利用hAPOA1原核蛋白生產(chǎn)兔多克隆抗體
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【摘要】:將hAPOA1的閱讀框連接到原核表達(dá)載體pGEX-4T-1中,構(gòu)建成正確的pGEX-4T-1-hAPOA1原核表達(dá)質(zhì)粒,然后將其轉(zhuǎn)入宿主菌BL21,經(jīng)異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)后,宿主菌表達(dá)出與預(yù)期分子量大小相符的55.4ku的融合蛋白;將純化后的包涵體融合蛋白免疫新西蘭大白兔,制備抗hAPOA1血清并檢測抗體效價。結(jié)果表明,經(jīng)間接酶聯(lián)免疫吸附測定(ID-ELISA)及蛋白質(zhì)免疫印跡(WesternBlot)方法證實,獲得的融合蛋白免疫新西蘭大白兔得到了特異性的多克隆抗體,抗體效價為1∶40000,經(jīng)濟效益可觀。
【作者單位】: 江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所;南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: hAPOA 原核表達(dá) 新西蘭大白兔 融合表達(dá) 多克隆抗體
【基金】:江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號:CX(16)1326]
【分類號】:R392-33
【正文快照】: 載脂蛋白A1(Apo A1)是apo A族最多的一種組分,apo A1為單一多肽鏈,由243個氨基酸殘基組成,是高密度脂蛋白(HDL)的主要載脂蛋白,不僅是生物試劑的重要原料,也是抗動脈粥樣硬化的指標(biāo)[1]。目前,apo A1的檢測多采用免疫比濁法[2],現(xiàn)有的抗載脂蛋白A1抗體的生產(chǎn)采用傳統(tǒng)的免疫方式
【相似文獻(xiàn)】
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本文編號:503861
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