本文關(guān)鍵詞：H7N9禽流感病毒HA2基因真核表達(dá)與免疫原性初步研究

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【摘要】：目的利用真核表達(dá)載體構(gòu)建H7N9禽流感病毒血凝素刺突莖部(HA2)的真核表達(dá)質(zhì)粒,在293F細(xì)胞中表達(dá)HA2蛋白,并初步探討其免疫原性。方法根據(jù)pMD18-T-HA中的序列設(shè)計(jì)H7N9禽流感病毒HA2擴(kuò)增引物,在下游引物中引入胰酶酶切位點(diǎn);目的基因經(jīng)特異性酶切位點(diǎn)克隆入自身帶有Fc標(biāo)簽的pFUSE-IgG1-Fc1載體,構(gòu)建重組質(zhì)粒HA2-Fc;將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293F細(xì)胞,通過(guò)間接免疫熒熒光(IFA)和免疫印跡法(WB)鑒定HA2蛋白的表達(dá)和免疫原性。結(jié)果成功構(gòu)建H7N9禽流感病毒HA2基因真核表達(dá)質(zhì)粒HA2-Fc,并在293F細(xì)胞中表達(dá)出分子量大約為50kDa的重組蛋白。IFA和WB顯示該蛋白與抗H7N9病毒鼠多抗具有良好的免疫反應(yīng)。結(jié)論成功構(gòu)建表達(dá)HA2亞單位的真核表達(dá)系統(tǒng),重組蛋白具有較高的免疫原性,為篩選H7N9廣譜疫苗候選分子、廣譜中和抗體,及深入研究其致病機(jī)理和免疫機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 江蘇省疾病預(yù)防控制中心;
【關(guān)鍵詞】： HN禽流感病毒 血凝素刺突莖部 真核表達(dá)系統(tǒng)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(81501793)
【分類號(hào)】：R373.1
【正文快照】： 高致病性禽流感H7N9是2013年我國(guó)首先發(fā)現(xiàn)報(bào)道的流感新亞型[1],起病急、進(jìn)展快、病死率高,目前尚無(wú)針對(duì)性特效藥物,特異性疫苗也處于臨床試驗(yàn)階段[2-4]。血凝素(HA)作為流感病毒的重要表面抗原,是免疫系統(tǒng)主要識(shí)別的靶標(biāo),但HA變異度極高,一個(gè)重要原因?yàn)樵跈C(jī)體免疫系統(tǒng)作用下,H

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本文編號(hào)：586771