文獻(xiàn)】

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