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BMP4在誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向生殖細胞分化中的作用

發(fā)布時間:2017-07-08 19:15

  本文關鍵詞:BMP4在誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向生殖細胞分化中的作用


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【摘要】:為了探討骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)在誘導骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向生殖細胞分化中的作用,將全骨髓培養(yǎng)法獲取小鼠BMSCs,在含10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)傳代;取生長狀態(tài)良好的第三代(P3)BMSCs,分別添加不同濃度(5、10、20、40和80ng·mL~(-1))的BMP4作為實驗組,未添加BMP4為對照組。4d后,MTT法和臺盼藍染色檢測細胞的增殖率和存活率,實時定量PCR(RT-qPCR)檢測生殖細胞階段特異性基因(Oct4、Dazl、Fragilis、Mvh、Nobox、Stella、Stra8和Gdf9)的表達。結果發(fā)現(xiàn),BMP4濃度為5~20 ng·mL~(-1)時細胞存活率和增殖率最高;BMP4濃度為20 ng·mL~(-1)組Mvh、Fragilis、Oct-4、Dazl及Stella表達水平最高,均顯著高于對照組(P0.05);Nobox表達水平則在BMP4濃度40ng·mL~(-1)組最高,且各濃度組均顯著高于對照組(P0.05);各濃度BMP4組Stra8和Gdf9的表達水平均與對照組間無顯著性差異(P0.05)。此結果提示,BMP4濃度在20 ng·mL~(-1)時,BMSCs的存活率、增殖率及原始生殖細胞特異性基因的表達最高;BMP4在誘導間充質(zhì)干細胞向生殖細胞分化過程中起重要作用。
【作者單位】: 解放軍第105醫(yī)院生殖醫(yī)學中心;
【關鍵詞】骨形態(tài)發(fā)生蛋白 骨髓間充質(zhì)千細胞 生殖細胞 分化
【基金】:南京軍區(qū)醫(yī)學科技創(chuàng)新課題(11Z010)資助
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 干細胞是一類具有自我更新能力和分化潛能的細胞群體。近年研究發(fā)現(xiàn),一些成體非生殖干細胞在體外可誘導分化為生殖細胞樣細胞[14。骨髓是機體最大的干細胞池,早期研究發(fā)現(xiàn)成年小鼠骨髓細胞存在MV/、Doz/、汾e//a和Fragffc等生殖細胞特異性基因的表達,將骨髓干細胞移植到化療損

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本文編號:535912

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