LAIR-1 siRNA對(duì)幽門(mén)螺桿菌誘導(dǎo)單核細(xì)胞THP-1凋亡的影響
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【摘要】:目的 研究LAIR-1基因沉默對(duì)幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori)誘導(dǎo)單核細(xì)胞THP-1凋亡的影響。方法以Hp ATCC26695分別感染THP-1細(xì)胞6、12、24和48h,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡及LAIR-1蛋白的表達(dá)。應(yīng)用Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染3對(duì)LAIR-1siRNAs入單核細(xì)胞THP-1中,采用半定量RT-PCR及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)沉默效應(yīng),篩選出的較有效的一對(duì)siRNA再轉(zhuǎn)染入單核細(xì)胞THP-1,48h后加入Hp培養(yǎng)24h,采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。結(jié)果 Hp感染THP-1細(xì)胞6、12、24和48h后的細(xì)胞凋亡率分別為(84±1.77)%、(69.13±4.29)%、(48.3±3.37)%和(21.1±4.67)%,LAIR-1蛋白表達(dá)相對(duì)熒光強(qiáng)度分別為14 934±178、14 369±244、12 259±523和7438±539;轉(zhuǎn)染后48h較有效的siRNA對(duì)LAIR-1mRNA及蛋白沉默效率分別為(39.1±4.67)%和(38.4±3.18)%;將篩選出的siRNA轉(zhuǎn)染細(xì)胞48h后,用Hp感染24h,流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示轉(zhuǎn)染組與陰性對(duì)照組細(xì)胞凋亡率分別為(56.1±9.8)%和(36.9±3.2)%,轉(zhuǎn)染后感染組與空白組LAIR-1蛋白表達(dá)相對(duì)熒光強(qiáng)度分別為12 181±219和10 228±136。結(jié)論 在Hp感染細(xì)胞THP-1 48h內(nèi),隨著感染時(shí)間延長(zhǎng)LAIR-1的表達(dá)及THP-1細(xì)胞凋亡率顯著降低即LAIR-1siRNA能抑制LAIR-1的表達(dá)及THP-1細(xì)胞的凋亡。
【作者單位】: 濱州醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: 幽門(mén)螺桿菌 單核細(xì)胞 凋亡 白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體- 小分子干擾RNA
【分類(lèi)號(hào)】:R378
【正文快照】: markedly over time.LAIR-1siRNA may help to inhibit cell apoptosis induced by the bacterium.幽門(mén)螺桿菌(Helicobacter pylori,Hp)是革蘭陰性微需氧菌,是常見(jiàn)人類(lèi)感染病原菌之一,可長(zhǎng)期定植于胃粘膜。Hp感染引起炎性損傷,導(dǎo)致胃黏膜屏障的破壞,與慢性胃炎、消化性潰瘍、
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,本文編號(hào):553951
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