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姜黃素修飾的絲素蛋白生物材料對細(xì)胞衰老的調(diào)控

發(fā)布時間:2017-06-07 08:30

  本文關(guān)鍵詞:姜黃素修飾的絲素蛋白生物材料對細(xì)胞衰老的調(diào)控,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:隨著生活水平的提高和人口老齡化加劇,抗衰老越來越受到人們關(guān)注。生物體內(nèi)氧化損傷是機(jī)體衰老的重要原因。姜黃素是一種理想的自由基清除劑,并且具有抗菌、消炎等多重功效,但因其易被氧化失活,在生物醫(yī)用方面應(yīng)用受到了很大的限制。絲素蛋白是一種天然大分子蛋白,具有良好的生物相容性,機(jī)械性性能以及可加工性。大量研究表明,絲素蛋白可以作為生物活性分子載體,有效維持其生物活性并提高藥物作用。本文通過向絲素蛋白溶液中添加乙醇和PEG,制備了姜黃素/絲素蛋白膜和姜黃素/絲素蛋白納米顆粒。通過SEM,FT-IR,DSC等分析了其形貌和結(jié)構(gòu)等,發(fā)現(xiàn)經(jīng)誘導(dǎo)后的絲素蛋白主要為β折疊結(jié)構(gòu)。研究姜黃素從膜中和納米顆粒中的釋放情況,發(fā)現(xiàn)絲素蛋白可以很好地調(diào)控姜黃素釋放,達(dá)到緩釋效果。DPPH自由基清除結(jié)果表明絲素蛋白可以更好的保持姜黃素的生物活性。進(jìn)一步研究了姜黃素與絲素蛋白對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)衰老的調(diào)控,將姜黃素以三種不同方式與細(xì)胞作用后,檢測了所培養(yǎng)細(xì)胞的增殖和活力,P53、P16、HSP70基因表達(dá)以及β-半乳糖苷酶水平等衰老指標(biāo),發(fā)現(xiàn)游離姜黃素、姜黃素納米顆粒、姜黃素與絲素蛋白膜結(jié)合后均可以不同程度的延緩細(xì)胞衰老,且抗衰老效果與姜黃素添加劑量和培養(yǎng)時間有一定關(guān)系,姜黃素與絲素蛋白結(jié)合后的抗衰老效果優(yōu)于游離姜黃素。綜上所述,絲素蛋白作為一種優(yōu)異的活性分子載體,可以很好地穩(wěn)定姜黃素,提高姜黃素的利用價值,開發(fā)有效延緩細(xì)胞衰老的新技術(shù)。姜黃素與絲素蛋白結(jié)合的模式可以更廣泛的應(yīng)用于組織工程方面。
【關(guān)鍵詞】:姜黃素 絲素蛋白 BMSCs 抗衰老
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R318.08;R339.38
【目錄】:
  • 中文摘要4-5
  • Abstract5-11
  • 第一章 引言11-22
  • 1.1 衰老與抗衰老11-16
  • 1.1.1 衰老機(jī)制11
  • 1.1.2 抗衰老的意義11-12
  • 1.1.3 干細(xì)胞在抗衰老研究中的重要意義12-13
  • 1.1.4 衰老的指標(biāo)13-16
  • 1.2 天然抗氧化劑16-18
  • 1.2.1 天然抗氧化劑概述16-17
  • 1.2.2 天然抗氧化劑在抗衰老領(lǐng)域的應(yīng)用17-18
  • 1.3 天然蠶絲蛋白18-20
  • 1.3.1 天然蠶絲蛋白的性能和結(jié)構(gòu)18-19
  • 1.3.2 天然蠶絲蛋白在組織工程上的應(yīng)用19
  • 1.3.3 天然蠶絲蛋白在穩(wěn)定生物活性分子上的應(yīng)用19-20
  • 1.4 本課題的研究目的和內(nèi)容20-22
  • 第二章 游離姜黃素對細(xì)胞衰老的調(diào)控22-35
  • 2.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器22-23
  • 2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑和材料22-23
  • 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器23
  • 2.2 實(shí)驗(yàn)方法23-27
  • 2.2.1 再生蠶絲蛋白溶液的制備23-24
  • 2.2.2 絲素蛋白膜的制備24
  • 2.2.3 掃描電子顯微鏡(SEM)測試24
  • 2.2.4 紅外光譜(FT-IR)測試24
  • 2.2.5 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的提取和純化24-25
  • 2.2.6 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)25
  • 2.2.7 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖檢測25
  • 2.2.8 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的活力檢測25
  • 2.2.9 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的基因表達(dá)檢測25-27
  • 2.2.10 絲素蛋白膜對姜黃素的吸附檢測27
  • 2.3 結(jié)果與討論27-34
  • 2.3.1 絲素蛋白膜的形貌27-28
  • 2.3.2 絲素蛋白膜的分子結(jié)構(gòu)28-29
  • 2.3.3 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)的純化29-30
  • 2.3.4 游離姜黃素對細(xì)增殖的影響30-31
  • 2.3.5 游離姜黃素對細(xì)胞的活力的影響31
  • 2.3.6 游離姜黃素對細(xì)胞衰老基因表達(dá)的影響31-33
  • 2.3.7 在細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中絲素蛋白對姜黃素的吸附33-34
  • 2.4 本章小結(jié)34-35
  • 第三章 姜黃素/絲素蛋白復(fù)合材料的制備和表征35-47
  • 3.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器35-36
  • 3.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑和材料35-36
  • 3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器36
  • 3.2 實(shí)驗(yàn)方法36-38
