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利用hAPOA1原核蛋白生產兔多克隆抗體

發(fā)布時間:2017-07-01 00:00

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【摘要】:將hAPOA1的閱讀框連接到原核表達載體pGEX-4T-1中,構建成正確的pGEX-4T-1-hAPOA1原核表達質粒,然后將其轉入宿主菌BL21,經異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)誘導后,宿主菌表達出與預期分子量大小相符的55.4ku的融合蛋白;將純化后的包涵體融合蛋白免疫新西蘭大白兔,制備抗hAPOA1血清并檢測抗體效價。結果表明,經間接酶聯(lián)免疫吸附測定(ID-ELISA)及蛋白質免疫印跡(WesternBlot)方法證實,獲得的融合蛋白免疫新西蘭大白兔得到了特異性的多克隆抗體,抗體效價為1∶40000,經濟效益可觀。
【作者單位】: 江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農業(yè)科學研究所;南京師范大學生命科學學院;
【關鍵詞】hAPOA 原核表達 新西蘭大白兔 融合表達 多克隆抗體
【基金】:江蘇省農業(yè)科技自主創(chuàng)新資金[編號:CX(16)1326]
【分類號】:R392-33
【正文快照】: 載脂蛋白A1(Apo A1)是apo A族最多的一種組分,apo A1為單一多肽鏈,由243個氨基酸殘基組成,是高密度脂蛋白(HDL)的主要載脂蛋白,不僅是生物試劑的重要原料,也是抗動脈粥樣硬化的指標[1]。目前,apo A1的檢測多采用免疫比濁法[2],現(xiàn)有的抗載脂蛋白A1抗體的生產采用傳統(tǒng)的免疫方式

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2 俞娟;伍欣星;;重組BLCAP多克隆抗體的制備及初步應用[A];湖北省暨武漢市生物化學與分子生物學學會第八屆第十七次學術年會論文匯編[C];2007年

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本文編號:503861


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