本文關(guān)鍵詞：band3基因在斑馬魚早期胚胎中的表達(dá)

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【摘要】：目的:用band3基因的反義mRNA探針進(jìn)行斑馬魚全胚胎原位雜交,檢測band3基因在野生型Tüebingen斑馬魚胚胎發(fā)育過程中的表達(dá)。方法:Trizol法提取斑馬魚胚胎總RNA并設(shè)計特異性引物,采用RTPCR法擴(kuò)增band3基因cDNA編碼區(qū)片段;通過基因重組技術(shù)構(gòu)建PBSK-band3重組質(zhì)粒,用Bam HⅠ酶切得到線性化PBSK-band3;以T7 RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄合成反義地高辛標(biāo)記的band3 RNA探針,用全胚胎原位雜交法檢測band3基因在斑馬魚胚胎早期的表達(dá)情況。結(jié)果:成功克隆band3基因片段,構(gòu)建PBSK-band3重組質(zhì)粒;經(jīng)體外轉(zhuǎn)錄獲得地高辛標(biāo)記的反義band3 mRNA探針,原位雜交后檢測證實band3基因在斑馬魚胚胎早期發(fā)育過程中間細(xì)胞群(ICM)和主動脈性腺中腎區(qū)(AGM)呈現(xiàn)高表達(dá)。結(jié)論:地高辛標(biāo)記的反義band3 mRNA探針可檢測到斑馬魚胚胎中band3基因的定位表達(dá)。
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué)兒科教研室;貴州醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室;貴州醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心;貴州醫(yī)科大學(xué)組織工程與干細(xì)胞實驗中心;
【關(guān)鍵詞】： 斑馬魚 胚胎 band 全胚胎原位雜交 探針
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31260284;31360285) 貴州省科技基礎(chǔ)條件平臺項目[(2009)4005] 貴州省優(yōu)秀科技省長專項基金(S2008-4)
【分類號】：R-332
【正文快照】： band3(ae1;slc4a1)編碼的蛋白是表達(dá)在紅細(xì)胞膜上的主要蛋白質(zhì),這種蛋白質(zhì)是紅細(xì)胞膜上的陰離子HCO-3和Cl-通道蛋白,也是Ser/Thr激酶的主要底物[1-3]。Band3蛋白由3個亞基組成1個是跨膜區(qū)進(jìn)行氯乙烯/碳酸氫鹽交換,1個是胞質(zhì)C-末端結(jié)構(gòu)域和1個胞質(zhì)N-末端結(jié)構(gòu)域。Band3蛋白的胞

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 梁愛華;;斑馬魚——一種可用于中藥藥效和毒性篩選的魚類模型[J];中國中藥雜志;2009年22期

2 李金玲;王婷;李Z腦，

本文編號：602751