本文關(guān)鍵詞：饑餓誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬引起UVRAG分子的降解，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:觀察細(xì)胞發(fā)生自噬后UVRAG分子水平的改變及其與自噬發(fā)生的關(guān)系。方法:將p ERFP-LC3真核表達(dá)載體的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染RD-A細(xì)胞并與次日用不含胎牛血清的eagle’s液代替常規(guī)培養(yǎng)基,37℃、5%CO2的條件下饑餓培養(yǎng)6小時(shí),用熒光顯微鏡觀察RFP-LC3聚集情況。將生長(zhǎng)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的RD-A細(xì)胞用不含胎牛血清的eagle’s液代替常規(guī)培養(yǎng)基,在37℃、5%CO2條件下分別培養(yǎng)2小時(shí)、6小時(shí),用Western Blot檢測(cè)饑餓誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)LC3的型別轉(zhuǎn)換及UVRAG分子的水平改變;將生長(zhǎng)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的RD-A細(xì)胞用不含胎牛血清的eagle’s液代替常規(guī)培養(yǎng)基,同時(shí)應(yīng)用自噬起始階段抑制劑3-MA處理細(xì)胞,在37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)6小時(shí),用Western Blot檢測(cè)P62和LC3分子的改變及UVRAG分子水平的變化;將生長(zhǎng)到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的RD-A細(xì)胞用不含胎牛血清的eagle’s液代替常規(guī)培養(yǎng)基,同時(shí)應(yīng)用溶酶體蛋白酶抑制劑E64d和pepstatin A處理細(xì)胞,在37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)6小時(shí),Western Blot檢測(cè)P62和LC3分子的改變及UVRAG分子水平的變化。結(jié)果:1.饑餓可以誘導(dǎo)或促進(jìn)RD-A細(xì)胞發(fā)生自噬;2.RD-A細(xì)胞饑餓2小時(shí)后,LC3可發(fā)生型別轉(zhuǎn)換,自噬已經(jīng)發(fā)生,但UVRAG分子的水平未見改變,饑餓6小時(shí)后細(xì)胞自噬進(jìn)一步發(fā)展,此時(shí)UVRAG分子水平也出現(xiàn)降低;3.用自噬抑制劑3-MA處理饑餓細(xì)胞,細(xì)胞自噬水平降低,同時(shí)UVRAG分子的降解也隨之減少;4.用自噬抑制劑E64d和pepstatin A處理饑餓誘導(dǎo)的細(xì)胞時(shí),自噬溶酶體對(duì)物質(zhì)的降解作用被抑制,同時(shí)UVRAG分子的降解減少。結(jié)論:饑餓可以誘導(dǎo)細(xì)胞自噬并在形成自噬溶酶體后引起了UVRAG分子的降解。
【關(guān)鍵詞】：饑餓 自噬 紫外輻射抗性相關(guān)蛋白 自噬抑制劑
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 常用縮寫詞中英文對(duì)照表9-10
• 前言10-15
• 1 材料與方法15-24
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料15-17
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法17-24
• 2 結(jié)果24-30
• 2.1 饑餓對(duì)RD-A細(xì)胞自噬的影響24-26
• 2.2 饑餓可誘導(dǎo)RD-A細(xì)胞發(fā)生自噬并降低了自噬分子UVRAG的蛋白水平26-27
• 2.3 3-MA處理細(xì)胞后自噬與UVRAG分子水平的變化27-29
• 2.4 E64D和PEPSTATINA處理細(xì)胞后自噬與UVRAG分子水平的變化29-30
• 3 討論30-34
• 4 結(jié)論34-35
• 參考文獻(xiàn)35-42
• 文獻(xiàn)綜述42-52
• 參考文獻(xiàn)47-52
• 致謝52-54
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果54-55
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷55

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 陳蘭芳;肖亮;楊軍平;;細(xì)胞自噬的分子機(jī)制及其功能[J];實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué);2014年02期

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  本文關(guān)鍵詞：饑餓誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬引起UVRAG分子的降解，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：494240