  • 3.2.1 再生蠶絲蛋白溶液的制備(同 2.2.1)36
  • 3.2.2 姜黃素/絲素蛋白膜的制備36
  • 3.2.3 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒的制備36-37
  • 3.2.4 掃描電子顯微鏡(SEM)測試(同 2.2.3)37
  • 3.2.5 紅外光譜(FT-IR)測試(同 2.2.4)37
  • 3.2.6 差式掃描熱量(DSC)分析37
  • 3.2.7 激光共聚焦檢測37
  • 3.2.8 粒徑分析37
  • 3.2.9 姜黃素在絲素蛋白膜中的釋放檢測37-38
  • 3.2.10 細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境下姜黃素絲素蛋白膜中的活性穩(wěn)定性檢測38
  • 3.3 結(jié)果與討論38-45
  • 3.3.1 姜黃素/絲素蛋白復(fù)合材料的形貌38-40
  • 3.3.2 姜黃素/絲素蛋白復(fù)合膜的二級結(jié)構(gòu)40-41
  • 3.3.3 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒的二級結(jié)構(gòu)41-42
  • 3.3.4 姜黃素在絲素蛋白膜中的分布42
  • 3.3.5 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒的粒徑分析42-43
  • 3.3.6 抽提液環(huán)境下姜黃素從絲素蛋白膜中的釋放43-44
  • 3.3.7 細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境下姜黃素從絲素蛋白膜中的釋放44
  • 3.3.8 細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境下姜黃素在絲素蛋白膜中的活性穩(wěn)定性44-45
  • 3.3.9 細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境下姜黃素在納米顆粒中的釋放45
  • 3.4 本章小結(jié)45-47
  • 第四章 姜黃素/絲素蛋白復(fù)合材料對細(xì)胞衰老的調(diào)控47-59
  • 4.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器47-48
  • 4.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑47-48
  • 4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器48
  • 4.2 實(shí)驗(yàn)方法48-50
  • 4.2.1 再生蠶絲蛋白溶液的制備(同 2.2.1)48
  • 4.2.2 姜黃素/絲素蛋白膜的制備(同 3.2.2)48
  • 4.2.3 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒的制備(同 3.2.3)48
  • 4.2.4 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的提取和純化(同 2.2.4)48
  • 4.2.5.姜黃素絲素蛋白膜上培養(yǎng)細(xì)胞48
  • 4.2.6 添加姜黃素納米顆粒培養(yǎng)細(xì)胞48-49
  • 4.2.7 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞衰老的檢測49
  • 4.2.8 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的 β-半乳糖苷酶表達(dá)49
  • 4.2.9 絲素蛋白膜對姜黃素納米顆粒的吸附49-50
  • 4.3 結(jié)果與討論50-58
  • 4.3.1 姜黃素/絲素蛋白膜對細(xì)胞增殖的影響50-51
  • 4.3.2 姜黃素/絲素蛋白膜對細(xì)胞活力的影響51
  • 4.3.3 姜黃素/絲素蛋白膜對細(xì)胞衰老基因表達(dá)的影響51-53
  • 4.3.4 姜黃素/絲素蛋白膜對細(xì)胞 β-半乳糖苷酶表達(dá)的影響53-54
  • 4.3.5 姜黃素/納米顆粒對細(xì)胞增殖的影響54
  • 4.3.6 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒對細(xì)胞活力的影響54-55
  • 4.3.7 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒對細(xì)胞衰老基因表達(dá)的調(diào)控55-57
  • 4.3.8 姜黃素/絲素蛋白納米顆粒對細(xì)胞 β-半乳糖苷酶表達(dá)的影響57-58
  • 4.4 本章小結(jié)58-59
  • 第五章 結(jié)論和展望59-61
  • 5.1 結(jié)論59-60
  • 5.2 展望60-61
  • 參考文獻(xiàn)61-68
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文68-69
  • 致謝69-71

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3 胡元斌;絲素蛋白/磷酸八鈣復(fù)合多孔支架的成骨性能研究[D];蘇州大學(xué);2016年

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3 李靜靜;絲素蛋白/介孔生物玻璃復(fù)合材料的制備及止血抗菌性能的研究[D];浙江理工大學(xué);2016年

4 陳麗燦;薯莨色素對莨紗綢蠶絲蛋白結(jié)構(gòu)的影響[D];浙江理工大學(xué);2016年

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6 湯棟梁;基于絲素蛋白的反蛋白石結(jié)構(gòu)三維細(xì)胞支架的構(gòu)建研究[D];東南大學(xué);2015年

7 劉晨;離心紡不同分子量再生絲素蛋白的可紡性研究[D];浙江理工大學(xué);2016年

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  本文關(guān)鍵詞:姜黃素修飾的絲素蛋白生物材料對細(xì)胞衰老的調(diào)控,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號:428598

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