本文關(guān)鍵詞：溶血磷脂酸通過RhoA-YAP通路調(diào)控脂肪干細(xì)胞增殖的研究

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【摘要】：目的探討溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)調(diào)控脂肪干細(xì)胞(adipose-derived stem cells,ASCs)增殖的作用及其分子機(jī)制。方法分離SD大鼠ASCs,利用LPA對其進(jìn)行干預(yù),干預(yù)時(shí)間為1 h,采用Western Blot檢測YES相關(guān)蛋白(yes associated protein,YAP)、結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表達(dá)水平。利用免疫熒光檢測YAP亞細(xì)胞定位,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測CTGF和Ankrd1的m RNA表達(dá)水平。慢病毒轉(zhuǎn)染ASCs,Western Blot檢測不同分組YAP蛋白表達(dá)。進(jìn)一步利用流式細(xì)胞術(shù)和CCK-8法檢測不同分組中ASCs增殖情況。最后采用Rho A抑制劑C3干預(yù),免疫熒光檢測不同分組中YAP亞細(xì)胞定位,Western Blot檢測YAP、CTGF和GTP-Rho A的表達(dá)情況。結(jié)果 LPA能顯著促進(jìn)YAP的表達(dá)和在細(xì)胞核內(nèi)的聚集,同時(shí)LPA也能夠促進(jìn)YAP靶基因CTGF在蛋白水平的表達(dá)。LPA能上調(diào)YAP靶基因CTGF和錨蛋白重復(fù)域1(ankyrin repeating domain 1,Ankrd1)的m RNA表達(dá)水平。慢病毒轉(zhuǎn)染敲除YAP表達(dá)后,LPA對YAP的上調(diào)作用被明顯抑制。細(xì)胞周期流式細(xì)胞術(shù)和CCK-8檢測結(jié)果顯示LPA可顯著促進(jìn)ASCs的增殖,但在sh YAP慢病毒轉(zhuǎn)染特異性敲除YAP后,LPA對ASCs的促增殖能力被明顯削弱。Rho A抑制劑C3處理后,LPA對YAP細(xì)胞核聚集的促進(jìn)作用被削弱,同時(shí)LPA對YAP、CTGF和GTP-Rho A表達(dá)的促進(jìn)作用也得到了明顯抑制。結(jié)論 LPA能夠通過Rho A-YAP通路調(diào)控ASCs的增殖。
【作者單位】： 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： 溶血磷脂酸 脂肪干細(xì)胞 Rho A-YAP通路 細(xì)胞增殖
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81371915)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 間充質(zhì)干細(xì)胞為具有自我更新能力的成體干細(xì)胞,其能向中胚層方向(如軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞等)分化[1]。間充質(zhì)干細(xì)胞存在于諸多部位,如骨髓、脂肪、牙髓及滑膜等組織中[2,3]。Zuk等[4]學(xué)者最早在脂肪組織中發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細(xì)胞,并將其命名為脂肪干細(xì)胞(adipose-derived st

【相似文獻(xiàn)】

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3 李宗偉;趙亞蕊;趙超;付榮;李卓玉;;自分泌運(yùn)動(dòng)因子-溶血磷脂酸軸的生物學(xué)功能與調(diào)控[J];生理學(xué)報(bào);2011年06期

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本文編號：526078