本文關(guān)鍵詞：沙眼衣原體pORF5質(zhì)粒蛋白免疫優(yōu)勢(shì)片段的篩選與鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:鑒定沙眼衣原體pORF5質(zhì)粒蛋白的免疫原性,并進(jìn)一步篩選和確定pORF5質(zhì)粒蛋白免疫優(yōu)勢(shì)片段。方法:以沙眼衣原體D血清型DNA為模板,設(shè)計(jì)pORF5基因全長(zhǎng)和9個(gè)不同片段特異引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR產(chǎn)物經(jīng)Bam HⅠ、NotⅠ雙酶切后插入經(jīng)同樣雙酶切的原核表達(dá)載體pGEX-6p中,構(gòu)建pORF5質(zhì)粒蛋白不同長(zhǎng)度片段的原核表達(dá)重組體,重組體經(jīng)PCR和測(cè)序鑒定后,轉(zhuǎn)化XL1 Blue大腸桿菌表達(dá)10種不同長(zhǎng)度的GST融合蛋白;ELISA方法檢測(cè)pORF5質(zhì)粒蛋白的免疫原性,Western blot鑒定pORF5質(zhì)粒蛋白的免疫反應(yīng)性;ELISA測(cè)定10個(gè)不同片段與沙眼衣原體生殖道感染患者血清、鼠免疫血清以及抗pORF5單克隆抗體的免疫反應(yīng)性,鑒定pORF5質(zhì)粒蛋白免疫優(yōu)勢(shì)片段。結(jié)果:pORF5質(zhì)粒蛋白免疫原性強(qiáng),能刺激機(jī)體產(chǎn)生高效價(jià)抗體;破壞pORF5質(zhì)粒蛋白天然空間結(jié)構(gòu),其免疫反應(yīng)性基本消失;在ELISA反應(yīng)中,N端缺失66氨基酸的F6片段的免疫反應(yīng)強(qiáng)度與pORF5全長(zhǎng)基本相似,F2與F3出現(xiàn)較弱的免疫反應(yīng),其余片段免疫反應(yīng)消失。結(jié)論:pORF5質(zhì)粒蛋白為構(gòu)象依賴性免疫優(yōu)勢(shì)抗原,其免疫優(yōu)勢(shì)表位和構(gòu)象表位位于C端,本研究為進(jìn)一步探討pORF5質(zhì)粒蛋白的生物學(xué)功能和疫苗的研制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【作者單位】： 特殊病原南華大學(xué)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)研究所/體防控湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 沙眼衣原體 pORF質(zhì)粒蛋白 免疫原性 免疫優(yōu)勢(shì)表位
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81102230,No.31470277) 湖南省高校創(chuàng)新平臺(tái)開(kāi)放基金(13K081) 湖南省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(2015JC3087) 湖南省高層次衛(wèi)生人才“225”工程培養(yǎng)項(xiàng)目(2013-13) 湖南省普通高校帶頭人培養(yǎng)項(xiàng)目(2014-186) 特殊病原體防控湖南省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(2014-5) 湖南省高等學(xué)�！胺肿影袠�(biāo)新藥研究”協(xié)同創(chuàng)新中心(2014-405)資助項(xiàng)目
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis,Ct)泌尿生殖道感染是一種嚴(yán)重危害公眾健康的細(xì)菌性感染疾病。自上世紀(jì)九十年代以來(lái),Ct已超過(guò)淋球菌而成為泌尿生殖道感染性疾病的主要性病病原體。Ct生殖道感染不僅引起女性盆腔炎、不孕和異位妊娠等,也可引起男性尿道炎、附睪炎、睪丸炎和

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 沐桂藩,呂華,徐如良,顧方舟;分泌抗沙眼衣原體單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株的建立[J];中國(guó)免疫學(xué)雜志;1989年04期

2 羅迪青,陳志和,翁智勝,彭潔雯,梁燕燕;1996～1997年305例淋病患者合并感染交原體及沙眼衣原體分析[J];臨床皮膚科雜志;1998年06期

3 董植喜;沙眼衣原體入侵生殖道[J];家庭醫(yī)學(xué);2001年02期

4 陳繼英;謹(jǐn)防沙眼衣原體“性騷擾”[J];醫(yī)藥世界;2000年04期

5 吳年浪,張惠成;熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)沙眼衣原體[J];眼科研究;2003年01期

6 陸金春,衛(wèi)紅英,尹興昌;沙眼衣原體與沙眼的研究進(jìn)展[J];臨床眼科雜志;2003年06期

7 靳穎,王增田,董雪梅;沙眼衣原體的研究進(jìn)展與優(yōu)生[J];武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2004年03期

8 吳尚輝,陳明雄;723例健康體檢者生殖道沙眼衣原體感染的調(diào)查[J];實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué);2004年03期

9 高省,陳祥生;沙眼衣原體分子流行病學(xué)研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊(cè);2004年06期

10 侯淑萍;劉全忠;;關(guān)于沙眼衣原體耐藥及耐藥機(jī)制的探討(英文)[J];Chinese Journal of Sexually Transmitted Infections;2004年02期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 江勇;楊麗娜;劉原君;劉全忠;;沙眼衣原體培養(yǎng)過(guò)程中耐甲氧西林表皮葡萄球菌污染的防控[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第16次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)摘要集[C];2010年

2 朱慧玲;李紅梅;張勤奮;陳木開(kāi);韓建德;;沙眼衣原體持續(xù)感染模型及快速鑒定方法的研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十八次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2012年

