發(fā)布時間：2017-07-31 17:06

  本文關鍵詞：穩(wěn)定表達紅色熒光蛋白的人胚胎干細胞系的建立

  更多相關文章： 人胚胎干細胞 核轉染 紅色熒光蛋白 類胚體

【摘要】：目的 :建立可以穩(wěn)定表達紅色熒光蛋白(red fluorescent protein,RFP)的人胚胎干細胞(human embryonic stem cells,h ESCs)系。方法:優(yōu)化核轉染方法后,將RFP表達載體p EF1α-Ds Red-Express2導入h ESCs中。利用堿性磷酸酶染色、RT-PCR、免疫熒光染色和類胚體形等方法,比較核轉染前后h ESCs的干細胞特性。結果:核轉染后h ESCs的堿性磷酸酶染色結果為陽性。核轉染前后h ESCs的Oct4、Sox2、Klf4、Nanog基因的表達未出現(xiàn)明顯差異。RFP-h ESCs具有三胚層分化潛能,并且可穩(wěn)定傳30代以上。結論:成功建立穩(wěn)定表達紅色熒光蛋白的h ESCs,干細胞特性不受RFP的影響,可用于后續(xù)的實驗研究。
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學江蘇省異種移植重點實驗室;中南大學生殖與干細胞工程研究所;
【關鍵詞】： 人胚胎干細胞 核轉染 紅色熒光蛋白 類胚體
【基金】：江蘇省異種移植重點實驗室科研經費(BM2012116)
【分類號】：R329.2
【正文快照】：

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本文編號：600178