融合免疫佐劑Lipo多肽與包膜蛋白EDⅢ區(qū)的登革病毒四價(jià)疫苗的構(gòu)建及免疫效應(yīng)研究
本文關(guān)鍵詞:融合免疫佐劑Lipo多肽與包膜蛋白EDⅢ區(qū)的登革病毒四價(jià)疫苗的構(gòu)建及免疫效應(yīng)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的構(gòu)建編碼免疫佐劑Lipo多肽與登革病毒1-4型包膜蛋白EDIII區(qū)的重組甲病毒載體,并在小鼠體內(nèi)研究其免疫效應(yīng),為研制新型的登革病毒四價(jià)疫苗奠定基礎(chǔ)。方法先通過GS linker將編碼免疫佐劑Lipo多肽的基因序列與編碼登革病毒1-4型包膜蛋白EDIII區(qū)的基因序列進(jìn)行串聯(lián)獲得LipoEDIII;然后將LipoEDIII基因插入甲病毒載體DREP的多克隆位點(diǎn),構(gòu)建重組甲病毒載體DREP-LipoEDIII;將DREP-LipoEDIII轉(zhuǎn)染293細(xì)胞,Western blot檢測(cè)融合蛋白的表達(dá);隨后將DREP-LipoEDIII免疫ICR小鼠,不加任何佐劑,再加強(qiáng)免疫2次后,通過ELISA檢測(cè)血清中的抗體效價(jià)和細(xì)胞因子的分泌情況來評(píng)價(jià)其免疫效應(yīng)。結(jié)果成功構(gòu)建了含有"融合免疫佐劑Lipo多肽與包膜蛋白EDIII區(qū)"的重組甲病毒質(zhì)粒DREP-LipoEDIII。DREP-LipoEDIII免疫小鼠后可以誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性抗體,抗體效價(jià)為1∶160?乖碳ば∈笃⒘馨图(xì)胞可以產(chǎn)生IFN-r、IL-4、IL-10細(xì)胞因子,實(shí)驗(yàn)組的濃度明顯高于對(duì)照組。結(jié)論在不需要加入任何外源佐劑的情況下,本研究構(gòu)建的融合免疫佐劑Lipo多肽的登革四價(jià)疫苗能夠誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生特異性的體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答,且以細(xì)胞免疫應(yīng)答為主,為今后新型登革病毒四價(jià)疫苗的研究奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 溫州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院人體寄生蟲學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: 登革病毒 包膜蛋白 甲病毒載體 四價(jià)疫苗
【基金】:浙江省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.LY13C080001)資助~~
【分類號(hào)】:R392-33
【正文快照】: 浙江省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.LY13C080001)資助登革病毒(Dengue,DEN)屬于黃病毒科、黃病毒屬,包括4種血清型,均可以經(jīng)蚊媒傳播引起人類登革熱[1]。初次感染登革病毒后所產(chǎn)生的抗體只能對(duì)相應(yīng)血清型的病毒產(chǎn)生保護(hù)作用,當(dāng)再次感染其它型別的病毒時(shí),會(huì)由于抗體依賴性病毒感染增強(qiáng)
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7 夏文俊邋記者 曾星;“五一”赴印尼等國(guó)旅行需防范登革熱[N];中國(guó)國(guó)門時(shí)報(bào);2007年
8 記者 孫夢(mèng);登革熱診療指南發(fā)布[N];健康報(bào);2014年
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本文關(guān)鍵詞:融合免疫佐劑Lipo多肽與包膜蛋白EDⅢ區(qū)的登革病毒四價(jià)疫苗的構(gòu)建及免疫效應(yīng)研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
,本文編號(hào):433532
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