本文關(guān)鍵詞：旋毛形線蟲肌幼蟲代謝分泌抗原的鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的采用免疫共沉淀偶聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)分離和鑒定旋毛形線蟲肌幼蟲代謝分泌抗原中的血清學(xué)抗原。方法收集感染旋毛形線蟲的新西蘭兔血清,硫酸銨沉淀法分離血清Ig G;從感染肌肉中分離純化肌幼蟲并培養(yǎng)收集代謝分泌抗原。免疫共沉淀和SDS-PAGE分離代謝分泌抗原,Western blot法分析血清學(xué)抗原,并予質(zhì)譜鑒定。結(jié)果間接ELISA檢測旋毛形線蟲感染新西蘭兔的血清抗體滴度達(dá)1∶6400以上;采用硫酸銨沉淀法獲得血清Ig G。免疫共沉淀的旋毛形線蟲肌幼蟲代謝分泌抗原經(jīng)電泳分離獲得4條較清晰的蛋白質(zhì)條帶,Western blot法分析發(fā)現(xiàn)在相對分子質(zhì)量(Mr)40 000、50 000、83 000處存在旋毛形線蟲感染血清識別、而正常兔血清不識別的3條較強(qiáng)的蛋白質(zhì)條帶。切取Mr40 000、50 000、83 000處的蛋白質(zhì)條帶進(jìn)行質(zhì)譜鑒定,獲得4種蛋白質(zhì)分子,分別為絲氨酸蛋白酶、肌幼蟲特異性絲氨酸蛋白酶、43 000分泌糖蛋白、53 000代謝分泌抗原。結(jié)論采用免疫共沉淀偶聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)從旋毛形線蟲肌幼蟲代謝分泌抗原(ES)中獲得4種血清學(xué)抗原,為旋毛形線蟲病有效診斷和疫苗候選分子的獲得提供了新的來源和視角。
【作者單位】： 遵義醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室;湖南師范大學(xué)醫(yī)學(xué)院分子生物學(xué)研究室;
【關(guān)鍵詞】： 旋毛形線蟲 代謝分泌抗原 免疫共沉淀 質(zhì)譜技術(shù)
【基金】：貴州省科學(xué)技術(shù)廳基金項目(黔科合J字LKZ[2011]08號) 貴州省教育廳高校創(chuàng)新團(tuán)隊項目(黔教合人才團(tuán)隊項目2014[39])
【分類號】：R383.15
【正文快照】： 旋毛形線蟲(Trichinella spiralis)感染機(jī)體引起旋毛形線蟲病(Trichinellosis),是一種人獸共患食源性寄生蟲病,呈全球性分布[1]。代謝分泌抗原又稱排泄分泌(excretory-secretory,ES)抗原,是誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生免疫應(yīng)答的主要靶抗原[2],在旋毛形線蟲病的免疫病理、免疫診斷及免疫保護(hù)

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：477870