本文關(guān)鍵詞：鼠源吲哚胺2,3-雙加氧酶活性檢測方法的建立，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的建立鼠源吲哚胺2,3-雙加氧酶(mouse indoleamine 2,3-dioxygenase,mIDO)活性檢測方法。方法利用基因工程方法表達純化重組mIDO(recombinant mIDO,rmIDO),建立酶水平mIDO活性檢測體系;構(gòu)建過表達mIDO的小鼠Lewis肺癌(Lewis lung cancer,LLC)細胞株,建立細胞水平mIDO活性檢測體系。比較L-1-甲基色氨酸(L-1-methyl tryptophan,L-1-MT)在酶及細胞水平上對mIDO及人源IDO(human IDO,hIDO)的抑制作用,測定抑制類型、抑制常數(shù)Ki值及半數(shù)抑制濃度(IC50)值。結(jié)果 L-1-MT對mIDO和hIDO均有抑制作用,抑制類型及抑制常數(shù)Ki值相似,但IC50值在酶水平及細胞水平上均有差異。結(jié)論 mIDO酶活性檢測體系是篩選IDO抑制劑的有效工具,與hIDO酶活性檢測體系聯(lián)用,能反映種屬差異,可更好地利用小鼠模型來替代人類進行IDO抑制劑治療疾病的研究。
【作者單位】： 復(fù)旦大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物化學(xué)系;云南天然產(chǎn)物與生物制藥協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關(guān)鍵詞】： 吲哚胺 -雙加氧酶 鼠源 人源 活性檢測體系 L--甲基色氨酸
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81373396) 高等學(xué)校博士學(xué)科點專項科研基金(20130071110037) 上海市科委生物醫(yī)藥重點課題(12431900204)~~
【分類號】：R392-33
【正文快照】： 吲哚胺2,3-雙加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)是哺乳動物中催化色氨酸沿著犬尿氨酸途徑(kynurenine pathway)代謝的第一個限速酶[1],也是細胞內(nèi)一種含亞鐵血紅素的單體胞質(zhì)蛋白酶,最早被發(fā)現(xiàn)于1967年[2],廣泛分布于人和動物的細胞和組織中[3]。人源IDO(human IDO,hID

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1 趙雪娜;武國棟;孫麗霞;黃山英;王慶民;薛彤彤;王晶翼;;腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體的表達及其活性檢測[J];生物技術(shù);2011年04期

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3 周寶宏,馬大龍,龐建,宋泉聲,狄春輝,肖波,馮嵐,龍振洲;人重組IL-8在大腸桿菌中表達及其活性檢測[J];中國免疫學(xué)雜志;1991年04期

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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 王英明;不同亞型重組人白細胞介素8蛋白表達、純化與活性檢測[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

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