3 劉全忠;;沙眼衣原體治療現(xiàn)況和噬菌體的研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第16次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)摘要集[C];2010年

4 肖萌;劉全忠;;沙眼衣原體免疫優(yōu)勢(shì)蛋白的研究進(jìn)展[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十八次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2012年

5 劉原君;齊蔓莉;紹麗麗;盛彩虹;姚衛(wèi)鋒;侯淑萍;劉全忠;;沙眼衣原體標(biāo)準(zhǔn)株不同型之間的差異性探討[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

6 劉全忠;江勇;侯淑萍;邵麗麗;楊曉靜;楊麗娜;;遷延難愈沙眼衣原體泌尿生殖系感染的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

7 楊斌;鄭和平;薛耀華;吳興中;江漢寧;黃進(jìn)梅;;廣州地區(qū)泌尿生殖道沙眼衣原體基因分型研究[A];2010全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2010年

8 邵麗麗;江勇;楊麗娜;楊曉靜;劉原君;劉全忠;;299例泌尿生殖道沙眼衣原體的檢測(cè)及藥物敏感性分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十五次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

9 吳伊旋;陸平;沈志鴻;劉怡文;;272例泌尿生殖道感染沙眼衣原體或解脲支原體患者臨床分析[A];2001年中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

10 劉全中;楊士強(qiáng);傅志宜;王樹(shù)椿;繳穩(wěn)玲;田靜群;;遷延難愈沙眼衣原體泌尿生殖道感染——幾種抗生素的療效評(píng)定和隨訪[A];2002中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2002年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 韓莉;“沙眼衣原體”也會(huì)入侵生殖系統(tǒng)[N];中國(guó)人口報(bào);2006年

2 汪濤;孕婦感染沙眼衣原體危害大[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2007年

3 柯春榮;沙眼衣原體可導(dǎo)致不孕[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2003年

4 鄧啟泰;“沙眼衣原體”個(gè)頭小危害大[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2006年

5 韓麗;衣原體還能引起泌尿系感染[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

6 季建業(yè);沙眼也可致性病[N];中國(guó)消費(fèi)者報(bào);2001年

7 凹凸;沙眼衣原體可致不孕[N];大眾衛(wèi)生報(bào);2001年

8 江錦琦;女性感染沙眼衣原體可致不孕[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2001年

9 林國(guó)瑞;女性濫交易染衣原體[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報(bào);2007年

10 于泓珍;淋球菌與沙眼衣原體引起的感染[N];農(nóng)村醫(yī)藥報(bào)（漢）;2007年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王千秋;泌尿生殖道沙眼衣原體感染的某些血清學(xué)和分子生物學(xué)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);1997年

2 李建紅;沙眼衣原體高分辨率溶解曲線基因分型方法的建立及其在男男性行為者流行病學(xué)調(diào)查中的應(yīng)用[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

3 江勇;沙眼衣原體臨床株體外藥物敏感性與耐藥機(jī)制的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

4 粟玉珍;沙眼衣原體熱休克蛋白60與免疫致病[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2002年

5 高省;女性高危人群生殖道沙眼衣原體感染的分子流行病學(xué)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2007年

6 王蕊;HaCaT細(xì)胞培養(yǎng)沙眼衣原體及體外藥敏試驗(yàn)的探索[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

7 白光春;沙眼衣原體重組口服活疫苗的構(gòu)建及其免疫學(xué)特性的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1999年

8 李元;沙眼衣原體18KDa粘連蛋白的初步研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);1995年

9 杜昆;沙眼衣原體CT703蛋白在感染細(xì)胞中的表達(dá)及功能初探[D];中南大學(xué);2011年

10 尚淑賢;沙眼衣原體藥物敏感性試驗(yàn)方法的建立及其臨床意義的初步探討[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 尤聰;沙眼衣原體培養(yǎng)陽(yáng)性率提高及臨床株熱休克蛋白60的轉(zhuǎn)錄隨傳代的變化[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

2 邵麗麗;沙眼衣原體抗菌素耐藥及治療失敗的評(píng)估[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

3 朱輝;大環(huán)內(nèi)酯類藥物次抑菌濃度誘導(dǎo)沙眼衣原體耐藥的實(shí)驗(yàn)研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2010年

4 侯淑萍;天津市耐藥沙眼衣原體野生株的細(xì)胞學(xué)及基因?qū)W研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2004年

5 姜慧芬;沙眼衣原體主要外膜蛋白重組質(zhì)粒的構(gòu)建、表達(dá)和活性鑒定[D];浙江大學(xué);2010年

6 陳偉;沙眼衣原體泌尿生殖道感染遷移性臨床研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2007年

7 展小飛;泌尿生殖道沙眼衣原體的隨訪和治療方法的評(píng)估及病程與維生素D3水平的聯(lián)系[D];天津醫(yī)科大學(xué);2012年

8 布曉坤;中性粒細(xì)胞在沙眼衣原體小鼠肺炎易感性差異免疫學(xué)機(jī)制的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

9 周雋;電穿孔轉(zhuǎn)化沙眼衣原體建立衣原體載體實(shí)驗(yàn)研究[D];華中科技大學(xué);2006年

10 王梅;泌尿生殖道沙眼衣原體體外單獨(dú)和聯(lián)合藥物敏感性檢測(cè)[D];天津醫(yī)科大學(xué);2011年

  本文關(guān)鍵詞：沙眼衣原體pORF5質(zhì)粒蛋白免疫優(yōu)勢(shì)片段的篩選與鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：436919