本文關(guān)鍵詞：BMP4在誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向生殖細(xì)胞分化中的作用

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【摘要】：為了探討骨形態(tài)發(fā)生蛋白4(bone morphogenetic protein 4,BMP4)在誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向生殖細(xì)胞分化中的作用,將全骨髓培養(yǎng)法獲取小鼠BMSCs,在含10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)傳代;取生長(zhǎng)狀態(tài)良好的第三代(P3)BMSCs,分別添加不同濃度(5、10、20、40和80ng·mL~(-1))的BMP4作為實(shí)驗(yàn)組,未添加BMP4為對(duì)照組。4d后,MTT法和臺(tái)盼藍(lán)染色檢測(cè)細(xì)胞的增殖率和存活率,實(shí)時(shí)定量PCR(RT-qPCR)檢測(cè)生殖細(xì)胞階段特異性基因(Oct4、Dazl、Fragilis、Mvh、Nobox、Stella、Stra8和Gdf9)的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn),BMP4濃度為5~20 ng·mL~(-1)時(shí)細(xì)胞存活率和增殖率最高;BMP4濃度為20 ng·mL~(-1)組Mvh、Fragilis、Oct-4、Dazl及Stella表達(dá)水平最高,均顯著高于對(duì)照組(P0.05);Nobox表達(dá)水平則在BMP4濃度40ng·mL~(-1)組最高,且各濃度組均顯著高于對(duì)照組(P0.05);各濃度BMP4組Stra8和Gdf9的表達(dá)水平均與對(duì)照組間無顯著性差異(P0.05)。此結(jié)果提示,BMP4濃度在20 ng·mL~(-1)時(shí),BMSCs的存活率、增殖率及原始生殖細(xì)胞特異性基因的表達(dá)最高;BMP4在誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞向生殖細(xì)胞分化過程中起重要作用。
【作者單位】： 解放軍第105醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心;
【關(guān)鍵詞】： 骨形態(tài)發(fā)生蛋白 骨髓間充質(zhì)千細(xì)胞 生殖細(xì)胞 分化
【基金】：南京軍區(qū)醫(yī)學(xué)科技創(chuàng)新課題(11Z010)資助
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 干細(xì)胞是一類具有自我更新能力和分化潛能的細(xì)胞群體。近年研究發(fā)現(xiàn),一些成體非生殖干細(xì)胞在體外可誘導(dǎo)分化為生殖細(xì)胞樣細(xì)胞[14。骨髓是機(jī)體最大的干細(xì)胞池,早期研究發(fā)現(xiàn)成年小鼠骨髓細(xì)胞存在MV/、Doz/、汾e//a和Fragffc等生殖細(xì)胞特異性基因的表達(dá),將骨髓干細(xì)胞移植到化療損

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本文編號(hào)：535912