非必需氨基酸和β-巰基乙醇對神經(jīng)干細胞增殖的影響
發(fā)布時間:2017-08-06 03:18
本文關鍵詞:非必需氨基酸和β-巰基乙醇對神經(jīng)干細胞增殖的影響
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【摘要】:目的觀察非必需氨基酸(NEAA)和β-巰基乙醇對神經(jīng)干細胞(NSCs)增殖的影響。方法取孕齡為14.5 d的雌鼠,處死后提取NSCs并培養(yǎng),取5~7代的NSCs用于實驗,將NSCs細胞使用傳代培養(yǎng)基培養(yǎng),并分為四組,對照組:加入磷酸鹽緩沖液(PBS)12μL;NEAA組:加入NEAA 10μL,PBS 2μL;β-巰基乙醇組:加入β-巰基乙醇2μL,PBS 10μL;NEAA+β-巰基乙醇組:加入NEAA 10μL,β-巰基乙醇2μL。通過細胞計數(shù)法計算NSCs的增殖速度,噻唑藍(MTT)法測定NSCs增殖率,RT-PCR法測定NSCs中凋亡相關基因含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)的表達,免疫組化法對NSCs進行鑒定并測定NSCs向神經(jīng)元和星形膠質細胞的分化潛能。結果與對照組比較,NEAA組NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3 mRNA降低(P0.05或0.01);β-巰基乙醇組及NEAA+β-巰基乙醇組NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3 mRNA、TUJ-1陽性細胞百分比、GFAP陽性細胞百分比降低,Nestin升高(P0.05或0.01)。與NEAA組比較,NEAA+β-巰基乙醇組各項指標差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05或0.01);與β-巰基乙醇組比較,NEAA+β-巰基乙醇組NSCs增殖速度、增殖率升高,Caspase-3mRNA降低(P0.05或0.01)。結論 NEAA和β-巰基乙醇均能促進NSCs增殖,聯(lián)合使用起協(xié)同作用。
【作者單位】: 昆明醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院;昆明醫(yī)科大學附屬精神衛(wèi)生中心;昆明醫(yī)科大學;
【關鍵詞】: 神經(jīng)干細胞 非必需氨基酸 β-巰基乙醇 增殖 分化
【基金】:國家自然科學基金資助項目(31460314)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 附屬精神衛(wèi)生中心;3昆明醫(yī)科大學)神經(jīng)干細胞(NSCs)廣泛存在于胚胎和成年哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng),是一類具有分裂潛能和自我更新能力的前體細胞,它可以通過對稱分裂和不對稱分裂方式進行自我更新并產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細胞,包括神經(jīng)元、星形膠質細胞和少突膠質細胞等[1]。NSCs的
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,本文編號:628159
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