本文關(guān)鍵詞：抗人蔗糖酶卵黃抗體的制備及其穩(wěn)定性和體外活性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:制備抗人蔗糖酶(Sucrase,SUC)卵黃抗體(egg yolk immunoglobulin Y,Ig Y)并對其穩(wěn)定性、體外活性進行研究。方法:采用人SUC蛋白為抗原,免疫海蘭灰蛋雞,水稀釋和鹽析法提取純化Ig Y;間接ELISA法監(jiān)測抗體效價變化并評價其穩(wěn)定性;SDS-PAGE和Western blot分析Ig Y的純度和特異性;PNPG法測Ig Y對α-葡萄糖苷酶的體外抑制效果。結(jié)果:初次免疫10 d后檢測到Ig Y,40 d后效價最高達到1∶12 800;提取的Ig Y重鏈和輕鏈分別在65 k D和25 k D處,且能夠與抗原蛋白特異性結(jié)合;29~69℃范圍內(nèi)水浴15 min和p H 4~7之間37℃水浴4 h,抗體效價無變化;胰蛋白酶與胃蛋白酶作用Ig Y2 h,抗體效價降至一半,延長作用時間,Ig Y對胃蛋白酶耐受力較胰蛋白酶耐受力更強;Ig Y對α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用,呈現(xiàn)劑量相關(guān)性,半抑制濃度(IC50)值為0.540 mg/ml。結(jié)論:抗人蔗糖酶卵黃抗體(S-Ig Y)的成功制備為后續(xù)用于2型糖尿病大鼠模型體內(nèi)實驗研究奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】： 遵義醫(yī)學(xué)院珠海校區(qū)生物工程系;齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院病原教研室;
【關(guān)鍵詞】： 蔗糖酶 雞 卵黃抗體 穩(wěn)定性
【基金】：貴州省科技廳基金項目[黔科合SY字(2012)3091] 2010年遵義醫(yī)學(xué)院青年科研啟動基金(F-501)資助
【分類號】：R392
【正文快照】： 1本文受貴州省科技廳基金項目[黔科合SY字(2012)3091]和2010年遵義醫(yī)學(xué)院青年科研啟動基金(F-501)資助。2齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院病原教研室,齊齊哈爾161000。糖尿病是以高血糖為特征的慢性代謝性疾病。α-葡萄糖苷酶抑制劑是目前臨床治療2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)口

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本文編號：427924