發(fā)布時間：2017-07-27 10:24

  本文關(guān)鍵詞：含5種烈性出血熱病毒的假病毒陽性參考品的制備

  更多相關(guān)文章： 馬爾堡病毒 扎伊爾型埃博拉病毒 蘇丹型埃博拉病毒 拉沙熱病毒 黃熱病毒 假病毒 陽性參考品

【摘要】：目的利用慢病毒載體系統(tǒng)制備含有馬爾堡病毒(Marburg virus)、扎伊爾型埃博拉病毒(Zaire Ebola virus)、蘇丹型埃博拉病毒(Sudan Ebola virus)、拉沙熱病毒(Lassa fever virus)和黃熱病毒(Yellow fever virus)5種烈性病毒核酸片段的假病毒,為其核酸檢測提供一種通用的陽性參考品。方法體外合成該5種病毒的目的基因片段,通過融合PCR技術(shù)將5個片段連接成一條基因,然后克隆到慢病毒表達載體上,并與其輔助載體共轉(zhuǎn)染293T細胞;轉(zhuǎn)染后分別于48、72 h收集培養(yǎng)上清,用DNase和RNase進行消化處理及純化濃縮,最后提取核酸,利用普通PCR和實時熒光定量PCR鑒定假病毒是否包裝成功。結(jié)果測序結(jié)果表明,體外合成的該5種病毒的目的基因片段已正確連接并插入慢病毒載體中;載體轉(zhuǎn)染293T細胞后收集上清中的假病毒,提取核酸經(jīng)上述兩種PCR鑒定均可特異性檢測到靶基因,表明已成功包裝出含該5種出血熱病毒靶基因的假病毒顆粒。結(jié)論該研究獲得的假病毒顆�？勺鳛樯鲜�5種出血熱相關(guān)烈性病毒核酸檢測的通用陽性參考品。
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué);軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所病原微生物生物安全國家重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】： 馬爾堡病毒 扎伊爾型埃博拉病毒 蘇丹型埃博拉病毒 拉沙熱病毒 黃熱病毒 假病毒 陽性參考品
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(81501789) 軍隊重大專項課題(AWS15J006)
【分類號】：R373
【正文快照】： 馬爾堡病毒(Marburg virus)、埃博拉病毒(Ebolavirus,EBOV)、拉沙熱病毒(Lassa fever virus)和黃熱病毒(yellow fever virus)屬于生物戰(zhàn)劑病毒,主要流行于非洲,均可引起嚴重的出血熱癥狀,具有很高的感染率和致死率。馬爾堡病毒是人類發(fā)現(xiàn)的第一種絲狀病毒屬病毒,所引發(fā)的疾病

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

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本文編號：580949