本文關(guān)鍵詞：一種單抗制品理論消光系數(shù)與實(shí)驗(yàn)確證結(jié)果的比較

  更多相關(guān)文章： 單克隆抗體 蛋白質(zhì)含量 消光系數(shù)

【摘要】：目的本實(shí)驗(yàn)通過3種實(shí)驗(yàn)方法對(duì)1種單抗的消光系數(shù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)確證并與理論消光系數(shù)進(jìn)行比較研究。方法根據(jù)氨基酸一級(jí)序列,計(jì)算出單抗在280 nm處的理論摩爾消光系數(shù),通過質(zhì)譜確定單抗相對(duì)分子質(zhì)量,計(jì)算出理論消光系數(shù);分別用3種方法測(cè)定單抗的蛋白質(zhì)濃度,根據(jù)朗伯-比爾定律c=A/EL計(jì)算實(shí)驗(yàn)消光系數(shù)。方法一為利用尿素變性蛋白測(cè)定其非折疊狀態(tài)(變性狀態(tài))的實(shí)驗(yàn)消光系數(shù),計(jì)算得出折疊狀態(tài)(天然狀態(tài))的消光系數(shù);方法二通過酸水解蛋白,結(jié)合Acc Q Fluor試劑盒利用HPLC對(duì)蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確定量,計(jì)算該抗體的實(shí)驗(yàn)消光系數(shù);方法三通過酸水解蛋白,利用氨基酸序列分析儀對(duì)蛋白進(jìn)行準(zhǔn)確定量,計(jì)算蛋白的實(shí)驗(yàn)消光系數(shù)。結(jié)果理論消光系數(shù)E280為1.453 m L·mg-1·cm-1;3種實(shí)驗(yàn)方法確定的單抗消光系數(shù)分別為(1.442±0.009)、(1.529±0.032)、(1.458±0.019)m L·mg-1·cm-1,均值為(1.477±0.044)m L·mg-1·cm-1,RSD=2.979%(n=9)。研究結(jié)果顯示,該單抗的理論消光系數(shù)與實(shí)驗(yàn)消光系數(shù)的差異較小(0.069%~7.708%)。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用3種方法確證單抗的實(shí)驗(yàn)消光系數(shù),所建立的消光系數(shù)測(cè)定和驗(yàn)證方法可用于抗體藥物蛋白含量的測(cè)定。
【作者單位】： 中國(guó)食品藥品檢定研究院衛(wèi)生部生物技術(shù)產(chǎn)品檢定及標(biāo)準(zhǔn)化重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 單克隆抗體 蛋白質(zhì)含量 消光系數(shù)
【基金】：國(guó)家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項(xiàng)資助項(xiàng)目(2014ZX09304311-001) 中國(guó)食品藥品檢定研究院學(xué)科帶頭人培養(yǎng)基金(2015X6)
【分類號(hào)】：R392-33
【正文快照】： 蛋白質(zhì)含量的準(zhǔn)確測(cè)定對(duì)蛋白藥物的表征、理化及活性分析等均十分重要,迄今為止,多種測(cè)定方法已被應(yīng)用于蛋白的含量測(cè)定中,如凱氏定氮法、Lowry法、Bradford、紫外吸收法等[1-7]。對(duì)于高度純化的蛋白質(zhì),如單抗制品,紫外吸收法由于其相對(duì)準(zhǔn)確的定量、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)應(yīng)用最為廣

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 周波,靜國(guó)忠;用堿水解的方法測(cè)定蛋白質(zhì)的消光系數(shù)[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;1999年04期

2 徐業(yè)林,陶保平,江玲,蘇萬(wàn)芳,郭少陵;人食道癌樣品及正常粘膜樣品對(duì)波長(zhǎng)1.06微米的光消光系數(shù)差異的研究[J];中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào);1984年03期

3 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條

1 李積明;黃建平;丁曉東;;結(jié)合主、被動(dòng)衛(wèi)星資料反演層積云的消光系數(shù)廓線[A];第十屆全國(guó)光電技術(shù)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文集[C];2012年

2 朱李華;陶俊;張濤;韓靜磊;許振成;張仁健;曹軍驥;;廣州夏季大氣消光系數(shù)與能見度觀測(cè)研究[A];第十屆全國(guó)氣溶膠會(huì)議暨第六屆海峽兩岸氣溶膠技術(shù)研討會(huì)摘要集[C];2009年

3 王玄玉;安剛;程樂見;;霧油煙幕粒度對(duì)10．6μm激光消光特性的影響[A];第七屆全國(guó)顆粒測(cè)試學(xué)術(shù)會(huì)議、2008上海市顆粒學(xué)會(huì)年會(huì)論文集[C];2008年

4 車慧正;張小曳;周自江;李楊;陳振林;;1980-2002年西安地區(qū)大氣水平消光特性分析[A];大氣氣溶膠科學(xué)技術(shù)研究進(jìn)展——第八屆全國(guó)氣溶膠會(huì)議暨第二屆海峽兩岸氣溶膠科技研討會(huì)文集[C];2005年

5 王甲寅;時(shí)家明;汪家春;;水霧與霧狀油遮蔽性能的對(duì)比研究[A];2006年全國(guó)光電技術(shù)學(xué)術(shù)交流會(huì)會(huì)議文集（A 光電系統(tǒng)總體技術(shù)專題）[C];2006年

6 任晰;胡歡陵;胡非;唐桂剛;蘇福慶;;激光探測(cè)一次霾背景的沙塵天氣[A];中國(guó)顆粒學(xué)會(huì)2004年年會(huì)暨海峽兩岸顆粒技術(shù)研討會(huì)會(huì)議文集[C];2004年

7 王妮;曹秀明;胡京平;施楣梧;;防透明纖維開發(fā)及其在毛紡上的應(yīng)用[A];第32屆全國(guó)毛紡年會(huì)論文集[C];2012年

8 葛覲銘;黃建平;徐程鵬;齊玉磊;;利用衛(wèi)星與再分析資料對(duì)塔克拉瑪干沙塵分布的研究[A];第31屆中國(guó)氣象學(xué)會(huì)年會(huì)S12 大氣物理學(xué)與大氣環(huán)境[C];2014年

9 李穎穎;孫東松;沈法華;周小林;董晶晶;;多次散射的激光雷達(dá)消光系數(shù)反演方法研究[A];2007年先進(jìn)激光技術(shù)發(fā)展與應(yīng)用研討會(huì)論文集[C];2007年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 高愛臻;掃描激光雷達(dá)的系統(tǒng)研制及應(yīng)用研究[D];南京信息工程大學(xué);2015年

2 王康;霧霾的散射與傳輸特性研究[D];西安電子科技大學(xué);2014年

3 潘雪梅;河北南部地區(qū)霾污染特征及來源研究[D];河北工程大學(xué);2012年

，

本文編號(hào)：527339