本文關(guān)鍵詞：全人源抗人腫瘤壞死因子-α單克隆抗體毛細(xì)管等電聚焦鑒別方法的建立及驗(yàn)證

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【摘要】：目的建立用于全人源抗人腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)單克隆抗體鑒別的毛細(xì)管等電聚焦(capillary isoelectric focusing,c IEF)方法,并進(jìn)行驗(yàn)證。方法通過(guò)優(yōu)化c IEF過(guò)程中各關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)參數(shù),如陰極穩(wěn)定劑濃度、陽(yáng)極穩(wěn)定劑濃度、兩性電解質(zhì)濃度、3-10與8-10.5兩性電解質(zhì)比例、聚焦時(shí)間、聚焦電壓,建立c IEF方法,并對(duì)方法的專屬性、重復(fù)性、中間精密度進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果確定c IEF方法的實(shí)驗(yàn)參數(shù)為:陰極穩(wěn)定劑濃度30 mmol/L,陽(yáng)極穩(wěn)定劑濃度3.2 mmol/L,3-10兩性電解質(zhì)在樣品溶液中體積比為6.0%,聚焦電壓為25 k V,聚焦時(shí)間為10 min。保護(hù)劑在樣品出峰時(shí)間無(wú)紫外吸收峰,陽(yáng)性對(duì)照阿達(dá)木單抗與樣品出峰時(shí)間及峰形一致,陰性對(duì)照利妥昔單抗生物類似藥、貝伐珠單抗、曲妥珠單抗生物類似藥、西妥昔單抗與樣品出峰時(shí)間及峰形均不一致,且對(duì)樣品無(wú)干擾;樣品制備重復(fù)性主峰等電點(diǎn)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(relative standard deviation,RSD)為0.114%,中間精密度RSD為0.837%。結(jié)論建立的c IEF方法 p H梯度和精密度良好,專屬性較強(qiáng),適用于制品的批放行鑒別試驗(yàn)。
【作者單位】： 武漢生物制品研究所有限責(zé)任公司抗體研究室;
【關(guān)鍵詞】： 毛細(xì)管等電聚焦 腫瘤壞死因子-α 單克隆抗體 鑒別
【基金】：國(guó)家科技重大專項(xiàng)課題資助項(xiàng)目(2011ZX09506-005)
【分類號(hào)】：R392.11
【正文快照】： 藥物鑒別試驗(yàn)是根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì),采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法來(lái)判斷藥物的真?zhèn)?是藥檢工作中的首要任務(wù)。鑒別試驗(yàn)方法要求專屬性強(qiáng),重復(fù)性好,靈敏度高,以及操作簡(jiǎn)便、快速[1]。全人源抗人腫瘤壞死因子-α(tumor necrosisfactor-α,TNF-α)單克隆抗體是本公

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本文編號(hào)：622380