發(fā)布時間：2017-06-18 12:10

  本文關(guān)鍵詞：2種14型肺炎球菌多糖-蛋白結(jié)合物的制備及免疫原性比較，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:以破傷風類毒素(tetanus toxoid,TT)和己二酸二酰肼(adipic acid dihydrazide,ADH)衍生的TT(TTAH)分別作為載體蛋白制備14型肺炎球菌多糖-蛋白結(jié)合物,比較2種結(jié)合物在小鼠體內(nèi)的免疫原性。方法:以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDAC)作為縮合劑,介導(dǎo)TT與ADH反應(yīng),制備TTAH衍生物,2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)法測定TTAH的-AH衍生率;將14型肺炎球菌多糖(PS14)水解并用1-氰基-4-二甲基氨基吡啶四氟化硼(CDAP)活化后直接與TT或TTAH結(jié)合,結(jié)合物經(jīng)Sepharose 4 FF層析柱純化后收集分配系數(shù)(KD)0.2的樣品并除菌過濾作為結(jié)合物原液,并對其生化指標、血清學特異性和小鼠免疫原性進行檢測。結(jié)果:2種結(jié)合物原液游離糖含量均在1%以內(nèi),多糖回收率分別為PS14-TT:33.80%及PS14-TTAH:29.15%。與A組(多糖組)相比,2種結(jié)合物B組(PS14-TT)和C組(PS14-TTAH)能夠誘導(dǎo)更高的抗PS14抗體水平(P0.001)并具有劑次加強效應(yīng);與C組相比,B組能夠誘導(dǎo)更高的抗PS14抗體水平且差異顯著并具有統(tǒng)計學意義(P0.05);2組結(jié)合物免疫3針后C組抗TT抗體水平高于B組,但差異無統(tǒng)計學意義,B組無劑次加強效應(yīng),而C組有劑次加強效應(yīng)。結(jié)論:PS14-TT在小鼠體內(nèi)誘導(dǎo)了較高的抗PS14抗體水平及較低的抗TT抗體水平,是較理想的多糖蛋白結(jié)合疫苗。
【作者單位】： 蘭州生物制品研究所有限責任公司;
【關(guān)鍵詞】： 肺炎球菌 結(jié)合疫苗 破傷風類毒素 己二酸二酰肼 免疫原性
【基金】：國家“重大新藥創(chuàng)制”科技重大專項資助項目(2011ZX09401-403) 國家863計劃資助項目(2012AA02A401)
【分類號】：R392-33
【正文快照】： 肺炎球菌是引起肺炎、腦膜炎和中耳炎的常見病原體。肺炎球菌按其莢膜多糖的不同可分為94個血清型。其中,約30多個血清型的菌株對人類有致病性,是引起嬰幼兒發(fā)病和死亡的主要原因之一。14型肺炎球菌是所有年齡段患者中分離出的出現(xiàn)頻率最高的型別之一,因此研發(fā)含有肺炎球菌14

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本文編號：459220