本文關(guān)鍵詞：GM1體外誘導(dǎo)人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)樣細(xì)胞研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂通過體外誘導(dǎo)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)樣細(xì)胞并探索其最佳誘導(dǎo)濃度。方法取足月妊娠剖宮產(chǎn)健康胎兒的臍帶,剔除臍動(dòng)脈和臍靜脈,用酶消化法獲得MSCs,貼壁培養(yǎng),采用流式細(xì)胞技術(shù)行細(xì)胞表型檢測。擴(kuò)增后,取第4代細(xì)胞,分為A、B、C、D、E 5組,前4組為實(shí)驗(yàn)組,E組為對照組,實(shí)驗(yàn)組各組GM1濃度分別為:A組50μg/m L、B組100μg/m L、C組150μg/m L、D組200μg/m L,誘導(dǎo)液用L-DMEM培養(yǎng)基配制,對照組僅使用L-DMEM培養(yǎng)基。觀察5組誘導(dǎo)人臍帶血間質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的作用,每60min觀察細(xì)胞誘導(dǎo)前后的形態(tài),在第360min時(shí)采用免疫細(xì)胞染色法檢測膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、神經(jīng)絲蛋白(neurofilaments protein H,NF-H)以及神經(jīng)元特異性標(biāo)記物微管結(jié)合蛋白-2(microtubule associated protein 2,MAP-2)的表達(dá)情況,并計(jì)算陽性細(xì)胞率。結(jié)果 1大部分原代細(xì)胞在接種9h后貼壁,呈多邊形、菱形,之后變?yōu)殚L梭形,細(xì)胞開始以漩渦、放射狀生長。2P3、P5和P10代細(xì)胞表面的分子標(biāo)記經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn),均表達(dá)CD105、CD90和CD73,卻不表達(dá)HLA-DR、CD19、CD11b、CD45以及CD34。3誘導(dǎo)至第360分鐘后,實(shí)驗(yàn)組各組細(xì)胞均有神經(jīng)樣細(xì)胞出現(xiàn),表現(xiàn)為細(xì)胞胞體收縮成橢圓形,伸出較長突起,以雙極細(xì)胞居多。免疫細(xì)胞化學(xué)檢測顯示實(shí)驗(yàn)組各組NF-H、MAP-2表達(dá)陽性,膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAP表達(dá)為陰性,C組(150μg/m L)細(xì)胞NF-H、MAP-2陽性表達(dá)率最高。對照組細(xì)胞誘導(dǎo)前后變化不明顯。結(jié)論 GM1可以誘人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化,150μg/m L為最合適誘導(dǎo)劑量。
【作者單位】： 河北省任丘市華北石油管理總醫(yī)院;
【關(guān)鍵詞】： 單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 誘導(dǎo)分化 神經(jīng)樣細(xì)胞
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： extending out longer processes,and the bipolar cells w ere the majority.The expression of NF-H and M AP-2w ere detected in the experimental group,w hereas GFAP w as negative.NF-H and M AP-2 in C group(150μg/m L)was at highest rate.Conclusion monosialo f

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本文編號(hào)：501686