本文關(guān)鍵詞：H7N9流感病毒血凝素在昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)及抗血清的制備，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:利用昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)H7N9流感病毒血凝素(HA),以獲得的重組血凝素(rHA1)蛋白免疫家兔制備抗rHA1血清,以用于單向免疫擴散(SRID)法檢測H7N9流感病毒裂解疫苗HA含量。方法:構(gòu)建含H7N9 HA1基因的重組桿狀病毒,轉(zhuǎn)染Sf9細(xì)胞表達(dá)rHA1蛋白。用rHA1蛋白免疫家兔獲得抗rHA1血清。通過血凝抑制(HI)法和SRID法檢測抗血清的HI效價、特異性和線性范圍。結(jié)果:rHA1蛋白在昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中成功實現(xiàn)分泌表達(dá),經(jīng)純化后純度≥90%。不同劑量的rHA1蛋白免疫家兔后獲得抗rHA1血清,HI效價分別為1 280和5 120。SRID試驗中可與H7N9抗原國際參考品反應(yīng)并產(chǎn)生沉淀環(huán),10μg·m L~(-1)到40μg·m L~(-1)抗原濃度范圍內(nèi)沉淀環(huán)直徑與抗原濃度線性正相關(guān),R~2大于0.99,與H1N1、H3N2和B型流感病毒無交叉反應(yīng)。用該免疫血清和H7N9抗血清國際參考品分別檢測H7N9流感病毒裂解疫苗HA含量,兩者無顯著性差異。結(jié)論:在大流感發(fā)生時,昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的rHA1蛋白可以用于制備SRID試驗用免疫血清,以用于H7N9流感病毒裂解疫苗HA含量測定。
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院;
【關(guān)鍵詞】： 流感疫苗有效成分檢測 HN流感病毒 rHA蛋白 血凝素 免疫血清 昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng) 血凝抑制效價 單向免疫擴散
【分類號】：R392-33
【正文快照】： 技術(shù)有限公司。His鼠單抗購自天根生化科技(北京)有限公司,Ni2+Sepharose FF親和層析柱購自GE公司。H7N9抗原國際參考品(編號14/250)、H7N9抗血清國際參考品(編號13/180)購自英國國家生物制品檢定所(NIBSC)。甲型H7N9流感病毒裂解疫苗批號為SS201401001、SS201401002和SS20140

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4 早報記者 韓曉蓉　通訊員 孫國根;H7N9病毒出現(xiàn)抗藥性變異[N];東方早報;2013年

5 記者 孫國根;H7N9病毒出現(xiàn)抗藥性變異[N];健康報;2013年

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本文編號：446197