本文關(guān)鍵詞：人g2型溶菌酶的多克隆抗體制備及其在睪丸中的表達(dá)分析

  更多相關(guān)文章： 人g型溶菌酶 畢赤酵母 多克隆抗體 睪丸 先天性免疫

【摘要】：目的以真核表達(dá)的人g2型溶菌酶(human goose-type lysozyme 2,LysG2)為免疫原制備抗LysG2的兔多克隆抗體,檢測(cè)LysG2在睪丸組織中的定位,為闡明其生理功能提供線(xiàn)索。方法對(duì)LysG2畢赤酵母GS115轉(zhuǎn)化菌株進(jìn)行高密度培養(yǎng),甲醇誘導(dǎo)目的蛋白表達(dá)并通過(guò)甲殼素親和色譜純化,以重組蛋白為免疫原制備兔抗LysG2多克隆抗體。通過(guò)ELISA檢測(cè)抗體效價(jià)后,對(duì)人體各組織、精子及精液標(biāo)本進(jìn)行Western印跡分析,并對(duì)人睪丸組織進(jìn)行免疫組化檢測(cè)。結(jié)果以畢赤酵母表達(dá)LysG2為免疫原制備的抗體具有高效價(jià),表達(dá)譜分析表明LysG2在睪丸中有表達(dá),在精子蛋白提取物中沒(méi)有檢測(cè)到其存在,在精漿中檢測(cè)到了LysG2。免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示LysG2在睪丸中主要定位于間質(zhì)組織的Sertoli細(xì)胞。結(jié)論本研究成功以真核表達(dá)的LysG2制備了該蛋白多克隆抗體,LysG2在睪丸Sertoli細(xì)胞有表達(dá),并分泌到精漿中,提示LysG2可能在男性生殖系統(tǒng)先天性免疫中發(fā)揮作用。
【作者單位】： 上海健康醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;復(fù)旦大學(xué)遺傳工程國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;上海健康醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 人g型溶菌酶 畢赤酵母 多克隆抗體 睪丸 先天性免疫
【基金】：上海市自然科學(xué)基金(15ZR1421800)
【分類(lèi)號(hào)】：R392
【正文快照】： 溶菌酶在自然界多種生物體內(nèi)均有分布,可以水解細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖的N-乙酰胞壁酸與N-乙酰氨基葡萄糖之間的β-1,4-糖苷鍵,從而引起細(xì)菌破裂。通常認(rèn)為溶菌酶是一種重要的先天性免疫防御因子[1-2]。根據(jù)溶菌酶的分子特點(diǎn),可將其分為6型:雞型(chicken type,g-type)、鵝型(goose t

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 代海麗;欒穎;高鐵磊;朱琳;靳占峰;;柯薩奇病毒B3的多克隆抗體制備[J];哈爾濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2011年05期

2 張煜;于湘輝;查曉;王安榮;孔維;;單純皰疹病毒胸苷激酶多克隆抗體的制備[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年06期

3 張文;劉紅軍;胡志軍;高琰;高志濤;王輝;;兔抗凋亡蛋白酶活化因子-1多克隆抗體的制備、純化與鑒定[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2009年01期

4 馬小淵;滕祥云;姚仲元;龍志高;潘乾;戴和平;鄔伶仟;梁德生;;綠色熒光蛋白兔多克隆抗體的制備[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2008年10期

5 王海灝;仰霈雯;雷家慧;;兩種多克隆刺激條件下人誘導(dǎo)性Treg表型的多樣性變化[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;2012年09期

6 柯碧霞,王健,沈衛(wèi)英,高建民,申慶祥;鈣結(jié)合蛋白D-9K基因原核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)產(chǎn)物純化及其多克隆抗體的制備[J];細(xì)胞生物學(xué)雜志;2000年03期

7 竇勇;寧喜斌;;副溶血弧菌多克隆抗體的制備及其特性分析[J];食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào);2007年03期

8 姜飛;劉小林;李喜蓮;Jim W Xuan;;小鼠SKA1蛋白的多克隆抗體制備、鑒定與初步應(yīng)用[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2009年03期

9 唐潔;孫平;章曉聯(lián);;人CD59基因克隆、原核表達(dá)及其多克隆抗體的制備[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2009年10期

10 吳玉;蔡媛媛;徐霞;林云恩;;人Ⅱ型高爾基體膜蛋白73多克隆抗體的制備及免疫學(xué)鑒定[J];廣東醫(yī)學(xué);2013年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 高t熻，

本文編號(hào)：516079