本文關(guān)鍵詞：衰老模型骨髓基質(zhì)細胞抑制造血細胞增殖分化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究衰老骨髓基質(zhì)細胞對骨髓造血細胞增殖分化能力的影響,為闡述機體造血微環(huán)境衰老對造血干/祖細胞增殖的影響提供實驗依據(jù)。方法全骨髓貼壁法體外培養(yǎng)大鼠骨髓基質(zhì)細胞,分為對照組和衰老組。衰老組:常規(guī)培養(yǎng)基內(nèi)加入30 mg/m L D-半乳糖作用48 h。CCK-8法測定BMSCs增殖;流式細胞術(shù)分析細胞周期;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色觀察衰老BMSCs百分率;Western blot檢測P16、P21和P53蛋白表達。骨髓造血細胞與BMSCs共培養(yǎng),集落計數(shù)檢測髓系多向性造血祖細胞(CFU-Mix)增殖分化。ELISA檢測BMSCs培養(yǎng)上清液中IL-1β、GM-CSF和SCF含量;DCFH-DA流式熒光檢測BMSC活性氧簇(ROS)水平;酶學(xué)法檢測BMSCs內(nèi)過氧化物丙二醛(MDA)含量和總超氧化物歧化酶(SOD)活性。結(jié)果與對照組相比,D-半乳糖誘導(dǎo)BMSCs衰老,細胞阻滯于G0/G1期(P0.01),增殖能力顯著下降,SA-β-Gal染色陽性率升高(P0.01);衰老相關(guān)蛋白P16、P21和P53表達明顯上調(diào)(P0.01)。與衰老BMSCs共培養(yǎng)的骨髓造血細胞增殖分化能力減弱。衰老BMSCs內(nèi)ROS、MDA氧化損傷指標上升,SOD抗氧化指標下降(P0.01);BMSCs培養(yǎng)上清液IL-1β、GM-CSF和SCF含量明顯下降(P0.01)。結(jié)論衰老骨髓基質(zhì)細胞抑制造血細胞增殖、分化能力,其機制可能與骨髓基質(zhì)細胞氧化損傷,分泌活性因子改變有關(guān)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)干細胞與組織工程研究室組織胚胎學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 衰老 造血微環(huán)境 骨髓基質(zhì)細胞 造血細胞 增殖分化
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81173398) 重慶市科委基礎(chǔ)與前沿研究項目(cstc2014jcyj A10001)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 骨髓基質(zhì)細胞(bone marrow stromal cells,BM-SCs)是造血微環(huán)境的核心成分,構(gòu)成造血干細胞(hematopoietic stem cells,HSCs)生存的龕(niche),分泌多種細胞因子,參與調(diào)節(jié)HSCs的自我更新,并調(diào)控HSCs的分化及動員[1-3]。有文獻報道[4],盡管衰老機體外周血細胞的數(shù)量得以基本維持,

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